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200KV透過型電子顕微鏡を用いた高分解能クライオEMデータセットのルーチンコレクション
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Routine Collection of High-Resolution cryo-EM Datasets Using 200 KV Transmission Electron Microscope
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200KV透過型電子顕微鏡を用いた高分解能クライオEMデータセットのルーチンコレクション

DOI:
10.3791/63519-v

•

09:49 min

•

March 16, 2022

•

, , , , , , , , ,
1Materials and Structural Analysis Division,Thermo Fisher Scientific, 2Max Planck Institute of Biochemistry, Molecular Structural Biology, 3Materials and Structural Analysis Division,Thermo Fisher Scientific

Chapitres

  • 00:04Introduction
  • 01:27Grid Loading, Mapping, and Selection of Best Cryo-EM Grids for Data Collection
  • 02:36Setting up a Data Collection Session in the Single Particle Analysis Software
  • 05:44Final Microscope Alignments Before Starting Data Collection
  • 07:15Results: Gallery of Grids, Cryo-EM Reconstruction of Apo-Ferritin, and Effect of Energy Filtering on Cryo-EM Images
  • 08:56Conclusion

Summary

Traduction automatique

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高分子の高解像度クライオEMマップは、200kV TEM顕微鏡を使用することによっても達成できます。このプロトコルは、200kV TEMを使用して高解像度データセットを正常に収集するために不可欠な、正確な光学系アライメント、データ収集スキーム、およびイメージング領域の選択を設定するためのベストプラクティスを示しています。

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Keywords: Cryo-EM200 KV TEMHigh-resolutionProtein StructureProtein ComplexesMolecular MechanismsStructure-based Drug DesignApoferritinProteasomeAuto GridsLiquid NitrogenAutomated Data CollectionAtlasEPU

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