Drosophila Optogenetik: Nöronal Devreleri Manipüle Etme Yöntemi
Published: April 30, 2023
Abstract
Kaynak: de Vries, S. E., Clandinin, T. Drosophila melanogasterkaçış davranışının optogenetik stimülasyonu. J. Vis. Exp. (2013).
Optogenetik, ışık aktivasyonu nöronun durumunda bir değişikliği tetikleyen belirli opsinleri ifade etmek için genetik olarak tasarlanmış nöronları manipüle etmek için ışık kullanımını sağlar. Burada Opsin Channelrhodopsin2 kullanarak Drosophila optogenetik bir yaklaşım tarif ediyoruz. Örnek protokol, sineğin kaçış davranışının arkasındaki nöronal devreyi incelemek için ayarlanmış bir optogenetik test içerir.
Protocol
Bu protokol, Drosophila melanogaster, J. Vis. Exp. (2013)’de Kaçış Davranışının Optogenetik Uyarılması de Vries ve Clandinin’den bir alıntıdır. 1. Channelrhodopsin Sinekleri Üret Cross UAS-ChR2 seçtiğiniz Gal4 sürücüsü ile uçar, optik lobdaki Foma-1 nöronlarında ifade edilen G105-Gal4 kullanıyoruz. Mavi ışık stimülasyonuna görsel bir yanıt olasılığını ortadan kaldırmak için, her iki uçucu çizgi de w+norpA a…
Representative Results
Şekil 1: Platformu dikey tutucu ve ısı emicileri tutan dört soğutma sıvısı çapalama kolu ile gösteren deneysel kurulum ve bunlara LED dizileri yapıştırılmış. (A) Ortam aydınlatması altında kurulum. (B) LED’ler aydınlatıldığında kurulum. (C) Isı emici üzerinde bir Tri-Star LED’in yakından görünümü. (D) Tri-Star’ın tri-lens t…
Materials
| Reagent | |||
| All-trans Retinal | Advance Scientific Chemical Inc | R3041 | |
| Equipment | |||
| Heat Sink 9.2 C/W | Luxeonstar | LPD30-30B | 30 mm square X 30 mm high |
| Carclo 18° Tri-Lens | Luxeonstar | 10507 | |
| Blue Rebel LED on Tri-Star Base | Luxeonstar | MR-B0030-20T | 470 nm, 174 lm @ 700 mA. |
| 700 mA BuckPuck DC Driver | Luxeonstar | 3021-D-E-700 | |
| Wiring Harness for BuckPuck Driver | Luxeonstar | 3021-HE | |
| Pre-cut thermal adhesive tape | Luxeonstar | LXT-S-12 | 20 mm Hex Base |
| Snap-Loc Coolant Hose, ¼" ID | McMaster-Carr | 5307K49 | |
| Snap-Loc Coolant Hose Connector | McMaster-Carr | 5307K39 | ¼" NPT Male |
| Laboratory Grade Switching Mode Programmable DC Power Supply | BK Precision | 1698 | |
| Exilim camera | Casio | EX-FH20 |
Citazione di questo articolo
Drosophila Optogenetics: A Method to Manipulate Neuronal Circuits. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20149, doi: (2023).