Summary

海洋微生物的趋化反应的微观尺度的营养层

Published: May 28, 2007
doi:

Summary

制造微流体通道和内修修补补的营养海景和剪切流内的细菌的游泳行为研究海洋微生物的趋化觅食的习性,他们在实验中实现。

Abstract

浮游的微生物可以利用微型的资源的修补程序,在何种程度上,将有相当大的影响,为海洋trophodynamics和生物地球化学通量。然而,要在海洋营养补丁优势,游泳微生物必须克服身体力量的影响,包括分子扩散和湍流剪,这将限制的修补程序的可用性和细菌的能力找到他们。直到最近,方法上的限制,排除内修修补补的栖息地和现实的小规模流动条件下的微生物行为的直接考试。因此,我们目前的知识关于在海洋中的微生物的行为已经从理论预测采购。为了获得我们已申请了软光刻制造技术,开发微流体装置,这是我们用来创建(一)微型尺寸和扩散的特点有关海洋过程的营养补丁及(ii)微尺度海洋微生物觅食行为的新信息与剪切率对应预计在海洋的旋涡。这些微流体装置允许在异构和动态的海景直接检查的​​微生物游泳和趋化行为。 epifluorescence相衬显微镜结合使用允许的物理尺寸和营养补丁的扩散特性进行直接检查,同时观察在人口聚集的反应,除了个别微生物的游泳行为。这些实验显示,一些浮游植物,异养菌和phagotrophic原生生物物种,善于寻找和利用很短的时间框架内扩散微尺度资源补丁。我们还表明,中等剪切速率,海洋细菌能够争取自己的流量,并通过他们的环境中游泳。但是,超出阈值高剪切水平,细菌是对齐的剪切流动,并没有从流障碍游泳能力较差。微流体新颖,价格低廉的方法,为水生微生物生态学研究,并且由于其准确地建立切合实际的流场和基板梯度在微尺度的适用性,理想地适用于在互动的最小尺度微生物行为的考试。因此,我们建议微流体代表了获得一个更好地了解海洋中的微生物生态的有价值的工具。

Protocol

制备 1。创建遮罩使用CAD软件,设计了一个透明度高清晰度印刷的渠道。这将是“面具”。 在洁净室: 2。清洁和烤晶圆首先,喷出的晶圆与丙酮,然后迅速与甲醇,然后用异丙醇。最后,用氮气干燥晶圆。 在5分钟的烤箱(130℃)烘烤晶圆。 <p class="jove_ste…

Discussion

海洋微生物如何与当地的化学和物理环境相互作用的理解是势在必行的浮游微生物在海洋中的养分和碳循环(2007年阿扎姆和Malfatti)中的作用更加完整和准确的的感知。然而,由于许多重要的微生物的相互作用,哪些发生小尺度(毫米),技术上的限制,阻碍内异质景观生物物理化学,微生物行为的详细检查,预计要在海洋中游泳的微生物的经历。在微流体(怀特赛德斯等,2001)的最新进展使微生物生态学的详…

Acknowledgements

我们要感谢让我们电影的一部分,这在洁净室设施的视频,在麻省理工学院微系统技术实验室。

Materials

Material Name Tipo Company Catalogue Number Comment
PDMS, Sylgard 184 Silicone Elastomer Kit Dow Corning, Midland, MI, USA   http://www.ellsworth.com/sylgard.html
SU8-2100 Photoresist MicroChem, Newton, MA, USA   www.microchem.com
Nikon Eclipse TE2000-E inverted microscope Microscope Nikon, Japan    
PEEK tubing (0.762 mm ID, 1.59 mm OD) Tool Upchurch Scientific, Oak Harbor, WA, USA   www.upchurch.com
Syringes (Luer-Lok Tip) Tool BD, Franklin Lakes, NJ, USA    
Fitting Part P-704-01 Tool Upchurch Scientific, Oak Harbor, WA, USA   To connect tubing to Luer-Lok Tip Syringes
Syringe Pump (PHD 2000 Programmable) Equipment Harvard Apparatus, Holliston, MA, USA    
CCD Camera (PCO 1600) Equipment Cooke, Romulus, MI, USA    

Riferimenti

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check_url/it/203?article_type=t

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Citazione di questo articolo
Seymour, J. R., Marcos, Stocker, R. Chemotactic Response of Marine Micro-Organisms to Micro-Scale Nutrient Layers. J. Vis. Exp. (4), e203, doi:10.3791/203 (2007).

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