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Somministrazione mediata da elettroporazione di ribonucleoproteine Cas9 e mRNA in epatociti primari di topo appena isolati
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Journal JoVE Bio-ingénierie
Electroporation-Mediated Delivery of Cas9 Ribonucleoproteins and mRNA into Freshly Isolated Primary Mouse Hepatocytes
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Somministrazione mediata da elettroporazione di ribonucleoproteine Cas9 e mRNA in epatociti primari di topo appena isolati

DOI:
10.3791/63828-v

•

09:45 min

•

June 02, 2022

•

, , , ,
1Department of Bioengineering,Clemson University, 2Godley Snell Research Center,Clemson University

Chapitres

  • 00:04Introduction
  • 01:18Animal Surgery
  • 03:26Hepatocyte Isolation
  • 04:54Electroporation and Cell Culture
  • 07:46Results: Generating Electroporation-Assisted CRISPR-Cas9 Edits in Freshly Isolated Mouse Hepatocytes
  • 09:06Conclusion

Summary

Traduction automatique

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Questo protocollo descrive le tecniche per isolare gli epatociti primari di topo dal fegato e l'elettroporazione di CRISPR-Cas9 come ribonucleoproteine e mRNA per interrompere un gene bersaglio terapeutico associato a una malattia metabolica ereditaria del fegato. I metodi descritti determinano un'elevata vitalità e alti livelli di modificazione genica dopo l'elettroporazione.

Tags

Keywords: ElectroporationCas9 RibonucleoproteinsMRNAPrimary Mouse HepatocytesGene EditingLiver PerfusionHepatocyte IsolationIn Vitro And In Vivo Disease ModelsAnesthesiaPortal VeinInferior Vena CavaPerfusion SolutionFlow RateLiver SofteningCotton SwabForceps

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