Bir protokol unilateral 6-OHDA lezyonlar, farelerde medyal önbeyin demet gerçekleştirmek için tarif edilmektedir. Bu yöntem, striatal dopamin ve 90,63>% 95 kaybı gösteren hayatta kalan hayvanların% 89 ile düşük mortalite oranı (% 13.3) ±% -4,02, lezyonun tarafa doğru ipsiversive dönme önyargı vardır.
Bu özetlediği bazal ganglionlar devresi değişiklikleri ve farmakoloji olarak gözlenen bu yana tek taraflı olarak lezyonlanmıştır 6 hyroxydopamine (6-OHDA)-lezyonlanan Parkinson hastalığı sıçan modeli (PD), parkinson belirtileri altında yatan mekanizmaları anlayışımıza ilerlemede paha biçilmez olmak için ispat etti Parkinsonlu hastalarda 1-4. Bununla birlikte,, çıkış yollarının, başlıca, bazal ganglia bir giriş bölgesi olan striatum, dahilinde kortiko-striatal sinapsların oluşan hassas hücresel ve moleküler değişiklik zor kalır, ve bu patolojik anormallikleri parkinson arazlarının yatan 3 ortaya çıkan sitenin olduğuna inanılmaktadır 5.
PD, bazal ganglion devresi-striatal Nigro yolunun aşağıdaki dejenerasyon değişikliklerin altında yatan mekanizmaları anlamak, büyük ölçüde teşvik tarafından yönlendirilen aşırı eksprese yeşil floresan proteinleri gelişimi bakteriyel yapay kromozom (BAC) fareler tarafından ileri olmuşturrs özel izolasyon çalışılması gerekir izin vererek 8:; iki striatal çıkış yolları (EGFP-D2 ve EGFP-A2a dolaylı yolun EGFP-D1 doğrudan yolak). Örneğin, son yıllarda yapılan çalışmalarda, parkinson fareler 9,10 sinaptik plastisite patolojik değişiklikler olduğunu ileri sürmüşlerdir. Ancak, bu çalışmalar yavru fareler ve parkinsonizm akut modelleri kullandı. 6-OHDA stabil lezyonlar ile erişkin sıçanlarda açıklanan değişimler de bu modellerde oluşup oluşmadığına belirsizdir. Diğer gruplar medial ön beyin demeti (MFB) lezyon PD tek taraflı lezyonlanan istikrarlı bir 6-OHDA yetişkin fare modeli oluşturmak için çalıştılar, ne yazık ki, bu çalışmada mortalite oranı sadece 14% 21 cerrahi kalan, son derece yüksek oldu gün veya daha uzun 11. Daha yeni çalışmalarda, düşük bir mortalite oranı ile intra-nigral lezyonlar dopaminerjik nöronlar>% 80 kaybı, L-DOPA bağlı diskinezi 11,12,13,14 Ancak ifade değişkenBu çalışmalar. , PD iyi kurulmuş bir başka fare modeli, MPTP-lezyonlanan fare 15. Iken, bu model potansiyel nöroprotektif ajanların 16 değerlendirme yararlı olan bu modeli genellikle motor açıklarının neden başarısız, PD belirtileri altında yatan mekanizmaları anlamak için daha uygun ve geniş bir lezyon 17, 18 ölçüde değişkenlik gösterir .
Burada içine doğrudan 6-OHDA, uygulama tarafından, tutarlı>% 95 striatal dopamin kaybı (gibi HPLC ile ölçülen) yanı sıra, davranışsal üreten neden MFB, stabil bir PD unilateral 6-OHDA-lezyonlu fare modelinde geliştirilmiştir. dengesizliklerin PD iyi karakterize tek taraflı 6-OHDA-lezyonlanan sıçan modelinde gözlendi. PD Bu yeni geliştirilen bir fare modelinde, parkinson arazlarının nesil altında yatan mekanizmaları anlamak için değerli bir araç ispat edecektir.
Bu protokol bir lezyon başarı oranı yüksek ve düşük mortalite oranı, son derece tekrarlanabilir Parkinson hastalığı, istikrarlı bir tek taraflı 6-OHDA-lezyonlanan fare modelinin üretimi için bir yöntem açıklanır. , 6-OHDA lezyon cerrahisi başarı kolayca lezyonlu striatum 27>% 95 dopamin eksikliği göstergesidir>% 70 ipsiversive rotasyonlar ile ölçümü ile spontan dönme davranışı tahmin edilebilir. Striatal dopamin düzeylerini 28 doğrudan ölçüm sağlar striata…
The authors have nothing to disclose.
Bu çalışma, Dışişleri Bakanlığı ve Uluslararası Ticaret (Kanada Hükümeti), University of Toronto Connaught Fonu, Yenilik, NSERC, Krembil Vakfı ve için Cure Parkinson Güven Kanada Vakfı tarafından desteklenmiştir.
Name of the reagent | Company | Catalogue number | Comments (optional) |
desipramine HCl | Sigma-Aldrich, Oakville, ON, Canada | D125 | 25mg/kg |
pargyline HCl | Sigma-Aldrich, Oakville, ON, Canada | P8013 | 5mg/kg |
6-OHDA HBr | Sigma-Aldrich, Oakville, ON, Canada | H116 | 3mg / mouse |
stereotaxic Frame | Kopf Instruments, Tujunga, CA, USA | Model 900 | |
mouse ear cups | Kopf Instruments, Tujunga, CA, USA | Model 921 Zygoma Ear Cups | |
mouse incisor bar | Kopf Instruments, Tujunga, CA, USA | Model 923B | |
mouse anaesthesia mask | Kopf Instruments, Tujunga, CA, USA | Model 923B | |
priming kit (containing 250ml syringe) | Hamilton Company, Reno, NV, USA | PRMKIT 81120 | |
RN compression fitting kit (1 mm) | Hamilton Company, Reno, NV, USA | 55750-01 | |
PEEK tubing from RN compression fitting kit< (1/16th inch) | Hamilton Company, Reno, NV, USA | 55751-01 | |
dual small hub RN Coupler | Hamilton Company, Reno, NV, USA | 55752-01 | |
luer to small hub RN adaptor | Hamilton Company, Reno, NV, USA | 55753-01 | |
1ml 25S syringe model 7001KH | Hamilton Company, Reno, NV, USA | 80100 | |
*33G removable needle (RN) pack of 6. . Custom 1 inch with 45<° bevel | Hamilton Company, Reno, NV, USA | 7803-05 | |
Scissors | Fine Science Tools, Vancouver, BC, Canada. | 14084-08 | |
Scalpel | Fine Science Tools, Vancouver, BC, Canada | 10003-12 | |
Scalpel blades | Fine Science Tools, Vancouver, BC, Canada | 10035-20 | |
Forcep | Fine Science Tools, Vancouver, BC, Canada | 11608-15 | |
Hemostats | Fine Science Tools, Vancouver, BC, Canada. | 13004-14 | |
Isoflurane | Abbot | 02241315 | 2-3% |
Suters (Vicryl 4.0) | Syneture | SS-683 | |
Steriliser | Fine Science Tools, Vancouver, BC, Canada | 18000-45 | |
Infusion Pump | Harvard Apparatus | PhD 22/2000 | |
Needles (27G) | Becton Dickinson | 305109 | |
Needles (25G) | Becton Dickinson | 305127 | |
Syringes (1ml) | BD syringe | 309692 | |
Anaesthesia trolley | LEI medical | M2000 | |
Baytril | CDMV, St. hyacinthe, QC | 102207 | |
Lidocaine | CDMV, St. hyacinthe, QC | 3914 | |
Betadine solution | CDMV, St. hyacinthe, QC | 19955 |