从软肌肉骨骼组织中分离干细胞
Summary
隔离肌肉骨骼软组织的成人干细胞的基础上坚持细胞的速度向烧瓶。
Abstract
成人干细胞及其在再生医学中的应用方面一直讨论。成人干细胞产生了极大的兴奋治疗受伤和患病的组织，由于其令人印象深刻的功能，经过多系细胞分化和自我更新的能力。最重要的是，这些特质使他们在使用自体细胞移植治疗的优势。目前的协议将介绍读者修改preplate技术，软组织，如肌腱和肌肉，骨骼肌肉系统1<sup> ST</sup>酶分离，然后放置在中等胶原涂层烧瓶。每天新烧瓶上清，这是中和其余的浮动细胞组成的，是连续转移。干细胞是最慢的的要坚持烧瓶通常需要5-7天（串行传输或preplates）。通过使用这种技术，在这些组织的成人干细胞目前相当的非侵入性的程序，可以轻松地收获通过。
Protocol
Discussion
人们已经认识到，一些成人组织包含多个的干细胞。在过去几年的研究，干细胞已被发现在肌肉骨骼软组织，包括骨骼肌肉和肌腱。目前协议的细节一个过程，作为修改preplate技术，已成功在我们的实验室，从肌腱和骨骼肌肉中分离出成人干细胞。使用上面描述的细胞修改preplate技术可分为基于其粘附胶原涂层烧瓶（图1）的特点，几个人口。发现组织内的成纤维细胞和肌纤维母细胞快速坚持在24-48…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
作者们大大赞赏细胞分离技术帮助，为当前的电影和卡尔霍顿先生和乔纳森卢卡斯先生为他们的幻灯片编辑上的帮助海鹰潘女士和先生，Ian Bellayr。 DRS：涉案人员已与过去几年的发展，修改preplate技术下面的列表非常感谢。 BURHAN Gharaibeh宝红曹迪希布里奇特，托马斯R ·佩恩，张爱萍陆，海荣鹏大岛，东条英博，曾晓东，木，Kimimasa飞田，罗恩Jankowski，Makato Ikezawa。我们是从詹姆斯H康明斯，瑞安Pruchnic，约瑟夫Feduska，丽贝卡C. Schugar，海鹰潘和杰西卡Tebbets技术援助表示感谢。笔者也将像到承认的肌肉萎缩症协会（MDA）的，：美国国立卫生研究院研究院（NIH），国防部（DOD），儿童匹兹堡医院UPMC的，部对这项工作的资助矫形外科杂志，和美国匹兹堡大学。
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| DMEM | Invitrogen | #11995-073 | ||
| FBS | Invitrogen | #10437-028 | ||
| Heat-inactivated horse serum | Invitrogen | #26050-088 | ||
| Chick embryo extract | Accurate Chemical | #CE650T-10 | ||
| 100U ml penicillin/streptomycin | Invitrogen | #15140-122 | ||
| Dulbecco’s PBS | Invitrogen | #14190-250 | ||
| Hank’s Buffered Salt Solution | Invitrogen | #24020-117 | ||
| Collagenase type XI 0.2%(wt/vol) | Sigma-Aldrich | #C7657 | ||
| Dispase2.4U ml | Invitrogen | #17105-041 | ||
| Trypsin-EDTA0.5%(wt/vol) (10x;5g liter trypsin (1:250) | Invitrogen | #15400-054 | ||
| Collagen for coating flask : Type I collagen derived from calf skin 0.1 g liter | Sigma-Aldrich | #C-9791 | ||
| DMSO | Sigma | #D-2650 |
Riferimenti
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