コントラストの超音波は、薬剤ベアリングナノ粒子デリバリーと微小血管アブレーションを経由してマウスの神経膠腫の治療を対象と
Summary
マイクロバブルのInsonationは減少時間平均音響パワーで、同様に治療薬の標的化送達のための腫瘍切除のための有望な戦略である。本研究の目的は、皮下C6神経膠腫への非熱的血管アブレーションとペイロードの配信を最大にするためには、低いデューティサイクルの超音波パルス化戦略とナノキャリアを開発することである。
Abstract
我々は、透過性および/または微小血管系のアブレーションが超音波パルス化パラメータを変えることによって制御される低侵襲造影剤マイクロバブルベースの治療法を開発しています。具体的には、このようなアプローチは、薬物送達および微小血管アブレーションによって悪性の脳腫瘍を治療するために使用することができるかどうかをテストしています。予備研究は、標的薬物ベアリングナノ粒子の配信が100nmのポリ（ラクチド- co -グリコリド）（PLAGA）アルブミン殻を気泡に付着しているナノ粒子から成る"複合材料"配信エージェントの超音波の介在の破壊によって促進することができるかどうかを判断するために行われている。我々は、マイクロバブル、ナノ粒子複合剤（MNCAs）としてこれらのエージェントを表す。超音波で皮下C6神経膠腫を対象としたとき、我々はマイクロバブルナノ粒子と非処理腫瘍上8.5倍と同時投与で治療された腫瘍上MNCA処置された腫瘍のナノ粒子の配信が即座に4.6倍増加を観察した。さらに、多くの癌のアプリケーションでは、我々はそれが腫瘍の低酸素症とアポトーシスにつながる腫瘍微小循環、のアブレーションと一緒にターゲットを絞った薬物送達を行うことが望ましい場合があると信じています。この目的のために、我々はこのアプローチは、腫瘍灌流の減少、アポトーシス、大幅な成長の阻害、および壊死を誘発することを示す、非theramalキャビテーション誘発性血管アブレーションの有効性をテストしている。一緒に取られて、これらの結果は私たちの超音波をターゲットとしたアプローチは、微小血管のアブレーションおよび/または同時に神経膠腫の薬のペイロードを強化を通して腫瘍壊死を作成することにより、治療効率を向上させる可能性を秘めていることを示している。
Protocol
1。マイクロバブルの生産アルブミンマイクロバブルを（MBS）を準備するために、水相、上記ガスのブランケット（オクタフルオロプロパン）とフラスコで生理食塩水で血清アルブミンの1％溶液を置きます。簡単に言えば、拡張½"チタンプローブを備えた超音波粉砕機を備えたソリューションを（30秒）超音波処理。この製剤は、0.5〜1.2 × 10 9 MB単位/ mlの濃度範囲で提供さ…
Discussion
重要なステップ
マウスの尾静脈のカニュレーション：
マウスの尾静脈に静脈注射が困難なプロシージャを指定できます。しかし、尾静脈カテーテルは、大きく成功するインジェクションの可能性を向上させることができます。それは、ハブから解除するまでカテーテルを作るために、繰り返し前後に25ゲージの針を曲げ。 PE 20チューブの端に平滑末端を?…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
NIH R01 HL74082、ハートウェル財団、および集束超音波手術Foundationによってサポートされています。
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| ApoptTag kit | Intergen Co. | S7110 | ||
| un-capped 85:15 poly(lactic-co-glycolic acid) (PLAGA) | Lakeshore Biomaterials | Custom | ||
| Vivo Tag 680 | VisEn Medical | 10120 | Used to Tag BSA | |
| Poly(vinyl alcohol) | Sigma-Aldrich | 363136 | ||
| MicroTip Sonicator | Misonix | S-4000 | ||
| Sequoia | Simons Medical | P.O.A | Equipped with CPS | |
| FreeZone 2.5 | Labconco | 7670020 | Equipped with Nitrogen Trap | |
| Methylene chloride (CH2Cl2) | Fisher Scientific | D37-500 | ||
| FMT 250 | VisEn Medical | P.O.A | ||
| F-12K Nutrient Mixture | Gibco | 21127-022 | ||
| polyethyleneglycol-40 stearate | Sigma Chemical | 9004-99-3 | ||
| distearoyl phosphatidylcholine | Avanti Polar Lipids | 770365 | ||
| Multisizer Coulter Counter | Beckman Coulter | P.O.A | ||
| Waveform Generator | Tektronix, Inc. | AFG-310 | ||
| water-based ultrasound gel | Parker Laboratories | Aquasonic 100 | ||
| Infusion pump | Harvard Apparatus | Harvard Apparatus PHD 2000 | ||
| 1-Ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)-carbodiimide (EDC) | Pierce Biotechnology | 25952-53-8 | ||
| N-hydroxysulfosuccinimide (Sulfo-NHS) | Pierce Biotechnology | 106627-54-7 | ||
| Succinic anhydride | Sigma Aldrich | 603902 | ||
| Power Amplifier | Electronic Navigation Industries | ENI 3100LA | ||
| Needle Thermocouple Probe | Omega | HYP1-30-1/2-T-G-60-SMPW-M | ||
| BioGel (P100, medium) | Bio-Rad | 150-4170 | ||
| .75’’ diameter 1 MHz unfocused transducer | Panametrics | A314S |
Riferimenti
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Citazione di questo articolo
Burke, C. W., Price, R. J. Contrast Ultrasound Targeted Treatment of Gliomas in Mice via Drug-Bearing Nanoparticle Delivery and Microvascular Ablation. J. Vis. Exp. (46), e2145, doi:10.3791/2145 (2010).