الشريان الدماغي الأوسط انسداد داخل اللمعة (MCAO) النموذجي للاصابة بالسكتة الدماغية مع توجيه الليزر دوبلر Flowmetry في الفئران
Summary
وسط انسداد الشريان الدماغي داخل اللمعة (MCAO) النموذج هو النموذج الأكثر شيوعا المستخدمة بين النماذج التجريبية السكتة الدماغية. هنا سوف نظهر نموذج كامل بالتفصيل مع دليل flowmetry دوبلر ليزر ، والنتائج ممثلها.
Abstract
السكتة الدماغية هي ثالث سبب رئيسي للوفاة والسبب الرئيسي للعجز في العالم ، بتكلفة تقدر ب 70 مليار دولار قرب في الولايات المتحدة في عام 2009 ، 1،2. وقد وضعت وسط انسداد الشريان الدماغي داخل اللمعة (MCAO) نموذج من قبل كويزومي 4 في عام 1986 لمحاكاة هذه الحالة المرضية تأثيرا الإنسان في الفئران. وقدم في وقت لاحق لتعديل الطريقة التي MCAO ونجا 3. وقد تم كل من التقنيات المستخدمة على نطاق واسع لتحديد الآليات الجزيئية لإصابات الدماغ الناجمة عن السكتة الدماغية والطرائق العلاجية المحتملة 5. وقد تم تمديد هذا الأسلوب موسع نسبيا في الفئران لاستخدامها في الفئران للاستفادة من والسلالات المعدلة وراثيا 6،7 خروج المغلوب. إلى نقص التروية الدماغية نموذج الاتصال ، متقدمة an خياطة داخل اللمعة عن طريق الشريان السباتي الداخلي لتسد قاعدة MCA. التراجع في الدرز بعد فترة محددة من الوقت يحاكي ضخه عفوية ، ولكن يمكن أيضا أن تكون خياطة الاحتفاظ بشكل دائم. وسوف يكون هذا الفيديو يدل على النهجين الرئيسية لأداء داخل اللمعة MCAO الداخلي في الفئران بطريقة متدرجة ، فضلا عن تقديم رؤى للعيوب والمطبات المحتملة. وبعد ذلك أنسجة الدماغ الإقفاري تكون ملطخة بواسطة 2،3،5 – triphenyltetrazolium كلوريد (TTC) لتقييم مدى احتشاء دماغي 8.
Protocol
Discussion
نموذج MCAO هو نموذج يثبت أن يعيد نقص التروية الدماغية في أنواع الفئران. كان أول من استخدم هذا النموذج في الجرذان والفئران بعد ذلك إلى تكييف. تجنب قطع القحف للقضاء على نفوذ التلاعب جراحية في الدماغ بالدم نفاذية الجدار والضغط داخل القحف هو الاستفادة من هذه التقنية. ومع ذل…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Materials
| Name of the reagent | Type | Company | Catalogue number | Comments (optional) |
|---|---|---|---|---|
| Male C57BL/6 mice | Animal | Harlan Laboratories, Indianapolis, IN, USA | 20-26 grs | |
| Dissection microscope | Microscope | Leica stereo Microscope MZ6 | 6.3:1 zoom | |
| Fiber optic illuminator | Illuminator | TechniQuip Corp., Livermore, CA, USA | FO1–150 | |
| Isoflurane | Anesthesia | Baxter Pharmaceutics, Deerfield, IL | 1001936060 | |
| SuperCut Iris scissor, straight | Surgical tool | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | 14218 | |
| Vannas micro-scissor, straight | Surgical tool | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | 14003 | |
| Dumont fine tip forceps | Surgical tool | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | 503290 | |
| Vessel clip | Surgical tool | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | 14120 | |
| High Frequency Desiccator 900 | Surgical tool | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | 500397 | |
| 7-0 surgical Nylon monofilament suture | Suture | Ethicon, Inc., Somerville, NJ, USA | 1647G | Suture for occlusion |
| 7-0 surgical Silk suture | Suture | Ethicon, Inc., Somerville, NJ, USA | 7733G | Suture for ligation |
| Silicone RTV adhesive | Silicone rubber | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | 1571 | |
| Vetbond | Tissue adhesive | 3M Company, St Paul, MN, USA | 70200746587 | |
| Puralube Vet Ointment | Eye ointment | Pharmaderm, Melville, NY, USA | ||
| Buprenorphine hydrochlorode | Analgesics | Hospira Inc., Lake Forest, IL, USA | NDC 0409-2012-32 | |
| Thermal Cautery Unit | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | 501292 | ||
| PeriFlux System 5000 | TCD flowmetry | Perimed, Stockholm, Sweeden | ||
| BAT-12 | Rectal thermometer | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | BAT-12R | |
| T/PUMP, TP600 | Thermal blanket | Gaymar, NY, USA | ||
| 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride | Reagent | Sigma-Aldrich Co., St Louis, MO, USA | T8877 | |
| Mice brain matrix slicer | Brain slicer | Zivic-Miller Lab., Inc., Allison Park, PA, USA | BSMAS001-1 |
References
- . Recommendations on stroke prevention, diagnosis, and therapy. Report of the WHO Task Force on Stroke and other Cerebrovascular Disorders. Stroke; a journal of cerebral circulation. 20, 1407-1431 (1989).
- Lloyd-Jones, D. Heart disease and stroke statistics–2009 update: a report from the American Heart Association Statistics Committee and Stroke Statistics Subcommittee. Circulation. 119, e21-e181 (2009).
- Longa, E. Z., Weinstein, P. R., Carlson, S., Cummins, R. Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats. Stroke; a journal of cerebral circulation. 20, 84-91 (1989).
- Koizumi, J., Yoshida, Y., Nakazawa, T., Ooneda, G. Experimental studies of ischemic brain edema. I. A new experimental model of cerebral embolism in rats in which recirculation can be introduced in the ischemic area. Jpn J Stroke. 8, 1-8 (1986).
- Clark, W. M., Lessov, N. S., Dixon, M. P., Eckenstein, F. Monofilament intraluminal middle cerebral artery occlusion in the mouse. Neurol Res. 19, 641-648 (1997).
- Fujii, M. Strain-related differences in susceptibility to transient forebrain ischemia in SV-129 and C57black/6 mice. . Stroke; a journal of cerebral circulation. 28, 1805-1810 (1997).
- Bederson, J. B. Evaluation of 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride as a stain for detection and quantification of experimental cerebral infarction in rats. Stroke; a journal of cerebral circulation. 17, 1304-1308 (1986).
- Qi, X., Hosoi, T., Okuma, Y., Kaneko, M., Nomura, Y. Sodium 4-phenylbutyrate protects against cerebral ischemic injury. Mol Pharmacol. 66, 899-908 (2004).
- Barone, F. C., Knudsen, D. J., Nelson, A. H., Feuerstein, G. Z., Willette, R. N. Mouse strain differences in susceptibility to cerebral ischemia are related to cerebral vascular anatomy. J Cereb Blood Flow Metab. 13, 683-692 (1993).
- Tureyen, K., Vemuganti, R., Sailor, K. A., Dempsey, R. J. Ideal suture diameter is critical for consistent middle cerebral artery occlusion in mice. Neurosurgery. 56, 196-200 (2005).
- Barber, P. A., Hoyte, L., Colbourne, F., Buchan, A. M. Temperature-regulated model of focal ischemia in the mouse: a study with histopathological and behavioral outcomes. Stroke; a journal of cerebral circulation. 35, 1720-1725 (2004).
- Kapinya, K. J., Prass, K., Dirnagl, U. Isoflurane induced prolonged protection against cerebral ischemia in mice: a redox sensitive mechanism?. Neuroreport. 13, 1431-1435 (2002).
