慢性のためのマイクロドライブアレイ in vivoで録音：四極管アセンブリ
Summary
このプロトコルでは、ラットの慢性的な電気生理学的記録のために設計されたマイクロドライブアレイで使用するためのtetrodesを作製し、条件する方法を示しています。さらに、我々は、インストールのアース線と保護円錐を含むマイクロドライブアレイの建設、最終段階を示しています。
Abstract
テトロード、4つの電極の束は、生体内で複数のニューロンの同時記録のための貴重なツールであることが実証されています。テトロードのチャネルを介した活動電位署名の差動振幅は、マルチユニットの信号から単一ユニットの活性を分離することができます。正確に四極管の定位位置と深さを制御する能力は、脳の領域全体で整合性のとれた神経活動を研究するために重要です。マイクロドライブアレイと組み合わせることで、それは数日から数週間の経過を正確に配置し、多くのtetrodesの安定した制御を達成することが可能である。このプロトコルでは、我々は、ラットにおける慢性的なin vivoでの録音のためのマルチドライブテトロード配列にtetrodesをインストール、基本的なツールや材料を使用してtetrodesを作製し、条件にする方法、マイクロドライブのアレイへのアース線の接続を確立し実証する、と環境との物理的な接触からtetrodesを保護するために、マイクロドライブのアレイ上に保護用のコーンを取り付けます。
Protocol
Discussion
このプロトコルは、2つの部分のプロトコルの第2回目です："in vivoで録音慢性用マイクロドライブアレイ。"マイクロドライブアレイと四極管の組み合わせが目を覚ましに多くのニューロンの同時録画を取得するための強力なツールである、動物の準備を振る舞っ。うまくいけば、我々はあなたがあなた自身の研究室で電気生理学的記録を開始または改善するために必要となるため?…
Acknowledgements
我々は、ビデオに示されている自動、電動テトロードツイスター装置の彼の設計と建設じゅんfor山本に感謝します。さらに、我々はマイクロドライブやラボでのテトロードの技術開発への貢献のためにすべての過去および現在のウィルソンの研究室のメンバーに感謝します。
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Panavise | Tool | Panavise | Model 301 | Holds either micro-drive array or serrated scissors |
| Modified Xcelite 378M Pliers | Tool | Newark | 96F8903 | For inserting connector board pins. To make, remove 2mm from one tip of the pliers. |
| Slow Cure Glue | Material | Great Planes (Champaign, IL) | GPMR6015 | To glue the tetrode to the micro-drive |
| Gold Plating Solution | Material | Neuralynx | Sifco Selectron Gold NC | Contains gold particles for electroplating |
| Current Generator | Tool | World Precision Instruments | A365D-B | A.K.A. Stimulus Isolator. Used to electroplate gold solution onto electrode tips. |
| Impedance Meter | Tool | BAK Electronics | IMP-1 / 6662 / 2788 | To check impedance of electrodes |
| Hot Air Gun | Tool | Steinel (Germany) | HG 3002 LCD | To fuse electrodes together to make tetrode |
| Accu-Tek Carbofib Tip Tweezers | Tool | Aven (Ann Arbor, MI) | 18768 (Pattern 304) | For handling tetrodes |
| Alligator Clip | Tool | Fine Science Tools | 18050-35 | A.K.A. Bulldog serrefine. To clip the tetrodes together during twisting |
| Micro Dissecting Scissors | Tool | Biomedical Research Instruments | 25-1000 | For general cutting of tetrode/electrode wire |
| Iris Toughcut Serrated Scissors | Tool | Fine Science Tools | 14058-09 | For final cut of tetrodes |
| Teflon Coated Stainless Steel Wire | Material | A-M Systems (Carlsborg, WA) | 790500 | Ground wire |
| 12.5 micron nichrome wire | Material | Kanthal Palm Coast | Rediohm-800 1/4 HARD PAC COATING | Polyimide coated micro-wire for making tetrodes. |
| Tetrode Twister | Tool | Neuralynx | Tetrode Assembly Station | Increases the speed and consistency of tetrode fabrication. |
| Silver Paint | Material | GC Electronics | 22-023 | For connecting the micro-electrode wires of the tetrode to the connector pins (see Discussion) |
| X-Acto Knife Handle | Material | MSC Direct | X3001 | For constructing a micro-drive holding device. |
| 26 Pin, 2 Row Connector | Material | Mill-max | 852-10-026-30-001000 | For constructing a micro-drive holding device. |
Riferimenti
- Gray, C. M., Maldonado, P. E., Wilson, M., McNaughton, B. Tetrodes markedly improve the reliability and yield of multiple single-unit isolation from multi-unit recordings in cat striate cortex. J. Neurosci. Methods. 63 (1-2), 43-54 (1995).
