Remplacement ovariectomie et 17β-estradiol chez les rats et les souris: une démonstration visuelle

Summary

Ovariectomie et le remplacement ultérieur de la 17β-estradiol par voie de capsules en silastic et Nutella par voie orale sont mises en évidence chez des rats et des souris.

Abstract

Les œstrogènes sont une famille des hormones sexuelles féminines avec un spectre exceptionnellement large d'effets. Lorsque les rats et les souris sont utilisés dans la recherche d'œstrogènes, ils sont souvent une ovariectomie en vue de l'ablation de la production d'hormones cycle rapide, le remplacement de la 17β-estradiol exogène. Il ya, cependant, l'absence de consensus sur la façon dont l'hormone doit être administré pour obtenir des concentrations sériques physiologiques. Ce point est crucial puisque le 17β-estradiol niveau / administration méthode influe profondément sur ​​les résultats expérimentaux ^1-3. Nous avons dans une série d'études ont caractérisé les différents modes de 17β-estradiol administration, constatant que sous-cutanés capsules en silastic et par-orale de noix de crème Nutella sont supérieurs aux commercialement disponibles à libération lente pellets (produit par la société Research innovante d'Amérique) et injections quotidiennes en termes de production physiologiques des concentrations sériques de 17β-estradiol ^4-6. Parmi les advantages de la méthode de noix de crème, qui a déjà été utilisé pour la buprénorphine administration ^7, c'est que lorsqu'il est utilisé pour l'administration d'œstrogènes par voie orale il ressemble à l'hormonothérapie substitutive et est non-invasive. Les capsules sous-cutanées en silastic sont pratiques et de produire des concentrations sériques les plus stables. Cet article contient étape vidéo-par-étape des démonstrations de l'ovariectomie et le remplacement d'hormone 17β-estradiol par des capsules en silastic et Nutella par voie orale chez le rat et la souris, suivi par une discussion sur des aspects importants des procédures d'administration.

Protocol

1. L'ovariectomie par la Route dorsale Anesthésier l'animal, par exemple en utilisant 1,5% d'isoflurane (4% pour l'induction) dans un oxyde d'oxygène / protoxyde d'azote de 30% / 70% mélange. Placer l'animal en position couchée sur une plaque de chauffage relié à un thermomètre rectal. Il est important d'avoir une fine couche d'isolation entre l'animal et la plaque, et que le thermomètre de feed-back du système maintient la température du corps au sein de 37 ?…

Discussion

Les modes d'administration présentés ci-dessus dans des études antérieures ont prouvé supérieur à libération lente commerciales boulettes et les injections en termes de production physiologiques des concentrations sériques de 17β-estradiol. Alors que l'granulés à libération lente de très haute et prolongée des pics de concentration sérique, les injections sont extrêmes, les fluctuations hormonales quotidiennes et nécessitent des manipulations répétées de stress des animaux ^4-6. L&…

Materials

Name of the reagent	Company	Catalogue number	Comments
Rimadyl, 50 mg/mL	Pfizer	462986	Postoperative analgesia after ovariectomy.
Lubrithal eye gel	Leo Laboratories		Eye protection during surgery.
Jodopax vet	Pharmaxim		Surgery disinfection.
Vicryl 4-0 suture	Johnson & Johnson		Wound suture and ovary ligation.
17β-estradiol, >98%	Sigma	E8875-1G	In sesame oil for silastic capsules and Nutella.
Sesame oil	Sigma	S3547-1L	Dissolving the 17β-estradiol.
Silastic tubing, ID/OD: 1.575/3.175 mm	Dow Corning	508-008	Production of silastic capsules.
Wooden applicator stick	Selefatrade	12-0783	Capping of silastic capsules.
Nutella	Ferrero		Medium for peroral 17β-estradiol.