Summary

השתלות מעי דק orthotopic בחולדות

Published: November 06, 2012
doi:

Summary

השתלת מעי דק הפכה אפשרות טיפול מקובלת לחולים עם אי ספיקת מעיים בלתי הפיכה. מודל ניסיוני שלנו של השתלת מעי דק orthotopic בחולדות משמש ככלי אמין לטיפול חיסוני בסיסיות ותהליכים דלקתיים שיסבכו השתלת מעיים.

Abstract

השתלת מעי דק הפכה אפשרות קלינית מקובלת לחולים עם תסמונת מעי קצר וכישלון של תזונת Parenteral (כישלון מעיים בלתי הפיך). במרכזים מיוחדים השתפר אופרטיבי ואסטרטגיות ניהול הובילו למטופל מצוין לטווח קצר ובינוני טווח והישרדות שתל תוך מתן איכות חיים גבוהה 1,3. שלא כמו בהשתלה הנפוצה יותר של איברים מוצקים אחרים (כלומר לב, כבד) רב מנגנון בסיסי של תפקוד שתל ושינויים חיסוניים הנגרם על ידי השתלת מעי אינו ידוע לחלוטין 6,7. פרקים של דחייה חריפה, אלח דם וכישלון שתל הכרוני הם המכשולים העיקריים עדיין תורמים לתוצאות לטווח ארוכות פחות טובות ופוגעים תעסוקה נרחבת יותר של ההליך, למרות מספר גדל והולך של חולים על תזונת Parenteral הבית שהיה פוטנציאל להפיק תועלת מהשתלה מסוג זה. המעי הדק מכילמספר גדול של הנוסעים leucocytes נפוץ המכונה חלק ממערכת הלימפה קשורה (גאלט) להיות חלק זה מהסיבה לimmunogenity הגבוה של שתל מעי המעי. הנוכחות והקרבה של commensals ומזיקים רבים בבטן, מסבירות את החומרה של אפיזודות אלח דם פעם שלמות ריריות שתל נפגמת (למשל על ידי דחייה). כדי לקדם את התחום של נתוני מעיים וmultiorgan השתלה יותר שנוצרו ממודלים של בעלי חיים אמינים וריאליים הוא זקוקים. המודל אמור בהסכם זה משלב את שניהם אמינות והיתכנות הוקמה פעם אחת בצורה סטנדרטית ויכול לספק תובנה חשובה במנגנונים המורכבים המולקולריים, התאיים ופונקציונליים שמופעלים על ידי השתלת מעיים. אנחנו השתמשנו בהצלחה ומעודנת ההליך המתואר על יותר מ 5 שנים במעבדה שלנו 8-11. פורמט וידאו מבוסס יופיטר הוא שימושי במיוחד כדי להדגים את proce המורכבדורה ולהימנע ממלכודות ראשוניות לקבוצות מתכננות להקים מודל מכרסם orthotopic חוקר השתלת מעיים.

Protocol

1. מבצע תורם עכברוש התורם צריך להיות כל זמן צום של 24 שעות (גישה חופשיה לתמיסת מים / גלוקוז). כדי לגרום להרדמת משאיפת isoflurane, להתחיל עם 2% בריסוס רגיל, ולאחר מכן להפחית 1% לאחר ביצוע laparotomy. בצע קמצוץ…

Representative Results

כמובן שלאחר ניתוח רגיל החיות המושתלות צריכות להתאושש במהירות מההליך תחת מנורת חום לכ 1 שעות. היפותרמיה היא אחד הגורמים עיקריים לתמותה לאחר ניתוח ויש להימנע בזהירות תוך ואחרי ניתוח. הפסדי נוזלים במהלך ניתוח חייבים להיות מוחלפים על …

Discussion

בעוד מודלי השתלת מעיים בעכברים כבר תוארו כבר ב5 1970ies רוב הדגמים המועסקים לאחרונה כרוך השתלת מעי heterotopic בטכניקות שונות 13. בעוד הליכי heterotopic בכלל יש יתרון של טכניקות מייקרו קלות ונגישות קלה יותר של השתל לצורך ההערכה, השתלת מעיים heterotopic יש חסרון הגדול של לא לוק…

Divulgazioni

The authors have nothing to disclose.

Materials

Name of the reagent Company Catalogue number Comments (optional)
University of Wisconsin (UW) solution (ViaSpan) Bristol-Myers Squibb
Uro-Nebacetin N solution Nycomed 6967855
Ampicillin Ratiopharm
Carprofen (Rimadyl) Pfizer
Prolene 10-0 unresorbable suture Ethicon
Monocryl 6-0 resorbable suture Ethicon
Vicryl 3-0 resorbable suture Ethicon
i.v. Catheter G 20 1.1×33 mm Braun
i.v. Catheter G 22 0.9×25 mm Braun
Kodan Skin Prep Schülke
NaCl 0.9% Infusion solution Braun
Curved forceps small FineScienceTools 11009-13
Micro forceps curved AESCULAP BD 333
Micro forceps curved AESCULAP FD281R
Micro forceps straight 1 WPI 5
Micro forceps straight 2 WPI 2
Micro needle holder WPI 14081
Micro scissors FineScienceTools 15006-09
Micro scalpel MANI Ophthalmic knife
Micro clamps AESCULAP FB329R

Riferimenti

  1. Abu-Elmagd, K. M., et al. Five Hundred Intestinal and Multivisceral Transplantations at a Single Center: Major Advances With New Challenges. Ann. Surg. 250 (4), 567-56 (2009).
  2. Berney, T., et al. Portal versus systemic drainage of small bowel allografts: comparative assessment of survival, function, rejection, and bacterial translocation. J. Am. Coll. Surg. 195 (6), 804 (2002).
  3. Fishbein, T. M. Intestinal transplantation. N. Engl. J. Med. 361 (10), 998 (2009).
  4. Hernandez, F., et al. Is portal venous outflow better than systemic venous outflow in small bowel transplantation? Experimental study in syngeneic rats. J. Pediatr. Surg. 40 (2), 336 (2005).
  5. Monchik, G. J., Russell, P. S. Transplantation of small bowel in the rat: technical and immunological considerations. Surgery. 70 (5), 693 (1971).
  6. Murase, N., et al. Graft-versus-host disease after brown Norway-to-Lewis and Lewis-to-Brown Norway rat intestinal transplantation under FK506. Transplantation. 55 (1), 1 (1993).
  7. Murase, N., et al. Immunomodulation of intestinal transplant with allograft irradiation and simultaneous donor bone marrow infusion. Transplant Proc. 31 (1-2), 565 (1999).
  8. Pech, T., et al. Perioperative infliximab application ameliorates acute rejection associated inflammation after intestinal transplantation. Am. J. Transplant. 10 (11), 2431 (2010).
  9. Schaefer, N., et al. Resident macrophages are involved in intestinal transplantation-associated inflammation and motoric dysfunction of the graft muscularis. Am J Transplant. 7 (5), 1062 (2007).
  10. Schaefer, N., et al. Mechanism and impact of organ harvesting and ischemia-reperfusion injury within the graft muscularis in rat small bowel transplantation. Transplant. Proc. 38 (6), 1821 (2006).
  11. Schaefer, N., et al. Acute rejection and the muscularis propria after intestinal transplantation: the alloresponse, inflammation, and smooth muscle function. Transplantation. 85 (10), 1465 (2008).
  12. Xue, L., et al. Surgical experience of refined 3-cuff technique for orthotopic small-bowel transplantation in rat: a report of 270 cases. Am. J. Surg. 198 (1), 110 (2009).
  13. Zhang, X. Q., et al. Simplified techniques in rat heterotopic small bowel transplantation. Transplant. Proc. 38 (6), 1840 (2006).
  14. Zhao, Y., et al. The establishment of a new en bloc combined liver-small bowel transplantation model in rats. Transplant. Proc. 39 (1), 278 (2007).
check_url/it/4102?article_type=t

Play Video

Citazione di questo articolo
Kitamura, K., von Websky, M. W., Ohsawa, I., Jaffari, A., Pech, T. C., Vilz, T., Wehner, S., Uemoto, S., Kalff, J. C., Schaefer, N. Orthotopic Small Bowel Transplantation in Rats. J. Vis. Exp. (69), e4102, doi:10.3791/4102 (2012).

View Video