Journal
/
Biochimie
/
Rutinemessig innsamling av kryo-EM-datasett med høy oppløsning ved bruk av 200 KV-transmisjonselektronmikroskop
Journal JoVE
Biochimie
This content is Free Access.
Journal JoVE Biochimie
Routine Collection of High-Resolution cryo-EM Datasets Using 200 KV Transmission Electron Microscope

Rutinemessig innsamling av kryo-EM-datasett med høy oppløsning ved bruk av 200 KV-transmisjonselektronmikroskop

DOI:
10.3791/63519-v

•

09:49 min

•

March 16, 2022

•

, , , , , , , , ,
1Materials and Structural Analysis Division,Thermo Fisher Scientific, 2Max Planck Institute of Biochemistry, Molecular Structural Biology, 3Materials and Structural Analysis Division,Thermo Fisher Scientific

Chapitres

  • 00:04Introduction
  • 01:27Grid Loading, Mapping, and Selection of Best Cryo-EM Grids for Data Collection
  • 02:36Setting up a Data Collection Session in the Single Particle Analysis Software
  • 05:44Final Microscope Alignments Before Starting Data Collection
  • 07:15Results: Gallery of Grids, Cryo-EM Reconstruction of Apo-Ferritin, and Effect of Energy Filtering on Cryo-EM Images
  • 08:56Conclusion

Summary

Traduction automatique

Traduction automatique

Høyoppløselige kryo-EM-kart over makromolekyler kan også oppnås ved å bruke 200 kV TEM mikroskoper. Denne protokollen viser de beste fremgangsmåtene for å angi nøyaktige optikkjusteringer, datainnsamlingsordninger og valg av bildeområder som alle er avgjørende for vellykket innsamling av datasett med høy oppløsning ved hjelp av en 200 kV TEM.

Tags

Cryo-EM200 KV TEMHigh-resolutionProtein StructureProtein ComplexesMolecular MechanismsStructure-based Drug DesignApoferritinProteasomeAuto GridsLiquid NitrogenAutomated Data CollectionAtlasEPU

Article

Embed

AJOUTER À LA PLAYLIST

Usage Statistics

Vidéos Connexes

Høyoppløselig enkeltpartikkelanalyse fra elektronkryomikroskopi bilder ved hjelp av SPHIRE

Kryo-EM og enkeltpartikkelanalyse med scipion

Utarbeidelse av prøvestøttefilmer i transmisjonselektronmikroskopi ved hjelp av en støtteflytblokk

Forbereder lameller fra glassaktige biologiske prøver ved hjelp av et dual-beam skanning elektronmikroskop for kryo-elektrontomografi

Klargjøring av høytemperatur prøvegitter for Cryo-EM

Mikropattering overføring elektronmikroskopinett til direkte celleposisjonering i hele celler Cryo-Electron Tomography Arbeidsflyter

Kvantifisering av subcellulær glykogenfordeling i skjelettmuskulaturfibre ved hjelp av transmisjonselektronmikroskopi

En robust kryo-elektronmikroskopi (cryo-EM) prosesseringsarbeidsflyt med kryoSPARC, RELION og scipion

Fremme høyoppløselig avbildning av virussamlinger i væske og is

Kryo-EM-datainnsamling med enkeltpartikler med scenetilt ved bruk av Leginon

Read Article