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哺乳類細胞からのユビキチン化p53タンパク質の精製

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Biochimie

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Purification of Ubiquitinated p53 Proteins from Mammalian Cells

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哺乳類細胞からのユビキチン化p53タンパク質の精製

DOI:

10.3791/63602-v

•

10:55 min

•

March 21, 2022

•

Di Wu, Mengfan He, Dawei Li

¹Center for Translational Medicine,The Affiliated Zhangjiagang Hospital of Soochow University

Chapitres

00:05Introduction
00:43Plasmid Transfection
02:16Cell Collection
02:52Purification of Ubiquitinated Proteins under Nondenaturing Conditions
05:01Purification of Ubiquitinated Proteins under Denaturing Conditions
07:49Detection of Purified Ubiquitinated Proteins by Western Blotting
08:29Results: Ubiquitinated p53 Proteins Purified under Nondenaturing and Denaturing Conditions
10:22Conclusion

Summary

Traduction automatique

このプロトコルは、例としてp53腫瘍抑制タンパク質を使用して哺乳動物細胞からユビキチン化タンパク質を精製するための段階的な方法を記載している。ユビキチン化p53タンパク質を、ストリンジェントな非変性および変性条件下で細胞から精製した。

Tags

Keywords: Ubiquitinated P53 Protein Purification Mammalian Cells Ubiquitination Liposome Transfection MG132 FLAG Lysis Buffer Protease Inhibitor

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