Octobre 2012: Ce mois-ci dans JoVE

Summary

Voici quelques faits saillants du Octobre 2012 Version du Journal of Experiments visualisées (JoVE).

Abstract

Voici quelques faits saillants du Octobre 2012 Version du Journal of Experiments visualisées (JoVE).

Grønlund et al. Montrent comment isoler et d'analyser les types de cellules spécifiques dans les feuilles des plantes exprimant la protéine fluorescente verte (GFP) en utilisant le tri cellulaire activé par fluorescence (FACS). Cette méthode permet de surmonter la fluorescence de la chlorophylle interférer dans les feuilles, et distingue GFP exprimant protoplastes de non-GFP protoplastes.

En JoVE Neuroscience, Babona-Pilipos et al. démontrer comment construire une chambre de mesure galvanotaxie, ou la migration cellulaire à l'intérieur d'un champ électrique. Grâce imagerie time-lapse et d'analyse d'image, les auteurs peuvent étudier le comportement migratoire des cellules précurseurs neurales dans un champ électrique, ce qui peut conduire à l'utilisation de la stimulation électrique directe précurseurs neuraux vers des sites de blessure ou de maladie.

Articles impliquant microfluplates-formes idic ont une histoire importante publication dans JoVE. Harris et al . ont publié trois articles, qui impliquent un dispositif microfluidique pour séparer les axones des corps cellulaires neuronaux. Ce mois-ci dans JoVE Neuroscience, Higashimori et al. utiliser cette plate-forme microfluidique pour étudier les interactions entre les axones des neurones et des cellules gliales, qui sont essentiels pour la fonction physiologique du système nerveux.

En bio-ingénierie JoVE, deux groupes de recherche démontrer les nouvelles propriétés bioadhésives de chitosane un polymère dérivé de la chitine, qui se trouve dans les parois cellulaires fongiques ou dans la carapace des crustacés et des insectes. Le chitosane est utilisé dans de nombreuses applications industrielles et agricoles, et bioingénieurs sont également trouver des utilisations pour elle dans les applications chirurgicales. Foster et al. ont mis au point un laser à commandeFilm chirurgicale appelée Surgilux, qui combine le chitosane avec indocyanine vert ICG), un colorant photosensible. Ce film chirurgicale se lie fortement aux tissus, comme le muscle, après l'irradiation laser. Lauto et al. développé un film chirurgicale qui combine chitosane avec le colorant photoactif, rose Bengale. Ce nouveau film se lie fortement aux tissus, tels que les intestins, après qu'il a été irradié. Ces films adhésifs sont biocompatibles et peuvent potentiellement être utilisés dans diverses procédures chirurgicales en place des points de suture.

En médecine clinique et translationnelle JoVE, Fiema et al. démontrer une technique à haut débit pour la validation des biomarqueurs dans la maladie du greffon contre l'hôte, une complication fréquente et potentiellement mortelle de cellules ou de tissus. Les auteurs utilisent des tests ELISA disponibles dans le commerce pour analyser de multiples protéines de manière séquentielle.

En JoVE Immunologie et Infection, Keyel et al. Démontrent comment mesurer la cinétique en temps réel des imréponses immunitaires cellulaires des toxines bactériennes en utilisant la microscopie à haute vitesse cellules vivantes. Cette méthode peut être utilisée pour montrer comment les cellules immunitaires répondre à des toxines bactériennes. Combiné à grande vitesse microscopie confocale 3D, cette technique peut également visualiser la réponse de la réparation cellulaire.

En JoVE Applied Physics, Borisenko et al. déterminer la structure électronique des matériaux complexes à l'aide résolue en angle spectroscopie de photoémission dans une installation de rayonnement synchrotron. En combinant les avancées récentes dans le rayonnement synchrotron, science des surfaces, et de la cryogénie, cette méthode peut avoir une idée précise de l'énergie et l'impulsion des électrons à l'intérieur d'un solide, et aborder des questions clés dans le domaine de la physique de la matière condensée.

Cet aperçu résume quelques-uns des notables vidéo-articles disponibles dans le Octobre 2012 Version de Jupiter. Pour d'autres vidéos, s'il vous plaît visitez www.jove.com .

Protocol

Un Based Chitosan, Laser adhésif activé Thin Film chirurgicaux, «SurgiLux ': Préparation et démonstration. L. John R. Foster, Elizabeth Karsten Bio / Polymer Research Group de l'Université de New South Wales La fabrication d'un roman, adhésif flexible à couche mince chirurgicale à partir d'ingrédients approuvés par la FDA, le chitosane et le vert d'indocyanine est décrite. Collage de cette colle à tissu collagène à travers un processus d'activation simple avec une faible puissance laser infrarouge est démontrée. Fabrication et application de Rose Bengale-chitosane Films à la réparation des tissus au laser Antonio lauto 1, Marcus Stoodley 2, Matthew Barton 1, John W. Morley 1, David A. Mahns 1, Leonardo Longo 3, Damia Mawad <sup> 1 1 bioélectronique et le groupe de recherche en neurosciences (BENS), University of Western Sydney, NSW, Australie, 2 Australian School of Advanced Medicine, Université Macquarie, NSW Australie, 3 Faculté de médecine, Université de Sienne, Italie Les sutures sont généralement nécessaires pour réparer les tissus pendant les interventions chirurgicales. Cependant, leur application peut être problématique car elles sont envahissantes et peuvent endommager les tissus. Les procédés de fabrication et l'application d'un adhésif tissulaire roman sont ici rapportés. Ce film adhésif est activé par laser et ne nécessite pas l'utilisation de fils de suture. Un test galvanotaxie pour l'analyse de la cinétique précurseurs neuronaux migration des cellules dans un champ appliqué de l'extérieur électrique à courant continu Robart Babona-Pilipos 1, Milos Popovic R. 2, Cindi M. Morshead 3 1Institut de biomatériaux et du génie biomédical, Université de Toronto, 2 Lyndhurst Centre, Toronto Rehabilitation Institute, 3 Département de chirurgie, Université de Toronto Dans ce protocole, nous allons montrer comment construire des chambres personnalisées qui permettent l'application d'un champ électrique à courant continu pour permettre imagerie time-lapse de cerveau adulte dérivé de neurones translocation cellule précurseur pendant galvanotaxie. L'analyse cellulaire spécifique des feuilles d'Arabidopsis en utilisant la fluorescence tri cellulaire activé Jesper T. Grønlund 1, Alison Eyres 1, Sanjeev Kumar 1, Vicky Buchanan-Wollaston 1, 2, Miriam L. Gifford 1, 2 1 École des sciences de la vie, Université de Warwick, Warwick 2 Systèmes biologie, Université de Warwick Améthode pour produire des protoplastes de feuilles d'Arabidopsis qui sont compatibles avec le tri cellulaire activé par fluorescence (FACS), ce qui permet l'étude des populations cellulaires spécifiques. Cette méthode est compatible avec n'importe quelle ligne Arabidopsis exprimant la GFP dans un sous-ensemble de cellules. Visualisation des réponses toxine bactérienne induite en utilisant direct microscopie de fluorescence cellulaire Peter A. Keyel 1, Michelle E. Heid 1, Simon C. Watkins 2, Russell D. Salter 1 1 Département d'immunologie de l'Université de Pittsburgh School of Medicine, 2 Département de biologie cellulaire et de physiologie de l'Université de Pittsburgh School of Medicine Méthodes de purification du cholestérol contraignant toxine recombinante streptolysine O de E. coli et la visualisation de liaison de la toxine à vivre cellules eucaryotes sont décrisd. Application locale de la toxine induit des changements rapides et complexes dans les cellules ciblées révélant de nouveaux aspects de la biologie toxine. Haut débit séquentiel ELISA pour la validation des biomarqueurs de réaction aiguë du greffon contre l'hôte Bryan Fiema *, Andrew C. Harris *, Aurélie Gomez, Praechompoo Pongtornpipat, Kelly Lamiman, Mark T. Vander Lugt, Sophie Paczesny Sang pédiatrique et de transplantation de moelle, de l'Université du Michigan * Ces auteurs ont contribué à parts égales Validation à haut débit de biomarqueurs multiples peut être effectuée par ELISA séquentielle afin de minimiser les cycles gel / dégel et à utiliser des échantillons de plasma précieux. Ici, nous montrons comment réaliser de manière séquentielle ELISA pour six différents biomarqueurs plasmatiques validées 1-3 de la réaction du greffon contre l'hôte (GVHD) 4 sur le même jasma échantillon. Analyse en Imagerie du Neuron à l'interaction Glia dans la plate-forme microfluidique Culture (MCP)-Based Axon neuronale et Glia co-culture système Haruki Higashimori 1, Yongjie Yang 1, 2 1 Département des neurosciences, de la Tufts University, 2 Programme de neurosciences, Tufts Sackler School of Graduate Biomedical Sciences Cette étude décrit les procédures de mise en place d'un axone des neurones et roman (astro) glie plate-forme de co-culture. Dans ce système de co-culture, la manipulation de l'interaction directe entre un axone unique (et unique cellule gliale) devient possible, ce qui permet une analyse mécaniste du neurone mutuelle à la signalisation gliales. Résolution angulaire spectroscopie de photoémission à très basse température Sergey V. Borisenko 1, Volodymyr B. Zabolotnyy 1, Alexander A. Kordyuk 1, 2, Danil V. Evtushinsky 1, Timur K. Kim 1, 3, Emanuela Carleschi 4, Bryan P. Doyle 4, Rosalba Fittipaldi 5, Mario Cuoco 5, Antonio Vecchione 5, 6 Helmut Berger 1 Institut pour Solid State Research, IFW-Dresden, 2 Institut de Physique du Métal Académie nationale des sciences d'Ukraine, 3 Diamond Light Source LTD, 4 Département de physique, Université de Johannesburg, 5 CNR-SPIN, et Dipartimento di Fisica "ER Caianiello ", Università di Salerno, 6 Institut de Physique de la Matière Complexe, Ecole Polytechnique Fédérale de Lausanne L'objectif général de cette méthode consiste à déterminer la structure à basse énergie électronique des solides à des températures ultra basses à l'aide Angle-Resolved Spectrosc photoémissionopier avec le rayonnement synchrotron. La fabrication d'un dispositif microfluidique pour la compartimentation du Neuron Soma et axones Joseph Harris 1, Hyuna Lee 1, Behrad Vahidi 1, Christina Tu 2, David Cribbs 3, Noo Li Jeon 1, Carl Cotman 3 1 Département de génie biomédical de l'Université de Californie, Irvine, 2 Centre de recherche sur les cellules souches, l'Université de Californie, Irvine, 3 Institut de vieillissement du cerveau et de la démence, de l'Université de Californie, Irvine Dans cette vidéo, nous démontrons la technique de la lithographie douce polydiméthylsiloxane (PDMS) que nous utilisons pour farbricate un dispositif microfluidique pour les neurones en culture. Préparation E18 neurones corticaux de rat pour compartimentation dans un microAppareil rofluidic Joseph Harris 1, Hyuna Lee 1, Christina Tu Tu 2, David Cribbs 3, Carl Cotman 3, Noo Li Jeon 1 1 Département de génie biomédical de l'Université de Californie, Irvine, 2 Centre de recherche sur les cellules souches, l'Université de Californie, Irvine, 3 Institut de vieillissement du cerveau et de la démence, de l'Université de Californie, Irvine Dans cette vidéo, nous démontrons la préparation des neurones corticaux de rat E18. Non-plasma Collage de PDMS pour fabrication bon marché de dispositifs microfluidiques Joseph Harris 1, Hyuna Lee 1, Behrad Vahidi 1, Cristina Tu 2, David Cribbs 3, Carl Cotman 3, Noo Li Jeon 1 1 Département des sciences biomédicales Engineering, Université de Californie, Irvine, 2 sur les cellules souches Research Center, University of California, Irvine, 3 Institut de vieillissement du cerveau et de la démence, de l'Université de Californie, Irvine Dans cette vidéo, nous démontrons comment utiliser le neurone dispositif microfluidique sans collage plasma.