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Fracionamento subcelular para o isolamento de componentes sinápticos do cérebro murino
Journal JoVE
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Journal JoVE Neurosciences
Subcellular Fractionation for the Isolation of Synaptic Components from the Murine Brain

Fracionamento subcelular para o isolamento de componentes sinápticos do cérebro murino

DOI:
10.3791/64574-v

•

12:14 min

•

September 14, 2022

•

, ,
1Department of Neurology,Yale University, 2Department of Neuroscience,Yale University, 3Interdepartmental Neuroscience Program,Yale University

Chapitres

  • 00:04Introduction
  • 01:37Mouse Brain Excision
  • 03:32Synaptosome Preparation
  • 05:23Hypotonic Lysis
  • 06:24Synaptic Vesicle Isolation
  • 07:35Synaptic Plasma Membrane Isolation
  • 10:02Results: Electron Microscopy of Synaptosomes and Immunoblot Analysis of Subcellular Fractions
  • 11:00Conclusion

Summary

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Este protocolo apresenta um método robusto e detalhado para obter sinaptossomos, vesículas sinápticas e outras frações sinápticas altamente puras do cérebro de camundongos. Este método permite a avaliação de processos sinápticos, incluindo a análise bioquímica da localização e função de proteínas com resolução compartimental.

Tags

Subcellular FractionationSynapsesSynaptosomeBrain DisordersProtein DistributionProtein ActivityBuffer Preparation

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