Summary
Este artigo demonstra a dissecção e incubação de retina de coelho e de partículas mediado por transferência de genes de codificação de plasmídeos GFP ou uma variedade de marcadores subcelular em células ganglionares da retina.
Abstract
Sistemas de cultura organotípicas de tecidos neurais funcionais são ferramentas importantes na investigação neurobiológica. Idealmente, tal sistema deve ser compatível com técnicas de imagem, manipulação genética, e registro eletrofisiológico. Aqui apresentamos um simples interfase do sistema de cultura de tecidos para a retina de coelhos adultos que não requer equipamento especializado e pouca manutenção. Demonstramos a dissecção e incubação de retina de coelho e de partículas mediado transferência de genes de codificação de plasmídeos GFP ou uma variedade de marcadores subcelular em células ganglionares da retina. Retinas de coelhos cultivadas desta forma podem ser mantidos vivos por até seis dias com muito poucas mudanças da estrutura anatômica geral ou a morfologia do indivíduo ganglionares e células amácrinas.
Protocol
Discussion
1. O que posso fazer com este método?
- Ver claramente a morfologia das células.
- Células rótulo para gravar com eles.
- Superexpressam proteínas, como PSD95, mas também outras proteínas que modulam a resposta da célula, por exemplo, canais iônicos, receptores.
- Expressar RNAs inibitória.
2. Quanto tempo eu posso manter retina adulta?
- 4 dias não é problema para o coelho adulto. Seis dias depois, as células olhar "doente", ou seja, os axônios retrair, voc…
Riferimenti
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