Ovariektomi og 17β-østradiol erstatning i rotter og mus: A Visual demonstrasjon

Summary

Ovariektomi og påfølgende utskifting av 17β-østradiol ved hjelp av silastic kapsler og peroral Nutella er demonstrert i rotter og mus.

Abstract

Østrogen er en familie av kvinnelige kjønnshormoner med en eksepsjonelt bredt spekter av effekter. Når rotter og mus brukes i østrogen forskning de er ofte ovariectomized for å ablate raskt sykling hormon produksjon, erstatter 17β-østradiol eksogent. Det er imidlertid mangel på enighet om hvordan hormonet bør gis for å oppnå fysiologiske serumkonsentrasjoner. Dette er avgjørende fordi den 17β-østradiol nivå / administrasjon metode dypt påvirker de eksperimentelle resultatene ^1-3. Vi har i en rekke studier som karakteriseres de ulike 17β-østradiol administrasjon, finne at subkutane silastic kapsler og per-oral nut-krem Nutella er overlegen kommersielt tilgjengelige slow-release pellets (produsert av selskapet nyskapende forskning of America) og daglige injeksjoner i form av produksjon av fysiologiske serumkonsentrasjoner av 17β-østradiol ^4-6. Blant advantages av nut-krem metode, som tidligere har vært brukt til buprenorfin administrasjon ^7, er at når det brukes for østrogen administrasjon den ligner peroral østrogenbehandling og er ikke-invasiv. De subkutane silastic Kapslene er praktisk og produsere de mest stabile serumkonsentrasjoner. Denne videoen artikkelen inneholder trinn-for-steg demonstrasjoner av ovariektomi og 17β-østradiol hormon erstatning etter silastic kapsler og peroral Nutella i rotter og mus, etterfulgt av en diskusjon av viktige sider av forvaltningen prosedyrer.

Protocol

1. Ovariektomi via Dorsal Route Anesthetize dyret, for eksempel med 1,5% isofluran (4% for induksjon) i en oksygen / dinitrogenoksid 30% / 70% blanding. Plasser dyret i liggende stilling på en varmeplate koblet til en rektal termometer. Det er viktig å ha et tynt lag med isolasjon mellom dyret og plate, og at termometeret feed-back system holder kroppstemperaturen innenfor 37 ± 0,5 ° C. Påfør gel for øyebeskyttelse og administrere 5 mg Rimadyl / kg kroppsvekt fortynnet i saltvann subkutant på den late…

Discussion

De administrative moduser presentert ovenfor har i tidligere studier vist seg overlegen i forhold til kommersielle slow-release pellets og injeksjoner i form av produksjon av fysiologiske serumkonsentrasjoner av 17β-østradiol. Mens den sakte-release pellets produsere svært høye og langvarig serumkonsentrasjonsprofiler topper, injeksjoner forårsake ekstreme, daglige hormon svingninger og krever gjentatt stressende håndtering av dyrene ^4-6. Betydningen av å velge adekvate administrative moduser fremheves…

Materials

Name of the reagent	Company	Catalogue number	Comments
Rimadyl, 50 mg/mL	Pfizer	462986	Postoperative analgesia after ovariectomy.
Lubrithal eye gel	Leo Laboratories		Eye protection during surgery.
Jodopax vet	Pharmaxim		Surgery disinfection.
Vicryl 4-0 suture	Johnson & Johnson		Wound suture and ovary ligation.
17β-estradiol, >98%	Sigma	E8875-1G	In sesame oil for silastic capsules and Nutella.
Sesame oil	Sigma	S3547-1L	Dissolving the 17β-estradiol.
Silastic tubing, ID/OD: 1.575/3.175 mm	Dow Corning	508-008	Production of silastic capsules.
Wooden applicator stick	Selefatrade	12-0783	Capping of silastic capsules.
Nutella	Ferrero		Medium for peroral 17β-estradiol.