פרוטוקול זה ממחיש את הטכניקה עבור ביציות לחילוץ או בשלב מוקדם, עוברים מן oviduct מופרית של עכברים. היכולת לזהות את infindibulum והכנס מחט סוף בוטה לתוך זה הכרחי נכון לבצע את ההליך.
Abstract
נכון להיום, רק מעט מחקרים דיווחו על מניפולציות מוצלחת של העובר Peromyscus או לביולוגיה של הרבייה. יחד עם מאגר גנטי Peromyscus מרכז (http://stkctr.biol.sc.edu), אנחנו המאפיינת את ההבדלים הבולטים צורך לפתח את המערכת. המטרה העיקרית הייתה לייעל את הביצית / אחזור העובר המוקדם.
Protocol
העובר / הביצית אחזור לפחות שעתיים לפני שליפה של עוברים / ביציות, KSOM ממוקם 37 º C-CO 2 החממה FHM חייב להיות מופשר מ -20 °. צלחת זכוכית המכיל שלוש בארות רדודות קעור משמש טיפות הבית של KSOM בחממה. כדי למנוע התייבשות, KSOM ואת צלחת…
Discussion
במאמר זה, אנחנו מדגימים שליפה של ביציות מן הביוץ המושרה (superovulated) Peromyscus. השימוש superovulation (לעומת מחזור הייחום טבעי) נפוץ בשל המספרים וכתוצאה מכך הרבה יותר. עם זאת, זהירות יש לנקוט בפרשנות התוצאות ניצול כזה ביציות / עוברים, כמו גם בשימוש בהורמונים כדי לגרום הביוץ culturing עשויה להיות השפ?…
Acknowledgements
אני רוצה להודות מייק דיואי ממרכז במלאי Peromyscus הגנטי על הסבלנות שלו, עזרה וידע.
Materials
Material Name
Tipo
Company
Catalogue Number
Comment
Flushing needle
Tool
Zephyrtronics
ZT5-130-L
30 gauge blunt
Forceps (2)
Tool
Roboz
RS-5060
Peromyscus
Animal
Peromyscus Genetic Stock Center
Scissors
Tool
Roboz
RS-5880
FHM HEPES Buffered Media
Reagent
Specialty Media
MR-025-d
KSOM Embryo Culture Medium (5×10 ml)
Reagent
Specialty Media
MR-020P-5F
Mouth Pipette
Tool
Pulled from glass capillaries and attached to rubber tubing