Ovariectomía y 17β-estradiol reemplazo en ratas y ratones: una demostración visual

Summary

Ovariectomía y la consiguiente sustitución de 17β-estradiol por medio de cápsulas de Silastic y Nutella por vía oral se ha demostrado en ratas y ratones.

Abstract

Los estrógenos son una familia de hormonas sexuales femeninas con un espectro excepcionalmente amplia de efectos. Cuando las ratas y los ratones son utilizados en la investigación de los estrógenos que son comúnmente ovariectomizadas con el fin de realizar la ablación de la producción de hormonas de ciclo rápido, en sustitución de la exógena 17β-estradiol. Hay, sin embargo, la falta de consenso respecto a cómo la hormona debe ser administrado para obtener las concentraciones fisiológicas de suero. Esto es crucial ya que el nivel de 17β-estradiol / método de administración influye profundamente en los resultados experimentales ^1-3. Tenemos en una serie de estudios que se caracterizan los diferentes modos de administración de 17β-estradiol, encontrando que subcutáneos cápsulas de silastic y por vía oral Nutella nuez de crema son superiores a las disponibles en el mercado pastillas de liberación lenta (producido por la compañía Research innovador de América) y inyecciones diarias en términos de producción fisiológicas las concentraciones séricas de 17β-estradiol ^6.4. Entre los advantages del método tuerca-crema, que previamente ha sido utilizado para la buprenorfina administración ^7, es que cuando se utiliza para la administración de estrógenos que se asemeja a la terapia de sustitución hormonal por vía oral y no es invasivo. Las cápsulas subcutáneas silastic son convenientes y producir las concentraciones séricas más estables. Este artículo video contiene paso a paso las demostraciones de la ovariectomía y 17β-estradiol reemplazo de la hormona por las cápsulas de silastic y Nutella por vía oral en ratas y ratones, seguidos por una discusión de aspectos importantes de los procedimientos de gestión.

Protocol

1. Ovariectomía a través de la Ruta del dorsal Se anestesia el animal, por ejemplo, utilizando 1,5% de isoflurano (4% para la inducción) en un oxígeno / óxido nitroso 30% / 70% mezcla. Colocar el animal en posición boca abajo en una placa de calefacción conectado a un termómetro rectal. Es importante tener una fina capa de aislamiento entre el animal y la placa, y que el termómetro de realimentación del sistema mantiene la temperatura corporal dentro de 37 ± 0,5 ° C. Aplique el gel para proteger l…

Discussion

Los modos de administración presentados anteriormente tienen en estudios anteriores demostró ser superior a comerciales gránulos de liberación lenta y las inyecciones en términos de producir fisiológicas concentraciones séricas de 17β-estradiol. Mientras gránulos de liberación lenta, producen picos séricos muy elevados y prolongados de concentración, las inyecciones causar fluctuaciones extremas, la hormona del día y requieren un manejo estresante repetida de los animales de ^4-6. La importancia d…

Materials

Name of the reagent	Company	Catalogue number	Comments
Rimadyl, 50 mg/mL	Pfizer	462986	Postoperative analgesia after ovariectomy.
Lubrithal eye gel	Leo Laboratories		Eye protection during surgery.
Jodopax vet	Pharmaxim		Surgery disinfection.
Vicryl 4-0 suture	Johnson & Johnson		Wound suture and ovary ligation.
17β-estradiol, >98%	Sigma	E8875-1G	In sesame oil for silastic capsules and Nutella.
Sesame oil	Sigma	S3547-1L	Dissolving the 17β-estradiol.
Silastic tubing, ID/OD: 1.575/3.175 mm	Dow Corning	508-008	Production of silastic capsules.
Wooden applicator stick	Selefatrade	12-0783	Capping of silastic capsules.
Nutella	Ferrero		Medium for peroral 17β-estradiol.