Summary

Ovariektomi och 17β-östradiol ersättning i råttor och möss: A Visual Demonstration

Published: June 07, 2012
doi:

Summary

Ovariektomi och efterföljande ersättning av 17β-östradiol genom silastiska kapslar och peroral Nutella demonstreras i råttor och möss.

Abstract

Östrogener är en familj av kvinnliga könshormoner med ett exceptionellt brett spektrum av effekter. När råttor och möss används i östrogen forskning de vanligtvis ovariektomi för att avlägsna den snabbt cykla hormonproduktionen, ersätter 17β-östradiol exogent. Det är dock brist på enighet om hur hormonet bör administreras för att få fysiologiska serumkoncentrationer. Detta är avgörande eftersom 17β-östradiol nivå / administreringsmetod djupt påverkar de experimentella resultaten 1-3. Vi har en rad studier kännetecknas de olika former av 17β-östradiol administration finner att subkutana silastiska kapslar och perorala nut-kräm Nutella är överlägsna kommersiellt tillgängliga långsam frisättning pellets (tillverkas av företaget Innovative Research of America) och dagliga injektioner i form av framställning fysiologiska serumkoncentrationer av 17β-östradiol 4-6. Bland Advantages av muttern-cream-metoden, som tidigare har använts för buprenorfin administration 7, är att när den används för östrogen administration det liknar peroral hormonersättningsterapi och är icke-invasiv. De subkutana silastiska Kapslarna är bekväma och ger de mest stabila serumkoncentrationer. Denna video artikeln innehåller steg-för-steg demonstrationer av ovariektomi och 17β-östradiol hormonersättning med silastiska kapslar och peroral Nutella hos råttor och möss, följt av en diskussion om viktiga aspekter av de administrativa förfarandena.

Protocol

1. Ovariektomi via Dorsal Route Bedöva djur, t ex med användning av 1,5% isofluran (4% för induktion) i en syre / lustgas 30% / 70% blandning. Placera djuret i framstupa läge på en värmeplatta ansluten till en rektal termometer. Det är viktigt att ha ett tunt skikt av isolering mellan djuret och plattan, och att termometern återkoppling systemet håller kroppen temperatur inom 37 ± 0,5 ° C. Ansök gel för ögonskydd och administrera 5 mg Rimadyl / kg kroppsvikt utspädd i saltlösning subkutant på…

Discussion

De administrationssätt som presenteras ovan har i tidigare studier visat överlägsen kommersiella långsam frisättning pellets och injektioner i form av produktion av fysiologiska serumkoncentrationer av 17β-östradiol. Medan den långsamma frisättning pellets ger mycket höga och långvariga serumkoncentrationer toppar, injektionerna orsakar extrema, dagliga hormon svängningar och kräver upprepad stressande djurhanteringen 4-6. Vikten av att välja lämpliga administrativa lägen markeras av den senas…

Divulgazioni

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Studien har finansierats av Linköpings universitet och Landstinget i Östergötland.

Materials

Name of the reagent Company Catalogue number Comments
Rimadyl, 50 mg/mL Pfizer 462986 Postoperative analgesia after ovariectomy.
Lubrithal eye gel Leo Laboratories   Eye protection during surgery.
Jodopax vet Pharmaxim   Surgery disinfection.
Vicryl 4-0 suture Johnson & Johnson   Wound suture and ovary ligation.
17β-estradiol, >98% Sigma E8875-1G In sesame oil for silastic capsules and Nutella.
Sesame oil Sigma S3547-1L Dissolving the 17β-estradiol.
Silastic tubing, ID/OD: 1.575/3.175 mm Dow Corning 508-008 Production of silastic capsules.
Wooden applicator stick Selefatrade 12-0783 Capping of silastic capsules.
Nutella Ferrero   Medium for peroral 17β-estradiol.

Riferimenti

  1. Strom, J. O., Theodorsson, A., Theodorsson, E. Dose-related neuroprotective versus neurodamaging effects of estrogens in rat cerebral ischemia: a systematic analysis. J. Cereb. Blood Flow Metab. 29, 1359-1372 (2009).
  2. Strom, J. O., Theodorsson, E., Holm, L., Theodorsson, A. Different methods for administering 17beta-estradiol to ovariectomized rats result in opposite effects on ischemic brain damage. BMC Neurosci. 11, 1471-2202 (2010).
  3. Strom, J. O., Theodorsson, A., Theodorsson, E. Hormesis and Female Sex Hormones. Pharmaceuticals. 4, 15 (2011).
  4. Isaksson, I. M., Theodorsson, A., Theodorsson, E., Strom, J. O. Methods for 17beta-estradiol administration to rats. Scandinavian journal of clinical and laboratory investigation. , (2011).
  5. Strom, J. O., Theodorsson, E., Theodorsson, A. Order of magnitude differences between methods for maintaining physiological 17beta-oestradiol concentrations in ovariectomized rats. Scand. J. Clin. Lab Invest. 68, 814-822 (2008).
  6. Ingberg, E., Theodorsson, A., Theodorsson, E., Strom, J. O. Methods for long-term 17beta-estradiol administration to mice. General and comparative endocrinology. , (2011).
  7. Kalliokoski, O., Jacobsen, K. R., Hau, J., Abelson, K. S. Serum concentrations of buprenorphine after oral and parenteral administration in male mice. Vet. J. 187, 251-254 (2011).
  8. Simpkins, J. W. Estrogens may reduce mortality and ischemic damage caused by middle cerebral artery occlusion in the female rat. J. Neurosurg. 87, 724-730 (1997).
  9. Wise, P. M., Dubal, D. B. Estradiol protects against ischemic brain injury in middle-aged rats. Biol. Reprod. 63, 982-985 (2000).
  10. Saleh, T. M., Cribb, A. E., Connell, B. J. Estrogen-induced recovery of autonomic function after middle cerebral artery occlusion in male rats. Am. J. Physiol. Regul. Integr. Comp. Physiol. 281, 1531-1539 (2001).
  11. Bingham, D., Macrae, I. M., Carswell, H. V. Detrimental effects of 17beta-oestradiol after permanent middle cerebral artery occlusion. J. Cereb. Blood Flow Metab. 25, 414-420 (2005).
  12. Carswell, H. V. Differential effects of 17beta-estradiol upon stroke damage in stroke prone and normotensive rats. J. Cereb. Blood Flow Metab. 24, 298-304 (2004).
  13. Yong, Y. 17beta-estradiol potentiates ischemia-reperfusion injury in diabetic ovariectomized female rats. Brain Res. 1054, 192-199 (2005).
  14. Theodorsson, A., Theodorsson, E. Estradiol increases brain lesions in the cortex and lateral striatum after transient occlusion of the middle cerebral artery in rats: no effect of ischemia on galanin in the stroke area but decreased levels in the hippocampus. Peptides. 26, 2257-2264 (2005).
  15. Levin-Allerhand, J. A., Sokol, K., Smith, J. D. Safe and effective method for chronic 17beta-estradiol administration to mice. Contemp. Top Lab Anim. Sci. 42, 33-35 (2003).
check_url/it/4013?article_type=t

Play Video

Citazione di questo articolo
Ström, J. O., Theodorsson, A., Ingberg, E., Isaksson, I., Theodorsson, E. Ovariectomy and 17β-estradiol Replacement in Rats and Mice: A Visual Demonstration. J. Vis. Exp. (64), e4013, doi:10.3791/4013 (2012).

View Video