Матригель основе труб Формирование Пробирной для оценки Vasculogenic активность опухоли
Summary
Анализ трубки образование используется для оценки сосудистой активности опухолевых клеток.
Abstract
За последние несколько десятилетий, анализ трубки формирование использованием фактора роста снижается Матригель был обычно используются для демонстрации ангиогенных деятельности сосудистых эндотелиальных клеток в пробирке 1-5. Однако в последнее время все больше доказательств показал, что этот анализ не ограничивается тест сосудистой поведение для эндотелиальных клеток. Вместо этого, он также был использован для тестирования способности количество опухолевых клеток развивать сосудистой фенотипа 6-8. Эта возможность была в соответствии с их vasculogenic поведения, определенные в xenotransplanted животных, процесс, известный как vasculogenic мимикрии (VM) 9. Существует множество доказательств, свидетельствующих о том, что опухоли клеточный В. М. играет жизненно важную роль в развитии опухоли, независимо от ангиогенеза эндотелиальные ячейки 6, 10-13. Например, опухолевые клетки были обнаружены на участие в крови перфузии, сосудистые образования канала в образцах тканей от меланомы и глиобластомы пациентов 8, 10, 11. Здесь мы описали это трубчатые анализа сети в качестве полезного инструмента в оценке vasculogenic активности опухолевых клеток. Мы обнаружили, что некоторые линии опухолевых клеток, таких как меланома B16F1 клеток глиобластомы U87 клеток, и рак молочной железы MDA-MB-435 клетки способны образовывать сосудистой канальцев, но некоторые не такие, как рак толстой кишки HCT116 клеток. Кроме того, это сосудистые фенотип зависит от числа клеток высевали на Матригель. Таким образом, этот анализ может служить мощная утилита для скрининга сосудистых потенциал различных типов клеток, включая клетки сосудистых, опухолевых клеток, а также другие клетки.
Protocol
Discussion
Для того чтобы этот анализ, чтобы преуспеть, качество Матригель должны быть проверены в первую очередь. Маленький образец может быть получен из BD Bioscience предварительного запуска методом с использованием HMVECs. Различные продукты партия может появиться разнородных качеств, в которых неко…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Эта работа была поддержана NCI R01 CA120659 (РС).
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number |
|---|---|---|
| DMEM | Invitrogen | 11995 |
| FBS | Invitrogen | 16000-044 |
| Growth factor-reduced Matrigel | BD Bioscience | 47743-720 |
| EBM2 kit | Lonza | CC-3156 |
| Nikon ECLIPSE TS100 microscope | Nikon |
Riferimenti
- Shao, R., Guo, X. Human microvascular endothelial cells immortalized with human telomerase catalytic protein: a model for the study of in vitro angiogenesis. Biochemical & Biophysical Research Communications. 321, 788-794 (2004).
- Ribeiro, M. J. Hemostatic properties of the SV-40 transfected human microvascular endothelial cell line (HMEC-1). A representative in vitro model for microvascular endothelium. Thromb Res. 79, 153-1561 (1995).
- Ades, E. W. HMEC-1: establishment of an immortalized human microvascular endothelial cell line. J Invest Dermatol. 99, 683-690 (1992).
- Shao, R. Acquired expression of periostin by human breast cancers promotes tumor angiogenesis through up-regulation of vascular endothelial growth factor receptor 2 expression. Molecular & Cellular Biology. 24, 3992-4003 (2004).
- Shao, R. YKL-40, a secreted glycoprotein, promotes tumor angiogenesis. Oncogene. 28, 4456-4468 (2009).
- Basu, G. D. A novel role for cyclooxygenase-2 in regulating vascular channel formation by human breast cancer cells. Breast Cancer Research. 8, R69-R69 (2006).
- Scavelli, C. Vasculogenic mimicry by bone marrow macrophages in patients with multiple myeloma. Oncogene. 27, 663-674 (2008).
- El Hallani, S. A new alternative mechanism in glioblastoma vascularization: tubular vasculogenic mimicry. Brain. 133, 973-982 (2010).
- Maniotis, A. J. Vascular channel formation by human melanoma cells in vivo and in vitro: vasculogenic mimicry. American Journal of Pathology. 155, 739-752 (1999).
- Hendrix, M. J., Seftor, E. A., Hess, A. R., Seftor, R. E. Vasculogenic mimicry and tumour-cell plasticity: lessons from melanoma. Nature Reviews Cancer. 3, 411-421 (2003).
- Folberg, R. Tumor cell plasticity in uveal melanoma: microenvironment directed dampening of the invasive and metastatic genotype and phenotype accompanies the generation of vasculogenic mimicry patterns. American Journal of Pathology. 169, 1376-1389 (2006).
- Liu, C. Prostate-specific membrane antigen directed selective thrombotic infarction of tumors. Ricerca sul cancro. 62, 5470-5475 (2002).
- Sood, A. K. The clinical significance of tumor cell-lined vasculature in ovarian carcinoma: implications for anti-vasculogenic therapy. Cancer Biology & Therapy. 1, 661-664 (2002).
- Shirakawa, K. Hemodynamics in vasculogenic mimicry and angiogenesis of inflammatory breast cancer xenograft. Ricerca sul cancro. 62, 560-566 (2002).
- Ruf, W. Differential role of tissue factor pathway inhibitors 1 and 2 in melanoma vasculogenic mimicry. Ricerca sul cancro. 63, 5381-5389 (2003).
- Seftor, R. E. Cooperative interactions of laminin 5 gamma2 chain, matrix metalloproteinase-2, and membrane type-1-matrix/metalloproteinase are required for mimicry of embryonic vasculogenesis by aggressive melanoma. Ricerca sul cancro. 61, 6322-6327 (2001).
- Shirakawa, K. Vasculogenic mimicry and pseudo-comedo formation in breast cancer. International Journal of Cancer. 99, 821-828 (2002).
