Noviembre 2012: Este mes en la JoVE

Summary

En este número, Oestreicher<em> Et al.</em> Nos muestran cómo aislar bacterias magnetotácticas de muestras de agua dulce, y concentrar las bacterias en un extremo de un capilar de vidrio. Las bacterias magnetotácticas pueden ser entonces visualizadas por la luz y microscopía electrónica de transmisión, y se utiliza para diversos otros ensayos.

Abstract

En este problema, Oestreicher et al. Nos muestran cómo aislar bacterias magnetotácticas de muestras de agua dulce, y concentrar las bacterias en un extremo de un capilar de vidrio. Las bacterias magnetotácticas pueden ser entonces visualizadas por la luz y microscopía electrónica de transmisión, y se utiliza para diversos otros ensayos.

También en la edición de noviembre de 2012, Boland et al. Demuestran cómo reprogramar fibroblastos en células madre pluripotentes inducidas (iPS), y cómo aislar las líneas de IPSC para la inyección en blastocistos tetraploides, como se demostró anteriormente en Jove . Mientras pipetear con la boca generalmente no se recomienda ya que puede tener efectos adversos, este protocolo requiere la técnica, ejecutados cuidadosamente, para manipular los embriones. Esta es una de las raras ocasiones en las que es realmente Aceptar para pipeta de boca en el laboratorio. Si las células inducidas unavolver completamente pluripotentes, que pueden resultar en término completo ratones derivados completamente de iPSCs.

En JoVE Neuroscience, Heermann y Krieglstein demostrar un método para visualizar el desarrollo de células de Schwann a lo largo de los axones en crecimiento. Para ello, nuestros explantes de ganglios cervicales cultura autores en matrices de colágeno, y el tratamiento de los explantes con el factor de crecimiento del nervio o de otras sustancias. Los geles de colágeno pueden ser entonces visualizadas usando imágenes a intervalos de tiempo con microscopía de fluorescencia o de campo brillante, la migración a lo largo de los axones hacia la periferia.

También en JoVE Neuroscience, Hoffmann et al. Poner auriculares diminutos pájaros cantores en estudiar cómo utilizan la retroalimentación auditiva para ajustar su canto. Los autores demuestran cómo construir los auriculares y adjuntarlas a la cabeza del ave, y luego, mediante el ajuste de la señal acústica, pueden estudiar la base de cálculo y neurofisiológica del aprendizaje vocal en las aves.

En JoVE ClínicaY Medicina traslacional, Iyengar et al. Usar un modelo de tumor de pez cebra para estudiar los genes que pueden modificar la patogénesis del melanoma. Esto se realiza por primera creación de pez cebra transgénico que expresan un gen de interés. Diversos ensayos a continuación, se puede realizar para estudiar cómo afectan diferentes genes melanoma, que incluye el inicio, la invasión y transplantability.

En Bioingeniería JoVE, Martin et al. Demostrar un ensayo de deslizamiento para medir la rigidez a la flexión de biopolímeros (tales como microtúbulos). Al unirse las proteínas motoras a un portaobjetos de microscopio, y la adición de los microtúbulos marcados con fluorescencia, nuestros autores pueden analizar la dinámica de polímeros del citoesqueleto.

Esta vista previa resume tan sólo unos pocos notables en video artículos en el 11 2012 cuestión de Jove. Pase por todo el mes de noviembre para revisar las versiones de larga duración de estos artículos y muchos más.

Protocol

Generación de ratones derivados de células madre pluripotentes inducidas Michael J. Boland 1, Jennifer L. Hazen 1, Kristopher L. Nazor 1, Alberto R. Rodriguez 2, Greg Martin 2, Sergey Kupriyanov 2, Kristin K. Baldwin 1 1 Dorris Centro de Neurociencias y del Departamento de Biología Celular, The Scripps Research Institute, 2 Mouse facilidad de la base genética, The Scripps Research Institute Generación de células madre pluripotentes inducidas (IPSC) Líneas produce líneas con diferente potencial de desarrollo aún cuando pasan las pruebas estándar de pluripotencia. Aquí se describe un protocolo para producir ratones totalmente derivadas de iPS, que define las líneas de IPSC como poseedores completo pluripotencia 1. Analizando murinoA lo largo de la célula de Schwann Desarrollo axones en crecimiento Stephan Heermann 1, 2, Kerstin Krieglstein 1, 3 1 Departamento de Embriología Molecular, Instituto de Anatomía y Biología Celular de la Universidad de Friburgo, 2 Departamento de Neuroanatomía de la Universidad de Heidelberg, 3 FRIAS, de la Universidad de Friburgo Aquí se describe una célula de Schwann (CS) ensayo de migración en el que las SC son capaces de desarrollar a lo largo de los axones se extienden. Un peso ligero, Auriculares basada Sistema de Manipulación de retroalimentación auditiva en Songbirds Lukas A. Hoffmann 1, 2, Conor W. Kelly 1, 3, David A. Nicholson 1, 2, Samuel J. Sober 1 1 Departamento de Biología de la Universidad de Emory, 2 Neurociencias Programa de Postgrado, Universidad de Emory, 3 Progcarnero en Neurociencia y Biología del Comportamiento, Universidad de Emory Se describe el diseño y montaje de los auriculares miniaturizados adecuados para la sustitución de retroalimentación auditiva natural de un pájaro cantor con una señal acústica manipulado. Online hardware de procesamiento de sonido se utiliza para manipular la salida canción, introducir en tiempo real de los errores en la retroalimentación auditiva a través de los auriculares, e impulsar el aprendizaje motor vocal. La detección de Modificadores melanoma utilizando un modelo de pez cebra Tumor autóctona Sharanya Iyengar 1, Yariv Houvras 2, 3, Craig J. Ceol 1 1 Programa de Medicina Molecular y el Departamento de Biología del Cáncer de la Universidad de Massachusetts Medical School, 2 Departamentos de Cirugía y Medicina, Weill Cornell Medical College, 3 Departamentos de Cirugía y Medicina, New York Presbyterian Hospital <p class = "jove_content"> Una forma rápida para detectar modificadores de melanoma mediante un modelo de pez cebra tumor autóctona se presenta. Se aprovecha de la miniCoopR vector que permite la expresión de los genes candidatos de melanoma en los melanocitos. Un método para obtener gratis melanoma curvas de supervivencia, un ensayo de invasión, un protocolo para la tinción de anticuerpos de los melanocitos de escala y un ensayo de trasplante de melanoma se describen. Medidas de flexión rigidez de biopolímeros utilizando ensayos de Vuelo a Vela Douglas S. Martin, Lu Yu, Brian L. Van Hoozen Departamento de Física de la Universidad de Lawrence Un método para medir la longitud de persistencia o rigidez a la flexión de los biopolímeros se describe. El método utiliza una quinesina impulsado por microtúbulos ensayo de deslizamiento para determinar experimentalmente la longitud de persistencia de los microtúbulos individuales y es adaptable a actina ensayos basados ​​en deslizamiento. < / P> Recolección, aislamiento y enriquecimiento de bacterias naturales magnetotácticas del Medio Ambiente Zachery Oestreicher 1, Steven K. inferior 1, 2, 3 Wei Lin, Brian H. Baja 2 1 Facultad de Ciencias de la Tierra, The Ohio State University, 2 Escuela de Recursos Naturales y Medio Ambiente, The Ohio State University, 3 Instituto de Geología y Geofísica de la Academia China de Ciencias Se demuestra un método para recoger las bacterias magnetotácticas (MTB) que se pueden aplicar para aguas naturales. MTB puede ser aislado y enriquecido a partir de muestras de sedimento utilizando una configuración relativamente simple que toma ventaja de magnetismo de la bacteria natural. Aislado MTB pueden examinarse en detalle utilizando la luz y microscopía electrónica. 8 "> Ratones con Transnuclear predefinidos Especificidades del receptor de las células T contra Toxoplasma gondii obtenidos a través de SCNT Oktay Kirak 1, Eva-Maria Frickel 1, Gijsbert M. Grotenbreg 1, 2, Heikyung Suh 1, Rudolf Jaenisch 1, 3, Hidde L. Ploegh 1, 3 1, Whitehead Institute for Biomedical Research, 2 Departamentos de Microbiología y Ciencias Biológicas de la Universidad Nacional de Singapur, 3 Departamento de Biología, Instituto de Tecnología de Massachusetts Se demuestra aquí que la reprogramación epigenética mediante transferencia nuclear de células somáticas (SCNT) puede ser utilizado como una herramienta para generar modelos de ratón con predefinida receptor de células T (TCR) especificidades. Estos ratones Transnuclear expresar el TCR correspondiente de su locus endógeno bajo el control del promotor endógeno.