Ноябрь 2012: В этом месяце в Юпитер

Summary

В этом вопросе, Oestreicher<em> И соавт.</em> Показать нам, как изолировать магнитотактических бактерий из пресноводных образцов, и сосредоточиться бактерий на одном конце стеклянного капилляра. Магнитотактических бактерий могут быть визуализированы с помощью света и просвечивающей электронной микроскопии, а также использоваться для различных других анализов.

Abstract

In this issue, Oestreicher et al. show us how to isolate magnetotactic bacteria from freshwater samples, and concentrate the bacteria at one end of a glass capillary. The magnetotactic bacteria can then be visualized by light and transmission electron microscopy, and used for various other assays.

Also in the November 2012 issue, Boland et al. demonstrate how to reprogram fibroblasts into induced pluripotent stem cells (iPSCs), and how to isolate iPSC lines for injecting into tetraploid blastocysts, as demonstrated previously in JoVE. While mouth pipetting is generally not recommended because it can have adverse effects, this protocol requires the technique, executed carefully, to manipulate the embryos. This is one of the rare occasions when it’s actually OK to mouth pipet in the lab. If the induced cells are fully pluripotent, they can result in full-term mice derived completely from iPSCs.

In JoVE Neuroscience, Heermann and Krieglstein demonstrate a method for visualizing Schwann cell development along growing axons. To do this, our authors culture cervical ganglia explants onto collagen matrices, and treat the explants with nerve growth factor or other substances. The collagen gels can then be visualized using time-lapse imaging with fluorescence or bright-field microscopy, migrating along axons towards the periphery.

Also in JoVE Neuroscience, Hoffmann et al. put tiny headphones on songbirds to study how they use auditory feedback to adjust their singing. The authors demonstrate how to construct the headphones and attach them to the bird’s head; then, by adjusting the acoustic signal, they can study the computational and neurophysiological basis of vocal learning in birds.

In JoVE Clinical & Translational Medicine, Iyengar et al. use a zebrafish tumor model to study genes that can modify the pathogenesis of melanoma. This is done by first creating transgenic zebrafish that express a gene of interest. Various assays can then be performed to study how different genes affect melanoma, including onset, invasion, and transplantability.

In JoVE Bioengineering, Martin et al. demonstrate a gliding assay to measure the flexural rigidity of biopolymers (such as microtubules). By attaching motor proteins to a microscope slide, and adding fluorescently labeled microtubules, our authors can analyze the dynamics of cytoskeletal polymers.

This preview summarizes just a few notable video-articles in the November 2012 issue of JoVE. Stop by throughout the month of November to check out the full length versions of these articles and many more.

Protocol

Генерация Мыши, полученные из индуцированных плюрипотентных стволовых клеток Майкл Дж. Боланд 1, Jennifer L. Hazen 1, Кристофер Л. Nazor 1, Альберто Р. Родригеса 2, Грег Мартин 2, Сергей Куприянов 2, Кристин К. Болдуина 1 1 Dorris Центр Неврологии и Департамента клеточной биологии, Исследовательского института Скриппса, 2 Mouse генетики основной фонд, Исследовательского института Скриппса Создание индуцированных плюрипотентных стволовых клеток (ИПСК) линий производит линии различной потенциал развития даже тогда, когда они проходят стандартные тесты для плюрипотентности. Здесь мы опишем протокол для получения мышей полностью проистекает из ИПСК, которое определяет ИПСК линий, обладающих полным плюрипотентности 1. Анализируя МышиныеШванновских развития клеток Вместе Растущие аксоны Стефан Heermann 1, 2, Керстин Krieglstein 1, 3 1 Отдел молекулярной эмбриологии Института анатомии и клеточной биологии, Университет Фрайбурга, 2 отдела нейроанатомия, Гейдельбергский университет, 3 Фриас, Университет Фрайбурга Здесь мы опишем Шванновских клеток (СК) миграции тест, в котором SCs могут развиваться расширения аксонов. Легкий, наушники-администратора системы для управления Звуковая обратная связь в Певчие птицы Лукас А. Гофмана 1, 2, Конор W. Kelly 1, 3, David A. Nicholson 1, 2, Samuel J. Sober 1 1 Отдел биологии, Университет Эмори, 2 Neuroscience Graduate Program, Университет Эмори, 3 Progбарана в неврологии и поведенческой биологии университета Эмори Мы описываем проектирование и монтаж миниатюрные наушники подходят для замены природного слуховой обратной связи певчая птица с манипулировать звуковой сигнал. Интернет аппаратной обработки звука используется для манипулирования песни продукции, внедрению в режиме реального времени ошибки в слуховой обратной связи через наушники, и вести вокальное обучение двигателя. Скрининг на Меланома Модификаторы помощью рыбок данио автохтонные модели опухоли Sharanya Айенгара 1, Ярив Houvras 2, 3, Craig J. Ceol 1 1 Программа в области молекулярной медицины и кафедры биологии рака, Университет штата Массачусетс медицинской школы, 2 отделения хирургии и медицины, Weill Cornell Medical College, 3 отделов хирургии и медицины, Нью-Йорк пресвитерианской больницы <p claсс = "jove_content"> быстрый способ для выявления меланомы модификаторы помощью рыбок данио автохтонных модели опухоли представлены. Он использует miniCoopR вектор, который позволяет для выражения кандидата меланомы генов в меланоциты. Способ получения меланомы выживаемость без кривые, вторжение анализа, протокол для окрашивания антител масштаба меланоцитов и анализа меланомы трансплантации описаны. Жесткость на изгиб измерений биополимеров Использование Gliding Анализы Дуглас С. Мартин, Лу Юй, Брайан Л. Ван Hoozen Кафедра физики, Lawrence University Метод измерения длины сохранение или жесткость на изгиб биополимеров описано. Метод использует кинезин управляемые скольжением микротрубочек анализа экспериментально определить сохранением длины отдельных микротрубочек и адаптируется к актина на основе скользящих анализов. < / P> Сбор, выделение и обогащение природного происхождения магнитотактических бактерий из окружающей среды Zachery Oestreicher 1, Стивен К. Нижней 1, 2, Wei Lin 3, Brian H. ниже 2 1 Школа наук о Земле Университета штата Огайо, 2 школы по охране окружающей среды и природных ресурсов, Университет штата Огайо, 3 Институт геологии и геофизики Академии наук Китая Мы демонстрируем метод сбора магнитотактических бактерий (MTB), которые могут быть применены к природной воды. MTB могут быть выделены и обогащенный из проб донных осадков с помощью сравнительно простой установки, которая использует природный магнетизм бактерий. Изолированные MTB могут быть подробно рассмотрены, используя как световой и электронной микроскопии. 8 "> Transnuclear мышей с заранее определенными Т-клеточного рецептора Специфика против Toxoplasma гондий получить через SCNT Октай Kirak 1, Eva-Maria Frickel 1, Gijsbert М. Grotenbreg 1, 2, Heikyung Suh 1, Рудольф Jaenisch 1, 3, Hidde Л. Ploegh 1, 3 1, Уайтхед Институт медико-биологических исследований, 2 отделения микробиологии и биологических наук, Национальный университет Сингапура, 3 Отдел биологии, Массачусетский технологический институт Мы демонстрируем здесь, что эпигенетические перепрограммирование с помощью переноса ядер соматических клеток (SCNT) может быть использован в качестве инструмента для создания моделей мышей с заранее определенными Т-клеточный рецептор (TCR) особенностей. Эти transnuclear мышей выразить соответствующее TCR от их эндогенный локус под контролем эндогенного промотора.