Um modelo ortotópico de câncer de bexiga murino
Summary
Tumores de bexiga são estabelecidos em camundongos fêmeas, de uma forma minimamente invasiva através de cateterismo, cauterização local, ea adesão posterior de células de carcinoma aos locais queimar.
Abstract
Neste procedimento simples, tumores de bexiga são estabelecidos em camundongos fêmeas C57 através do uso de cateterismo, cauterização local, e adesão celular subseqüente. Após a sua bexigas são transurethrally cateterizada e escorrido, os animais são novamente cateterizada para permitir a inserção de um fio de platina em bexigas sem danificar a uretra ou bexiga. Os cateteres são feitos de Teflon para servir como um isolante para o fio, que irá conduzir a corrente elétrica para a bexiga para criar um ferimento de queimadura. Uma unidade de eletrocautério é usada para fornecer 2,5 W para a extremidade exposta do fio, queimando camadas extracelular e proporcionando locais de fixação para células de carcinoma que são entregues em suspensão para a bexiga através de um cateterismo subseqüente. Células permanecem na bexiga durante 90 minutos, após o que os cateteres são retirados e as bexigas permitido para drenar naturalmente. O desenvolvimento de tumor é monitorado através de ultra-som. Especial atenção é dada à técnica de cateterismo no vídeo que acompanha.
Protocol
Discussion
Este método minimamente invasivo de estabelecer tumores de bexiga ortotópica em camundongos fêmeas também pode ser aplicado para outros tipos de células que MB49, embora os resultados divergentes devem ser antecipados. Quando as células menos agressiva do tumor são usados, aumentando a potência ligeiramente (usando incrementos de 0,5 W para estabelecer o ótimo novo) trará uma área mais passíveis de penhora de células tumorais, e mais tempo de incubação da bexiga para as células instilado vai render uma q…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Este trabalho foi financiado pela concessão de CARREIRA do National Science Foundation (CBET-0846395) e do Departamento de Medicina Comparativa, Tulane University.
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| C57Bl/6J mice | Jackson Laboratories | 000664 | 3-5-wk-old | |
| Polycarbonate cages and ventilated rack | Lab Products | Super Mouse 750 | 327mm x 190mm x 143mm |
|
| Hardwood Bedding | Harlan Teklad | Laboratory –grade SaniChips | ||
| Rodent diet | Harlan Teklad | Rodent Diet 2019 | ||
| IV Catheter | MWI | 009231 | 24 G x ¾ in. | |
| Electrocautery unit | Bovie Medical Corporation | Aaron 900 | ||
| Ultrasound unit | Sonosite | 180 Plus (Vet) | ||
| MB49 cell line | Anthony Atala, Wake Forest University Baptist Medical Center | N.A. | ||
| DMEM | Invitrogen | 21063-029 | ||
| Fetal Bovine Serum | Gemini Bio-Products | 100106 500A57B | ||
| Penicillin-Streptomycin | Invitrogen | 15140-163 |
Riferimenti
- Institute of Laboratory Animal Resources. . Guide for the Care and Use of Laboratory Animals. , (1996).
- Gunther, J. H., Jurczok, A., Wulf, T., Brandau, S., Deinert, I., Jocham, D. Optimizing syngeneic orthotopic murine bladder cancer (MB49). Cancer Res. 59, 2834-2837 (1999).
- Zhang, X., Atala, A., Godbey, W. T. Expression-targeted gene therapy for the treatment of transitional cell carcinoma. Cancer Gene Ther. 15, 543-552 (2008).
