3 में लारवल कमानी नसों के विज़ुअलाइज़ेशन तीसरी Instar ड्रोसोफिला लारवल तैयारी
Summary
ड्रोसोफिला मेलानोगास्टर लार्वा एक आदर्श मॉडल लार्वा कमानी नसों के भीतर axonal परिवहन के तंत्र की जांच प्रणाली प्रदान करते हैं. इस कार्यविधि का उपयोग, 3 Rd instar विभिन्न म्यूटेशनों ले जाने के लार्वा को जंगली प्रकार लार्वा की तुलना में किया जा सकता है.
Abstract
ड्रोसोफिला मेलानोगास्टर और तंत्रिका तंत्र के विकास समारोह के अध्ययन के लिए एक शक्तिशाली मॉडल विशेष रूप से अपने सुविधाजनक आनुवंशिकी और पूरी तरह से अनुक्रम जीनोम की वजह से, सिस्टम के रूप में उभर रहा है. इसके अतिरिक्त, लार्वा तंत्रिका तंत्र एक आदर्श मॉडल प्रणाली axonal परिवहन के तंत्र का अध्ययन करने के रूप में लार्वा कमानी नसों अपने सेल शरीर मस्तिष्क और उनके तंत्रिका टर्मिनलों शरीर की लंबाई के साथ समाप्त होने के भीतर स्थित के साथ axons की बंडलों होते है. यहाँ हम synaptic पुटिका प्रोटीन के लार्वा कमानी नसों के भीतर दृश्य के लिए प्रक्रिया का वर्णन. यदि सही ढंग से किया, तंत्रिका तंत्र के सभी घटकों, जैसे मांसपेशियों और NMJs जुड़े के ऊतकों के साथ साथ, अक्षत, undamaged, और visualized किया जा के लिए तैयार रहना. 3 Rd instar विभिन्न म्यूटेशनों ले लार्वा विच्छेदित कर रहे हैं, तय, synaptic पुटिका एंटीबॉडी के साथ incubated कल्पना और जंगली प्रकार लार्वा की तुलना में. यह प्रक्रिया कई अलग synaptic या neuronal और एंटीबॉडी प्रोटीन की एक किस्म के वितरण में परिवर्तन के लिए अनुकूलित किया जा सकता है आसानी से लार्वा कमानी नसों के भीतर देखा जा.
Protocol
Discussion
ड्रोसोफिला लार्वा कमानी नसों axonal परिवहन तंत्र का अध्ययन करने के लिए एक शक्तिशाली प्रणाली रहे हैं. यदि 3 Rd instar लार्वा विच्छेदन सही ढंग से किया जाता है, CNS, पीएन, और जुड़े ऊतक मांसपेशियों और NMJs जैसे, के स?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
एसजी से भैंस पर न्यूयॉर्क के राज्य विश्वविद्यालय और जॉन आर Oishei फाउंडेशन से धन के द्वारा समर्थित है.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Dumont #5 Forceps | Fine Science Tools, Inc. | 11252-20 | ||
| Minutien Pins, Stainless Steel | Fine Science Tools, Inc. | 26002-10 | ||
| Mcpherson-Vannas Straight Blade 8cm Scissors | Fisher Scientific | 50822236 | ||
| Vectashield, Mounting Medium | Vector Laboratories, Inc. | H-1000 | ||
| Sylgard 184 Silicone elastomer | Dow Corning Corporation | 4026148 | ||
| formaldehyde, 16% | Electron Microscopy Sciences | 15710 | ||
| dCSP3 | Developmental Studies Hybridoma Bank | |||
| Alexa Fluor 568 Goat Anti-Mouse IgG | Invitrogen | A-11004 |
References
- Gunawardena, S., Goldstein, L. Disruption of Axonal Transport and Neuronal Viability by Amyoid Precursor Protein Mutations in Drosophila. Neuron. 32 (2), 389-401 (2001).
- Gunawardena, S., Her, L. S., Brusch, R. G., Laymon, R. A., Niesman, I. R., Gordesky-Gold, B., Sintasath, L., Bonini, N. M., Goldstein, L. S. Disruption of axonal transport by loss of huntingtin or expression of pathogenic polyQ proteins in Drosophila. Neuron. 40 (1), 1-2 (2003).
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