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eGFPの構成的発現を有する リーシュマニア 種株の開発
Journal JoVE
Génétique
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Journal JoVE Génétique
Development of Leishmania Species Strains with Constitutive Expression of eGFP
DOI:

10:03 min

April 21, 2023

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Chapitres

  • 00:04Introduction
  • 00:27Amplification and Insertion of the eGFP Gene into the pLEXSY‐2.1 Vector
  • 02:39Linearization of the pLEXSY Expression Plasmid
  • 03:26Transfection of L. panamensis and L. donovani by Electroporation
  • 05:00Polyclonal Selection in Culture
  • 06:41Confirmation of Genomic Integration
  • 07:09Cloning by Limiting Dilution
  • 08:12Results: Confirmation of eGFP Cassette Expression and Chromosomal Insertion
  • 09:40Conclusion

Summary

Traduction automatique

ここでは、pLEXSYシステムを用いてeGFPの遺伝子を安定な統合導入遺伝子として発現するL. パナメンシス 株および L.ドノバニ 株を作製するために用いられる方法論について述べる。トランスフェクトされた寄生虫を限界希釈によってクローニングし、両方の種で最も高い蛍光強度を有するクローンを、薬物スクリーニングアッセイでさらに使用するために選択しました。

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