Multi-Параметрический Островок Perifusion системы в микрожидкостных устройств Perifusion
Summary
Микрожидкостных устройств perifusion островок был разработан для оценки динамических секреции инсулина несколько островков и одновременное флуоресценции притока кальция и митохондриальной возможных изменений.
Abstract
Микрожидкостных устройств perifusion островок был разработан для оценки динамических секреции инсулина несколько островков и одновременное флуоресценции притока кальция и митохондриальной возможных изменений. Устройство состоит из трех слоев: первый слой содержит массив микромасштабной скважин (500 мкм и диаметром 150 мкм глубина), которые помогают обездвижить островков в то время как воздействию потока и максимально открытой площади островков, второй слой содержит круговой perifusion камеры (3 мм в глубину, 7 мм в диаметре), а третий слой содержит приточно-смешивание канала, который поклонники до введения в perifusion камеры (2 мм в ширину, 19 мм в длину и 500 мкм в высоту) для оптимизации эффективность перемешивания перед входом perifusion камеры. Создание различных градиентов глюкозы в том числе линейных, форму колокола, и квадратные формы также могут быть созданы в микрожидкостных сети perifusion и продемонстрировал.
Protocol
Discussion
Традиционные островок perifusion систем (макроуровне и микромасштабной) имеют некоторые ограничения в том числе сложные настройки и дизайн, высокие технические требования, а также трудности для создания пользовательских предписано химические градиенты в системе. Микрожидкостных системы…
Acknowledgements
Эта работа была поддержана AAUW международной стипендии Adeola Adewola, NIH / NCRR (U42RR023245) Хосе Оберхольцером, и проект Чикаго диабета.
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| 60ml Syringes | BD | |||
| Fura-2 fluorescence dye | Molecular Probes Inc. | |||
| Rhodamine123 Fluorescence dye | Molecular Probes Inc. | |||
| Glucose | Sigma | |||
| Bovine Serum Albumin | Sigma | |||
| 30″ Silicone tubings | Cole Palmer | 1/16 x 1/8in | ||
| 1.5ml Eppendorf tubes | Fisher | |||
| Y-connectors | Cole Palmer | 1/16” & 4mm | ||
| Syringe connectors | Cole Palmer | female luer plug 1/16” | ||
| Straight connectors | Cole Palmer | 1/16” | ||
| Elbow connector | Cole Palmer | 1/16” | ||
| Havard syringe pump | Harvard Apparatus | |||
| Perifusion device | ||||
| Hot plate | PMC | |||
| Thermometer | Omega Engineering Inc. | |||
| Fraction collector | Gibson | |||
| Pippettor | Fisher | |||
| Inverted epiflorescence microscope | Olympus | IX71 | ||
| Charge-coupled device | QImaging | Retiga-SRV, Fast 1394 |
Riferimenti
- Mohammed, J. S., Wang, Y., Harvat, T. A., Oberholzer, J., Eddington, D. T. Microfluidic device for multimodal characterization of pancreatic islets. Lab Chip. 9, 97-106 (2009).
