我々は、コラーゲンベースを開発している<em> in vitroで</emすべての乳癌のサブタイプのサンプルから増殖と浸潤を促進する>アッセイ。光学投影断層撮影、三次元顕微鏡法は、腫瘍の拡大を視覚化し、定量化するために利用された。このアッセイは、個々の腫瘍サンプルの薬物反応を定量化するために使用されることがあります。
乳がんは、西洋世界における死亡の主要な原因です。それはよく乳がんの広がりは、最初にローカルで、後に遠位、患者の予後における主要な因子であることが確立されている。乳癌の実験系は、通常、原発腫瘍または胸水由来の細胞株に依存しています。二つの大きな障害は、この研究の妨げになる:(i)は乳癌のいくつかの既知のサブタイプ(特に予後不良腔側Bの腫瘍は)現在の行のコレクション内で表現されていないこと、(ii)腫瘍の微小環境の影響は、通常は考慮されません。
我々は、すべてのサブタイプの文化原発性乳癌標本のテクニックを示しています。これは、腫瘍の小片が、私はクッションソフトラットのコラーゲンに埋め込まれている3次元(3D)培養系を用いることによって達成される。 2〜3週間以内に、腫瘍細胞はコラーゲンに広がり、人間tumours1で観察されたものと同様の様々な構造を形成する。オリジナルのコア内で実行可能な脂肪細胞、上皮細胞と線維芽細胞は組織学的に明らかにした。 squamoid形態と悪性上皮細胞は、周囲のコラーゲンに侵入する実証された。核多形性は有糸分裂像およびアポトーシス小体とともに、これらの細胞内で明らかであった。
我々は、培養中の腫瘍の広がりの程度を定量化するために光学投影断層撮影法(OPT)、3Dイメージング技術を、採用している。我々は腫瘍の文化のバルク量を測定するためにOPTを使用した、パラメータは、薬物療法に対する反応を評価するために、乳がん患者のネオアジュバント治療中に測定した。
ここでは、サブタイプのバイアスなしで培養ヒト乳癌腫瘍の機会を提示し、それらの生体外での広がりを定量化する。このメソッドは、元の腫瘍の薬剤感受性を定量化するために将来的に使用することができる。これは現在使用されている細胞株よりも多くの予測モデルを提供することがあります。
癌細胞株の挙動を研究するためにコラーゲンベースのアッセイは、現在広く6,7,8を使用されています。それにもかかわらず、これらのアッセイは、完全な腫瘍の複雑さとその環境に反映していない。本研究では、我々はヒト乳癌の材料は同じような方法は、ex vivoで使用できることを示す。更に、OPTは、乳がんの3D拡大を特徴付けるために有用なツールです。我々はこの技術の主な制限は、腫瘍の材料(シングルコア生検に4〜6アッセイに十分である)の可用性であることがわかった。別の制限要因は、その構造的な侵略は、アッセイの約40%でのみ発生します。これを克服するために、我々は定期的に目に見える成長とすべてのアッセイに7日目の周りの任意の治療を追加します。
OPTの使用はまた、薬物治療の結果の一括変更、ex vivoで 、検出するために将来的に拡張することができます。これは順番に、動物モデルに依存しない、より個別化がん治療を促進することができます。我々は現在、タモキシフェンex vivoでのER +の腫瘍の反応を探っています。
The authors have nothing to disclose.
我々は、臨床検体を得るための彼女の貴重な援助のためにローナレンショウ(エジンバラの乳ユニットを)感謝。
腫瘍の材料の使用量は、ロージアンの研究倫理委員会(08/S1101/41)によって承認され、実験的がん医療センタープログラム(エジンバラ)の後援の下に得られた。
この作品は、スコットランドの財政審議会でサポートされています。 ADLは、ミスマーガレットバタードリーキー信託臨床の仲間です。
Name of Reagent | Company | Catalogue No. |
MEGM Complete | Lonza | CC-3150 |
DMEM/F12 | Sigma-Aldrich | D8900 10X1L |
β-oestradiol | Sigma-Aldrich | E8875-250MG |
Rabbit anti-cytokeratin | Dako | Z0622 |
Goat anti-rabbit Alexa555 | Invitrogen | A21422 |
All other standard reagents were obtained from Sigma-Aldrich.