Drosophila melanogaster testicules peuvent être rapidement et efficacement isolées des mâles adultes utilisant des aiguilles à dissection. Avec la pratique, on peut facilement isoler dans un ou deux jours d'un montant de testicules suffisant pour l'analyse d'ADN ou d'ARN par séquençage à haut débit ou plus des méthodes traditionnelles de biologie moléculaire ou de protéines pour des dosages d'anticorps ou à base d'enzymes.
Les testicules de Drosophila melanogaster fournissent un modèle important pour l'étude de la maintenance des cellules souches et la différenciation, la méiose, et soma-germinale interactions. Les testicules sont généralement isolées des mâles adultes 0-3 jours après l'éclosion de la coque de nymphose. Les testicules des mouches de type sauvage sont facilement distingués des autres tissus, car ils sont jaunes, mais les testicules de blanc mouches mutantes, un fond génétique commun des expériences en laboratoire sont similaires dans les deux formes et couleurs à l'intestin voler. Effectuer une dissection sur une lame de microscope en verre avec un fond noir rend l'identification des testicules considérablement plus facile. Les testicules sont retirés de la mouche à l'aide d'aiguilles de dissection. Comparé à des protocoles qui utilisent des pinces pour la dissection des testicules, notre méthode est beaucoup plus rapide, permettant à un individu bien pratiqué la dissection des testicules de 200 à 300 de type sauvage mouches par heure, ce qui donne 400-600 testicules. Testicules de mouches blanches ou de mutants qui réduisent la taille des testicules sont plus difficiles à disséquer et généralement le rendement de 200 à 400 testicules par heure.
Nous fournissons un protocole pour isoler les testicules du mâle adulte de Drosophila melanogaster. Parce que la technique nécessite la coordination de deux de ses mains, la compétence vient seulement avec la pratique.
The authors have nothing to disclose.
Les auteurs remercient Vasia Vagin pour l'introduction de cette technique dans notre laboratoire.
Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
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Dissecting needle | Tool | Fisher Scientific | S17346 | |
Micro Slides, Plain | Tool | Fisher Scientific | 12-553 | |
Microscope Light | Tool | Schott-Fostec | KO-1500 | |
CO2 pad | Tool | Genesee Scientific | 59-172 | |
Benchtop Flowbuddy Complete System | Tool | Genesee Scientific | 59-122WCU | |
Bubble Humidifier | Tool | Salter Labs | 7100 | |
Ball filler needle | Tool | Genesee Scientific | 54-119 | |
¾” Label Tape | Supply | Fisher Scientific | 15-901-5B |