Montage, Tuning und Verwenden eines aperturlosen Near Field Infrared Mikroskop für Protein Imaging
Summary
Die Montage eines Nahfeld-Infrarot-Mikroskop für die Bildgebung Proteinaggregaten beschrieben.
Abstract
Dieses Papier soll den Leser in die Montage und den Betrieb eines Infrarot-Nahfeld-Mikroskop für die Bildgebung jenseits der Beugungsgrenze zu unterweisen. Die apertureless Nahfeld-Mikroskop ist ein Lichtstreuung-type Instrument, das Infrarot-Spektren liefert bei circa 20 nm Auflösung. Eine vollständige Liste der Komponenten und eine Schritt-für-Schritt-Protokoll für den Einsatz vorgesehen ist. Häufige Fehler in der Montage und Instrument Tuning diskutiert. Eine repräsentative Daten gesetzt, dass die sekundäre Struktur eines Amyloid-Fibrillen zeigt vorgestellt.
Protocol
Hintergrund: Aperturlosen Sonde Nahfeld-IR-Mikroskopie bietet eine hohe räumliche Auflösung Bildgebung. Es ist eine relativ neue Technik, bei der ein Ereignis Infrarotstrahl durch eine scharfe Rasterkraftmikroskopie (AFM) Spitze oszillierenden bei der Resonanzfrequenz des Cantilevers nahe an der Probe gestreut wird. Ein IR-Detektor erfasst das Streulicht und bei dieser Resonanzfrequenz oder ihre Harmonischen demoduliert. Auf diese Weise kann der Hintergrund Streuung der fokussierte Laserstra…
Acknowledgements
Wir danken der NSF, NSERC, NIH und ONR.
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Citazione di questo articolo
Paulite, M., Fakhraai, Z., Akhremitchev, B. B., Mueller, K., Walker, G. C. Assembly, Tuning and Use of an Apertureless Near Field Infrared Microscope for Protein Imaging. J. Vis. Exp. (33), e1581, doi:10.3791/1581 (2009).