일방적 hindlimb의 국소 빈혈의 유도에 대한 수술은 레이저 도플러 재관류 이미징에 의해 국소 빈혈의 확인과 증명합니다.
미국에서는, 말초 동맥 질환 (PAD)는 만 10 개인에 영향을, 또한 세계적으로 유행이다. 증상 완화 의료 치료가 제한됩니다. 수술이나 endovascular 개입 어떤 개인 유용하지만 장기적인 결과는 종종 실망입니다. 그 결과, PAD를 치료하는 새로운 치료법을 개발하기위한 필요가있다. murine hindlimb의 국소 빈혈 준비는 PAD의 모델, 새로운 치료법을 테스트하는 데 유용합니다. 이러한 관상이나 대뇌 동맥 내고 같은 조직 국소 빈혈의 다른 모델에 비해, 대퇴 동맥 내고는 허혈성 조직의 간단한 모델을 제공합니다. 이 모델의 다른 장점은 대퇴 동맥과 낮은 사망률에 대한 접근의 용이성입니다.
이 비디오에서는, 우리는 일방적 hindimb의 국소 빈혈의 murine 모델에 대한 방법론을 보여줍니다. 모델을 생성하고 평가하기위한 구체적인 자료와 절차는 레이저 도플러 영상으로 사지 재관류의 평가를 포함하여 설명한다. 이 프로토콜은 또한 황 외 의해 증명 세포. 1의 이식과 비침습 추적 이용하실 수 있습니다.
계획 및 hindlimb 국소 빈혈 모델을 수행하는 동안 고려해야 할 다양성의 일부 소스가 있습니다. 첫째, 국소 빈혈의 수준은 사이드 지점의와 관련하여 결합의 위치에 따라 다를 수 있습니다. 따라서 모델의 일관성을 위해, 동물 동맥 내고 같은 수준을 받아야한다. 허혈성 회복 다양성의 또 다른 원본이 세 동물 (80~10개월 세)보다 빠르고보다 완벽한 복구 속도를 가지고 젊은 동물 (6~8주 세)와 함께, 동물의 연령과 관련이로 hemodynamic (예에 의해 평가 레이저 도플러 재관류) 또는 기능 (예 : 러닝 머신 테스트) 측정합니다. 그룹 사이에 큰 차이가 치료 개입과 함께 관찰 수 있기 때문에 하나 angiogenic 에이전트를 평가되는 연구는, 기존의 동물을 사용하는 것이 바람직있을 수 있습니다. 반대로 하나가 안티 angiogenic 요인을 평가하고있는 연구, 그것은 효과가 크기 3 극대화하기 위해 어린 동물을 사용하는 것이 바람직있을 수 있습니다.
올바르게 수행할 경우, 출혈, 감염, 또는 사망 등과 같은 최소한의 합병증이있을 것입니다. 출혈은 대퇴 정맥 또는 다른 선박, 멸균 면봉과 적당한 압력의 사고로 장애가 발생하면 출혈이 멈출 때까지 작은 주걱이나 거즈가 출혈의 사이트에 적용해야 날붙이. 감염의 징후를 보여주는 동물은 안티 – infective 에이전트로 치료해야합니다. 중요한 진물을 전시 동물 beeuthanized해야 할 수도 있습니다. 이 합병증은 나이가 동물보다 일반적인 있으며, 이러한 BALB C 마우스 4와 같은 몇 가지 변종, 인치 또한, hindlimb의 국소 빈혈 모델은 중간 고통에 온화 발생할 수 있습니다. 통증 치료를 위해 필요한만큼 따라서 같은 buprenorphine 또는 carprofen과 같은 진통제는 IACUC의 권고에 따라 관리되어야합니다.
결론적으로, 우리는 hindlimb 국소 빈혈의 murine 모델 PAD 공부를위한 간단하고 재현성 방법을 증명하고있다. 레이저 도플러 영상 분석 hindlimb의 국소 빈혈 모델은 혈관 pathologies를 공부 및 치료 후보를 평가하기위한 훌륭한 시스템입니다.
저자 안드레아 액스텔, 사토시 이토, MD, 제프 Velotta, MD, 그랜트 호이트, 로버트 C. 로빈스, MD, 진 유, MD, 팀 도일, 박사, 그리고 기술 지원을위한 스탠포드 작은 동물 이미징 핵심 주셔서 감사합니다. 저자는 또한, 수의 장비의 지원을 오전 비크포드 (주) 감사합니다. 이 연구는 국립 보건원에서 연구 기금 (R01 HL – 75774, R01 CA098303, R21 HL085743, 1K12 HL087746), 캘리포니아 대학 (15IT – 0257 및 1514RT – 0169)의 캘리포니아 담배 관련 질병 연구 프로그램에 의해 지원되었다 및 재생 의료 (RS1 – 00183)의 캘리포니아 연구소. NH는 미국 심장 협회에서 친교에 의해 지원됩니다.
Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
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Surgical Tools | Tool | Fine Science Tools | ||
Constix Cotton Swabs | Tool | Contec | SC-4 | |
Betadine (Povidone-iodine) | Reagent | PDI | ||
70% alcohol | Reagent | Kendall | ||
Phosphate Buffered Saline | Reagent | Invitrogen | ||
7-0 silk suture | Tool | Genzyme | ||
5-0 vicryl suture | Tool | Ethicon | ||
Electric shaver | Tool | GE | ||
Cautery | Tool | Baxter | ||
Laser Doppler and PeriScan PIM 3 System | Equipment | Perimed |