Summary

Methoden voor Patch Clamp capaciteit Recordings uit de Calyx

Published: July 29, 2007
doi:

Summary

Abstract

We tonen de basistechnieken voor presynaptische patch clamp opname op de kelk van de Held, een centrale zenuwstelsel zenuwuiteinde. Elektrische opnames van de presynaptische terminal kan de meting van actiepotentialen, calcium kanaal stromen, vesicle fusie (exocytose) en de daaropvolgende membraan opname (endocytose). De fusie van de blaasjes met neurotransmitter zorgt ervoor dat het blaasje membraan te worden toegevoegd aan de celmembraan van de kelk. Deze toename van de hoeveelheid van de celmembraan wordt gemeten als een toename van de capaciteit. De daaropvolgende daling van de capaciteit geeft endocytose, het proces van het membraan opname of verwijdering uit de kelk membraan. Endocytose, is nodig om de structuur van de kelk te behouden en het is ook nodig om blaasjes die zal worden gevuld met neurotransmitter voor de toekomst exocytose gebeurtenissen vormen. Capaciteit opnames op de kelk van de Held hebben het mogelijk gemaakt om rechtstreeks en snel te meten vesiculaire release en de daarna endocytose in een zoogdier CZS zenuwuiteinde. Daarnaast kan de bijbehorende postsynaptische activiteit gelijktijdig worden gemeten met behulp van gepaarde opnames. Dus een compleet beeld van de presynaptische en postsynaptische elektrische activiteit op een centrale zenuwstelsel synaps is haalbaar met deze voorbereiding. Hier worden de methoden voor slice voorbereiding, morfologische kenmerken voor de identificatie van kelken van de Held, basic patch klem technieken en voorbeelden van capaciteit opnames naar exocytose en endocytose te meten gepresenteerd.

Protocol

Patch Clamp Setup: Optiek: De optiek is zeer belangrijk om een goede cel te vinden, en om de positie van het vast te stellen. Probeer een duidelijk beeld van de cellen te krijgen: scherpe randen, soft-kijken cel. Scannen het hele veld om te zoeken naar een goede MNTB belangrijkste cellen met aangehechte kelk. Draai schotel te kijken naar kelken vanuit verschillende invalshoeken. In het begin is het OK om te oefenen op b…
check_url/it/244?article_type=t

Play Video

Citazione di questo articolo
Paradiso, K., Wu, W., Wu, L. Methods for Patch Clamp Capacitance Recordings from the Calyx. J. Vis. Exp. (6), e244, doi:10.3791/244 (2007).

View Video