Novembro 2012: Este mês, em JoVE

Summary

Nesta edição, Oestreicher<em> Et al.</em> Nos mostram como isolar bactérias magnetotáticas de amostras de água doce, e concentra-se as bactérias em uma extremidade de um capilar de vidro. As bactérias magnetotáticas pode então ser visualizado por microscopia óptica e electrónica de transmissão, e utilizada para vários outros ensaios.

Abstract

Neste fascículo, Oestreicher et al. Nos mostram como isolar bactérias magnetotáticas de amostras de água doce, e concentra-se as bactérias em uma extremidade de um capilar de vidro. As bactérias magnetotáticas pode então ser visualizado por microscopia óptica e electrónica de transmissão, e utilizada para vários outros ensaios.

Também na edição de 2012 Novembro, Boland et al. Demonstrar como reprogramar fibroblastos em células-tronco pluripotentes induzidas (iPSCs), e como isolar linhas iPSC para injecção em blastocistos tetraplóides, como demonstrado anteriormente no JoVE . Enquanto pipetar à boca, geralmente não é recomendado porque pode ter efeitos adversos, este protocolo requer a técnica, executados com cuidado, para manipular os embriões. Esta é uma das raras ocasiões em que é realmente OK para pipeta boca no laboratório. Se as células induzidas are totalmente pluripotente, que pode resultar em a termo ratinhos derivadas de iPSCs completamente.

Em JoVE Neuroscience, Heermann e Krieglstein demonstrar um método para visualizar o desenvolvimento de células de Schwann ao longo dos axônios em crescimento. Para fazer isso, os nossos autores cultura explantes gânglios cervicais em matrizes de colágeno e tratar os explantes com fator de crescimento neural ou outras substâncias. Os géis de colagénio pode então ser visualizado utilizando lapso de tempo de imagem com microscopia de fluorescência ou de campo brilhante, migrando ao longo de axónios em direcção à periferia.

Também em JoVE Neuroscience, Hoffmann et al. Colocar fones de ouvido minúsculos em pássaros para estudar como eles usam feedback auditivo para ajustar o seu canto. Os autores demonstram como construir os fones de ouvido e anexá-los a cabeça da ave, então, ajustando o sinal acústico, eles podem estudar a base computacional e neurofisiológica de aprendizagem vocal em aves.

Em JoVE Clínica& Translational Medicine, Iyengar et ai. Usar um modelo de tumor do peixe-zebra para o estudo de genes que podem modificar a patogenia do melanoma. Isto é feito em primeiro lugar, a criação de peixes-zebra transgénicos que expressam um gene de interesse. Vários ensaios podem ser realizados para estudar como diferentes genes afectam o melanoma, incluindo o início, invasão e transplantability.

Em Bioengineering JoVE, Martin et al. Demonstrar um ensaio de deslizamento para medir a rigidez à flexão de biopolímeros tais como os microtúbulos (). Ao ligar proteínas do motor a uma lâmina de microscópio, e adicionando microtúbulos fluorescente etiquetado, nossos autores pode analisar a dinâmica de polímeros do citoesqueleto.

Esta pré-visualização resume apenas alguns notáveis ​​vídeo-artigos na edição de novembro de 2012 de Jove. Pare por todo o mês de novembro para verificar as versões de comprimento total desses artigos e muito mais.

Protocol

Geração de camundongos derivadas de células-tronco pluripotentes induzidas Michael J. Boland 1, Jennifer L. Hazen 1, Kristopher L. Nazor 1, Alberto R. Rodriguez 2, Greg Martin 2, Sergey Kupriyanov 2, Kristin K. Baldwin 1 1 Dorris Neuroscience Center e do Departamento de Biologia Celular, The Scripps Research Institute, 2 Mouse Core Facility Genetics, The Scripps Research Institute Gerando pluripotentes induzidas de células-tronco (IPSC) produz linhas de linhas de diferentes potencial de desenvolvimento, mesmo quando eles passam por testes padrão pluripotência. Aqui nós descrevemos um protocolo para produzir ratos derivadas inteiramente de iPSCs, que define as linhas iPSC como possuindo um total pluripotência. Analisando MurinoSchwann desenvolvimento de células Junto axônios em crescimento Stephan Heermann 1, 2, Kerstin Krieglstein 1, 3 1 Departamento de Embriologia Molecular, Instituto de Anatomia e Biologia Celular da Universidade de Freiburg, 2 Departamento de Neuroanatomia, da Universidade de Heidelberg, 3 FRIAS, Universidade de Freiburg Aqui descrevemos uma célula de Schwann (SC) ensaio de migração em que SCs são capazes de desenvolver ao longo dos axônios estendem. Um leve, sistema de fones baseado para manipular feedback auditivo em Songbirds Lukas A. Hoffmann 1, 2, Conor Kelly W. 1, 3, David A. Nicholson 1, 2, Samuel J. Sober 1 1 Departamento de Biologia, Universidade de Emory, 2 Neurociência Pós-Graduação, da Universidade Emory, 3 Program em Neurociências e Biologia Comportamental, Emory University Descrevemos o projeto e montagem de fones de ouvido miniaturizados adequados para a substituição de um feedback do Songbird auditiva natural com um sinal acústico manipulado. Hardware de processamento on-line de som é usado para manipular a saída música, introduzir em tempo real erros no feedback auditivo através dos fones de ouvido, e dirigir a aprendizagem motora vocal. Triagem para Modificadores Melanoma usando um modelo de tumor Zebrafish autóctone Sharanya Iyengar 1, Yariv Houvras 2, 3, J. Craig Ceol 1 Um Programa de Medicina Molecular e do Departamento de Biologia do Câncer, da Universidade de Massachusetts Medical School, dois Departamentos de Cirurgia e Medicina, Weill Cornell Medical College, três Departamentos de Cirurgia e Medicina, New York Presbyterian Hospital <p class = "jove_content"> Uma maneira rápida para triagem de modificadores de melanoma, utilizando um modelo de tumor zebrafish autóctone é apresentado. Leva vantagem de o vector miniCoopR que permite a expressão de genes candidatos de melanoma nos melanócitos. Um método para obtenção das curvas de sobrevida livre de melanoma, um ensaio de invasão, um protocolo para a coloração de anticorpos de melanócitos de escala e um ensaio de transplante de melanoma são descritos. Flexão Medidas rigidez de Biopolímeros usando ensaios de deslizamento Douglas S. Martin, Lu Yu, Brian L. Van Hoozen Departamento de Física, Lawrence University Um método para medir o comprimento de persistência ou rigidez à flexão de biopolímeros é descrito. O método utiliza uma cinesina-driven microtúbulos ensaio deslizar para determinar experimentalmente o comprimento persistência dos microtúbulos individuais e é adaptável a actina ensaios baseados em deslizamento. < / P> Isolamento, coleta e Enriquecimento de bactérias naturais magnetotáticas do Meio Ambiente Zachery Oestreicher 1, Steven K. Lower 1, 2, Wei Lin 3, Brian H. 2 Lower 1 Escola de Ciências da Terra, The Ohio State University, 2 Faculdade de Meio Ambiente e Recursos Naturais, The Ohio State University, 3 Instituto de Geologia e Geofísica da Academia Chinesa de Ciências Nós demonstramos um método para recolher bactérias magnetotáticas (MTB), que podem ser aplicadas para águas naturais. MTB podem ser isolados e enriquecidos a partir de amostras de sedimento utilizando uma configuração relativamente simples que aproveita magnetismo da bactéria natural. Isolado MTB pode então ser analisada em detalhe utilizando luz e microscopia eletrônica. 8 "> Ratos transnuclear pré-definidas T Especificidades célula receptora contra Toxoplasma gondii obtidos através TNCS Oktay Kirak 1, Eva-Maria Frickel 1, Gijsbert Grotenbreg M. 1, 2, Heikyung Suh 1, Rudolf Jaenisch 1, 3, Hidde L. Ploegh 1, 3 1, Whitehead Institute for Biomedical Research, dois Departamentos de Microbiologia e Ciências Biológicas, da Universidade Nacional de Cingapura, 3 Departamento de Biologia, Instituto de Tecnologia de Massachusetts Nós demonstramos aqui que a reprogramação epigenética por transferência nuclear somática (SCNT) pode ser usado como uma ferramenta para gerar modelos de ratos com pré-definido do receptor de células T (TCR) especificidades. Estes ratos expressam a transnuclear TCR correspondente do seu locus endógeno, sob o controlo do promotor endógeno.