تشريح 6.5 أجنة الفئران DPC
Summary
عزلة postimplantation مرحلة الأجنة يسمح احد لدراسة وتحليل الجينات الزخرفة الخلية نسب عمليات صنع القرار خلال التطور الجنيني ، ولكن التشريح السليم للجنين في وقت مبكر يمكن أن يكون تحديا. يصف هذا البروتوكول وسيلة لعزل متتالية في وقت مبكر البدائية ، مرحلة أجنة (~ 6.5 أيام تال للجماع [DPC]).
Abstract
يمكن تحليل أنماط التعبير الجيني خلال المراحل المبكرة من التطور الجنيني الثدييات توفر أدلة مهمة حول تفاعل الجينات وظيفة خلية خلية ، وآليات دليل يشير إلى أن الزخرفة الجنينية. ومع ذلك ، يمكن تشريح الجنين الماوس من الساقط بعد وقت قصير من إجراء زرع تكون صعبة ، ومفصلة خطوة بخطوة توثيق هذه العملية غير متوفرة.
نحن هنا لشرح كيفية معزولة بعد الزرع (6.5 DPC) من الأجنة تشريح أولا رحم فأرة حامل (الكشف عن عين قابس المهبلية اليوم coitum poist 0.5) وبعد تشريح الجنين الساقط من الأمهات. يوصف تشريح غشاء رايخرت فضلا عن إزالة مخروط المشيمة الظاهر.
Protocol
Discussion
Postimplantation في الماوس يحدث بين 4.5 DPC والولادة. ويمكن تطبيق هذه الطريقة تشريح ، وأساسا كما وصفها ، لعزل في وقت سابق أو لاحق الأجنة في مرحلة DPC 5،5-8،5.
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Micro Dissecting Forceps serrated, straight | Tool | Roboz | RS-5130 | 2 pairs |
| Micro Dissecting Tweezers Pattern #55 INOX | Tool | Roboz | RS-5010 | 2 pairs |
| Dulbecco’s Phosphate Buffered Saline (1X) | Reagent | Invitrogen | 14190 | |
| Fisherbrand Sterile Polysytrene Petri Dish | Tool | Fisher Scientific | 08-757-12 | |
| 4% Paraformaldehyde in PBS | Reagent | |||
| Straight Sharp-Pointed Dissecting Scissors | Tool | Fisher Scientific | 08-940 | |
| Pregnant female mice | Animal | |||
| Dissecting Microscope | Microscope |
Riferimenti
- Nagy, A., et al. . Manipulating the mouse embryo: A laboratory manual third edition. , (2003).
