Summary

細胞のLenslessオンチップイメージングは​​、ハイスループット細胞生物学および医学診断のための新しいツールを提供します。

Published: December 14, 2009
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Summary

細胞のLensfreeオンチップのイメージングと特性が示されている。このオンチップ細胞イメージングのアプローチは、リソースの乏しい環境のために特に適し、医療診断およびハイスループット細胞生物学のアプリケーション向けのコンパクトで費用効果の高いツールを提供します。

Abstract

他のレンズと光学部品と一緒に動作する対物レンズの使用により、従来の光学顕微鏡画像の細胞。非常に効果的ですが、この古典的なアプローチは、マイクロフルイディクスの技術の高度な状態と互換性を持たせるためにイメージングプラットフォームの小型化に一定の制限があります。このレポートでは、我々はLUCASと呼ばlenslessオンチップイメージングコンセプトの実験の詳細を紹介する(<strong<em> L</em</strong> ensless<strong<em> U</em</strong> LTRAワイド視野<strong<em> C</em</strong>エルのモニタリング<strong<em></em</strongに基づいて> rrayプラットフォーム<strong<em> S</em</strong同じ大きさにまたがることができるビューの超広視野上の画像不均一な細胞のソリューションを、任意の顕微鏡対物レンズや他の大型の光学部品を必要としない>ハドウイメージング)〜18センチメートル<sup> 2</sup>。また、従来の顕微鏡とは違って、LUCAS〜9 mLのサンプル容量を最大に対応するリフォーカスすることなく画像〜5 mmの被写界深度の上の関心の異種細胞溶液をすることができます。このイメージングプラットフォームレコードその視野内で関心の各セルの影(すなわち、lenslessデジタルホログラム)、およびこれらの細胞の影の自動化されたデジタル処理は、タイプ、カウントおよびソリューション内のセルの相対位置を決定することができます。それはどんなかさばる光学部品または機械的なスキャニング段階が必要としないため、同時にcare診断ツールの特にポイントのために非常に重要であるコストを、削減さを大幅に小型化されたプラットフォームを提供しています。さらに、このプラットフォームのイメージングのスループットは、ハイスループット細胞生物学実験のために極めて貴重であることが、従来の光学顕微鏡よりも優れて桁違いです。

Protocol

ここでは、LUCAS [1-3]に関与している実験的な手順を説明します。 LUCASの概念実証を説明するために我々は、全血サンプルのイメージングプロセスを説明します。 A.イメージングセットアップ LUCASイメージングプラットフォームは、特に資源が限られた設定のために、既存のポイントオブケアサイトメトリーや医療診断ツールに費用対効果の高い、コンパクトな代?…

Discussion

我々は、LUCASプラットフォームが正確にカウントし、そのホログラフィック署名に基づくチップ上に様々なmicro-objects/cellsを識別できるよう図示、およびポイントオブケア医療診断およびハイスループット細胞生物学のための有望なツールを提供している。正確に記録されたホログラムパターンを処理するために、我々は独自に開発したLUCASの意思決定のソフトウェアを実装。ルーカスの画像?…

Materials

Material Name Tipo Company Catalogue Number Comment
Charged couple device (CCD)   KODAK KAI-11002  
Charged couple device (CCD)   KODAK KAF-39000  
Complementary Metal-Oxide-Semiconductor (CMOS)   Micron MT9P031  
Xenon Lamp   Newport Corp. Cornerstone T260  
Vacuum pen   Edmund Optics NT57-636  
5, 10, and 20 μm Microbeads   Thermo Scientific 4000 Series  
RPMI   Fisher Scientific 1640  
Pure Eosin Y   Acros Organics MW=691.85  
New Methylene Blue(NMB) Dye   Acros Organics MW=347.90  
Potassium Oxalate Monohydrate   Acros Organics 99.0% Reagent ACS  

Riferimenti

  1. Seo, S., Su, T., Tseng, D. K., Erlinger, A., Ozcan, A. “Lensfree Holographic Imaging for On-Chip Cytometry and Diagnostics”. Lab Chip. , (2009).
  2. Su, T., Seo, S., Erlinger, A., Ozcan, A. “High-throughput Imaging and Characterization of a Heterogeneous Cell Solution on a Chip” . Biotechnology and Bioengineering. , (2008).
  3. Su, T., Seo, S., Erlinger, A., Ozcan, A. “Multi-color LUCAS: Lensfree on-chip cytometry using tunable monochromatic illumination and digital noise reduction”. Cellular and Molecular Bioengineering. , (2008).
check_url/it/1650?article_type=t

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Citazione di questo articolo
Mudanyali, O., Erlinger, A., Seo, S., Su, T., Tseng, D., Ozcan, A. Lensless On-chip Imaging of Cells Provides a New Tool for High-throughput Cell-Biology and Medical Diagnostics. J. Vis. Exp. (34), e1650, doi:10.3791/1650 (2009).

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