La sonda Microfluidic: funzionamento e utilizzo per l'elaborazione delle superfici localizzate
Summary
In questo video vi presentiamo la sonda microfluidica<sup> 1</sup> (MFP). Vi spieghiamo in dettaglio come assemblare il MFP, montarlo in cima a un microscopio invertito, e allinearlo rispetto alla superficie del substrato e, infine, mostrano come usarlo per elaborare una superficie substrato immerso in una soluzione tampone.
Abstract
Dispositivi microfluidici permettono test deve essere eseguito utilizzando piccole quantità di campione e sono stati recentemente utilizzati per controllare il microambiente delle cellule. Microfluidica è comunemente associato con microcanali chiuse che limitano il loro uso per campioni che possono essere introdotte, e colto nel caso delle cellule, all'interno di un volume confinato. D'altra parte, micropipetting sistema sono stati utilizzati per perfusione a livello locale le cellule e le superfici, in particolare con push-pull configurazioni in cui si agisce pipetta come sorgente e l'altra come affondare, ma il confinamento del flusso è difficile in tre dimensioni. Inoltre, pipette sono fragili e difficili da posizione e, quindi, sono utilizzati in configurazione statica solo.
La microfluidica sonda (MFP) elude i vincoli imposti dalla costruzione di chiuse e canali microfluidica invece che racchiude il campione nel sistema microfluidica, il flusso microfluidica può essere consegnato direttamente sul campione, e la scansione attraverso il campione, usando la MFP. . L'iniezione e aperture di aspirazione si trovano a poche decine di micrometri l'uno dall'altro in modo che un microjet iniettato il divario è confinato dalle forze idrodinamiche del liquido circostante e interamente aspirato nuovamente dentro l'altra apertura. La microjet può essere lavato tutta la superficie del substrato e fornisce uno strumento preciso per la deposizione localizzata / fornitura di reagenti che possono essere utilizzate su vaste aree mediante la scansione di sonda su tutta la superficie. In questo video vi presentiamo la microfluidica sonda 1 (MFP). Vi spieghiamo in dettaglio come assemblare il MFP, montarlo in cima a un microscopio invertito, e allinearlo rispetto alla superficie del substrato e, infine, mostrano come usarlo per elaborare una superficie substrato immerso in un buffer.
Protocol
Discussion
La sonda microfluidica (MFP) è versatile perché è (i) mobili, (ii) adattabile per essere utilizzato con diversi tipi di reagenti e di substrato e può (iii) essere utilizzato su grandi aree.
Bolle indesiderate può portare alla interruzione del flusso per evitare bolle, tutti i componenti devono essere pieni di liquidi prima del montaggio. Il divario tra la sonda e la superficie è solo di pochi micrometri, ma il mesa è diverse centinaia di micron di larghezza, e distanze nel range di ce…
Acknowledgements
Questo lavoro è stato finanziato dal Fonds de Recherche sur la Nature et les Technologies de Quebec, in Canada la Fondazione per l'Innovazione e la Canadian Institutes of Health Research (CIHR).
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| microfluidic connectors | Upchurch Scientific | Micro- and Nano-tight fittings and sleeves | ||
| 2-component manual dispenser | Conprotec Inc. | DM400 | To dispense and mix PDMS mixture | |
| LabVIEW | National Instruments | Version 8.0 | ||
| Mechanical Convection Oven | VWR | 1330FM | ||
| Glass syringes | Hamilton | |||
| Capillary tubing | Polymicro Technologies | |||
| Plasma Chamber | Tegal Corporation | Plasmaline 415 | ||
| Inverted Microscope | Nikon | TE2000-E | ||
| Syringe pumps | Cetoni | neMESYS | ||
| Sylgard 184 | Ellsworth Adhesives | 184 Sil Elast Kit | ||
| Camera | Photometrics | QuantEM 512SC | ||
| Microscope stage | ||||
| Microfluidic probe holder goniometers | Melles-Griot | 07GON504 | ||
| Linear stage | Applied Scientific Instrumentation | LS-50 | For z-control of the MFP | |
| Manual linear stage | Newport | 443-4 Series | For x- and y- axis control of the MFP | |
| Microscope stage | Applied Scientific Instrumentation | PZ-2000 | With x-, y- and z- control |
