Summary

איחזור של ביציות עכבר

Published: April 28, 2007
doi:

Summary

פרוטוקול זה ממחיש את הטכניקה עבור ביציות לחילוץ או בשלב מוקדם, עוברים מן oviduct מופרית של עכברים. היכולת לזהות את infindibulum והכנס מחט סוף בוטה לתוך זה הכרחי נכון לבצע את ההליך.

Abstract

נכון להיום, רק מעט מחקרים דיווחו על מניפולציות מוצלחת של העובר Peromyscus או לביולוגיה של הרבייה. יחד עם מאגר גנטי Peromyscus מרכז (http://stkctr.biol.sc.edu), אנחנו המאפיינת את ההבדלים הבולטים צורך לפתח את המערכת. המטרה העיקרית הייתה לייעל את הביצית / אחזור העובר המוקדם.

Protocol

העובר / הביצית אחזור לפחות שעתיים לפני שליפה של עוברים / ביציות, KSOM ממוקם 37 º C-CO 2 החממה FHM חייב להיות מופשר מ -20 °. צלחת זכוכית המכיל שלוש בארות רדודות קעור משמש טיפות הבית של KSOM בחממה. כדי למנוע התייבשות, KSOM ואת צלחת…

Discussion

במאמר זה, אנחנו מדגימים שליפה של ביציות מן הביוץ המושרה (superovulated) Peromyscus. השימוש superovulation (לעומת מחזור הייחום טבעי) נפוץ בשל המספרים וכתוצאה מכך הרבה יותר. עם זאת, זהירות יש לנקוט בפרשנות התוצאות ניצול כזה ביציות / עוברים, כמו גם בשימוש בהורמונים כדי לגרום הביוץ culturing עשויה להיות השפ?…

Acknowledgements

אני רוצה להודות מייק דיואי ממרכז במלאי Peromyscus הגנטי על הסבלנות שלו, עזרה וידע.

Materials

Material Name Tipo Company Catalogue Number Comment
Flushing needle Tool Zephyrtronics ZT5-130-L 30 gauge blunt
Forceps (2) Tool Roboz RS-5060  
Peromyscus Animal Peromyscus Genetic Stock Center    
Scissors Tool Roboz RS-5880  
FHM HEPES Buffered Media Reagent Specialty Media MR-025-d  
KSOM Embryo Culture Medium (5×10 ml) Reagent Specialty Media MR-020P-5F  
Mouth Pipette Tool     Pulled from glass capillaries and attached to rubber tubing
Oocyte holding dish Tool     Glass container with concave divets
check_url/it/185?article_type=t

Play Video

Citazione di questo articolo
Duselis, A. R., Vrana, P. B. Retrieval of Mouse Oocytes. J. Vis. Exp. (3), e185, doi:10.3791/185 (2007).

View Video