Journal
/
Biology
/
Очистки белков-Free метод привязки Определение Affinity по Микромасштабные Термофорез
JoVE Journal
Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Biology
Protein Purification-free Method of Binding Affinity Determination by Microscale Thermophoresis
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

Очистки белков-Free метод привязки Определение Affinity по Микромасштабные Термофорез

DOI:
10.3791/50541-v

•

10:22 min

•

August 15, 2013

•

, , , , , ,
1Cancer and Inflammation Program,National Cancer Institute, 2Basic Science Program,SAIC-Frederick, Inc., 3Departments of Oncology and Radiation Medicine,Georgetown University Medical Center, 4Structural Biophysics Laboratory,National Cancer Institute

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:43Preparation of Cell Lysate
  • 03:20Determination of Optimal Lysate Dilution
  • 04:02Microscale Thermophoresis Binding Studies
  • 07:05Microscale Thermophoresis Data Analysis
  • 08:25Results: Measuring the Affinity of Non-phosphorylated STAT3 Protein Binding to Oligonucleotides
  • 09:40Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Микромасштабные термофореза (MST) могут быть широко использованы для определения аффинности связывания без очистки целевого белка из клеточных лизатов. Протокол включает сверхэкспрессии GFP-слитый белок, лизис клеток в неденатурирующих условиях, и обнаружение MST сигнала в присутствии различных концентраций лиганда.

Tags

Protein PurificationMicroscale ThermophoresisBinding AffinityKD DeterminationGFP-fused ProteinSTAT3Cell LysateNon-denaturing ConditionsDrug DiscoveryProtein Interactions

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

check_url/50541?article_type=v

Микрообъеме концентрации белка Определение использованием NanoDrop 2000c Спектрофотометр
check_url/50541?article_type=v

Важность правильной концентрации белка для кинетики и Affinity Определение в структурно-функционального анализа
check_url/50541?article_type=v

Выделение лабильной Multi-белковые комплексы по В естественных условиях Контролируемые Сотовая сшивания и иммуно-магнитного аффинной хроматографии
check_url/50541?article_type=v

PAR-Clip - метод идентификации транскриптома всей места связывания РНК-связывающие белки
check_url/50541?article_type=v

Липидов везикул-опосредованной аффинной хроматографии с использованием магнитных Активированный сортировки клеток (LIMACS): новый метод для анализа Белково-липидные взаимодействия
check_url/50541?article_type=v

Ортогональные очистки белков Ведущий: Малый Биспецифичные тегов Affinity
check_url/50541?article_type=v

Идентификация белка взаимодействие партнеров, используя тандем аффинной очистки
check_url/50541?article_type=v

В режиме реального времени Анализы транспорта ретинола на мембранный рецептор плазменных Retinol Binding Protein
check_url/50541?article_type=v

Чувствительностью и специфичностью Количественный метод определения Сыворотка Сердечная Миозина связывающий белок-C по электрохемилюминесценцию иммуноферментного
check_url/50541?article_type=v

Определение белок-белковых взаимодействие в<em> Дрозофилы</em> Взрослые Главы по Tandem аффинной очистки (TAP)

Read Article