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Focalización génica altamente eficiente mediada por CRISPR/Cas9 en células madre embrionarias para desarrollar modelos de ratón manipulados genéticamente
Journal JoVE
Biologie du développement
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Journal JoVE Biologie du développement
CRISPR/Cas9-Mediated Highly Efficient Gene Targeting in Embryonic Stem Cells for Developing Gene-Manipulated Mouse Models
DOI:

10:57 min

August 24, 2022

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Chapitres

  • 00:04Introduction
  • 01:06Gene Targeting of Embryonic Stem Cells (ESCs)
  • 04:16PCR Genotyping of Targeted ESCs
  • 07:02Preparation of Eight-Cell Stage Embryo and Microinjection of ESCs
  • 09:49Results: Screening of Targeted ESC Clones
  • 10:10Conclusion

Summary

Traduction automatique

Aquí presentamos un protocolo para desarrollar modelos de ratón modificados genéticamente utilizando células madre embrionarias, especialmente para ADN grande knock-in (KI). Este protocolo se ajusta utilizando la edición del genoma CRISPR / Cas9, lo que resulta en una eficiencia de KI significativamente mejorada en comparación con el método convencional de orientación de ADN linealizado mediado por recombinación homóloga.

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