طرق جمع الحليب لالفئران وريفز 'Muntjac الغزلان
Summary
Milk collection from animal models facilitates various research avenues: understanding passive immunity, identifying pathogens responsible for vertical transmission and, through the use of transgenic mice, even commercial production of proteins found in human breast milk. Here we illustrate a simple method for milk collection in mice and Reeves’ muntjac deer.
Abstract
Animal models are commonly used throughout research laboratories to accomplish what would normally be considered impractical in a pathogen’s native host. Milk collection from animals allows scientists the opportunity to study many aspects of reproduction including vertical transmission, passive immunity, mammary gland biology, and lactation. Obtaining adequate volumes of milk for these studies is a challenging task, especially from small animal models. Here we illustrate an inexpensive and facile method for milk collection in mice and Reeves’ muntjac deer that does not require specialized equipment or extensive training. This particular method requires two researchers: one to express the milk and to stabilize the animal, and one to collect the milk in an appropriate container from either a Muntjac or mouse model. The mouse model also requires the use of a P-200 pipetman and corresponding pipette tips. While this method is low cost and relatively easy to perform, researchers should be advised that anesthetizing the animal is required for optimal milk collection.
Introduction
النماذج الحيوانية توفير نظرة ثاقبة علم الأمراض التي لا يمكن الحصول عليها في المختبر عن طريق التحليل. لتوفير النتائج الأكثر فعالية، فمن المهم استخدام نموذج الحيوان الذي يرتبط ارتباطا وثيقا لهذا المرض وأنواع من الفائدة. على سبيل المثال، muntjac في ريفز '(Muntiacus reevesi)، والغزلان الصغيرة الآسيوية 1،2، والفئران المعدلة وراثيا التعبير عن بروتين بريون cervid (CerTgPrP) 3 هي نماذج حيوانية مفيدة لأنواع cervid. كلا النوعين هي متعدد الودق، مما يسمح للتربية على مدار السنة، وبالتالي مصدر ثابت للأنسجة المرتبطة بالحمل والسوائل لدراسة آليات محددة في cervid علم الأحياء. دراسات من الحليب لديها مجموعة واسعة من التطبيقات التي هي ببساطة أكثر (وغير مكلفة) أنجزت في النماذج الحيوانية من في البشر. يمكن الباحثين التحقيق الحليب واللبأ بوصفها مصدرا محتملا لل1) انتقال الأمراض المعدية، 2) المناعية المنقولة من الأم إلى الأبناء في development الحصانة السلبي 4 و 3) اللاكتوفيرين، وهو البروتين الموجود في حليب الثدي البشري المشاركة في الحصانة السلبي أن الباحثين يحاولون حاليا لإنتاج تجاريا 5.
يمكن جمع كمية كبيرة من الحليب من الحيوانات الصغيرة أن يكون مهمة صعبة. اقترح روجرز نهجا لجمع الحليب من الفئران 6، والذي تم استخدامه في وقت لاحق في الفئران. DePeters وهوفي المقترحة طريقتين لجمع الحليب، واحد باستخدام فراغ إنشاؤها يدويا التي تنتجها لمبة المطاط تعلق على ماصة ماصة باستور، والثانية تتطلب بناء وحدة الحلب، والتي يتم بعد ذلك تعلق على مصدر فراغ (مثل كما صنبور) لحصاد الحليب الماوس 7. ونحن هنا نقترح لذلك، طريقة منخفضة التكلفة بسيطة لجمع الحليب من كلا الفئران وريفز 'muntjac الغزلان، الأمر الذي يتطلب معدات المختبرات فقط متاحة بسهولة والمهارات التقنية الأساسية. أسلوبنا ينتج كميات كافية من الحليب لمختلفالتطبيقات.
Protocol
Representative Results
Discussion
فأر
هناك العديد من العوامل التي تأخذ بعين الاعتبار عند جمع الحليب من ماوس، بما في ذلك 1) كمية من الوقت المخصص لجمع، 2) جرعة من الأوكسيتوسين تدار، 3) كم عدد الجراء السد حاليا التمريض و4) مبلغ الفترة الزمنية التي مرت منذ الولا?…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
These experiments were funded by the NIH grant #RAI093634A. We express immense gratitude to Jenny Powers, DVM, PhD, for her assistance in muntjac milking.
Materials
| Materials-Mouse | |||
| Name of Material/Reagent | Vendor | Catalog Number | Comments |
| Ketamine (KetaVed 100 mg/mL) (dose: 80-100 mg/kg) | MWI/Vedco | 011075 | |
| Xylazine (TranquiVed 100 mg/ml) (dose:5-10 mg/kg) | MWI/Vedco | NADA 139236 | |
| Eye lubricant | MWI/Apexa | 701013 | |
| Oxytocin (2 IU/kg) | Vet One | 501013 | |
| Materials- Muntjac | |||
| Name of Material/Reagent | Vendor | Catalog Number | Comments |
| Midazolam (1-2 mg/kg) | Amerisource Bergen Drug Corp | 924326 | optional: researcher can either use Midazolam on its own or BAM combination as an anesthetic |
| Butorphanol tartrate (Torbugesic) (0.45 mg/kg) | Fort Dodge Animal Health | NADA 135-780 | |
| Azaperone tartrate (0.25 mg/kg) | ZooPharm | ||
| Medetomadine HCl (0.07 mg/kg) | ZooPharm | ||
| Antipamezol hydrochloride (Antisedan) (dose: 0.25 mg/kg) | Orion Corporation | NADA 141-033 | |
| Oxytocin (10 IU/kg) | Vet One | 501013 | |
| Equipment- Mouse | |||
| Name of Equipment | Vendor | Catalog Number | Comments |
| P-200 Pipetman | Gilson | F123601 | |
| 200 μL pipette tips | Light Labs | B-2004-SH | |
| 1 ml syringes | MWI | 005427 | |
| 27 gauge needles | MWI | 002031 | |
| Equipment- Muntjac | |||
| Name of Equipment | Vendor | Catalog Number | Comments |
| 15 ml conical tubes | VWR | 21008-918 | |
| 22 gauge needles | MWI | 873 | |
| 3 ml luer lock syringes | MWI | 001377 |
Riferimenti
- Dueling, S. . Muntiacus reevesi. Animal Diversity Web. , (2004).
- Pei, K., Taber, R., O’Gara, B., Wang, Y. Breeding cycle of the Formosan Reeves muntjac (Muntiacus reevesi micrurus) in northern Taiwan, Republic of China. Mammalia. 59 (2), 223-228 (1995).
- Browning, S. R. Transmission of prions from mule deer and elk with chronic wasting disease to transgenic mice expressing cervid PrP. J. Virol. 78 (23), 13345-13350 (2004).
- Van de perre, P. Transfer of antibody via mother’s milk. Vaccine. 21 (24), 3374-3376 (2003).
- Maden, C. Genetically modified mice produce human milk protein. BioNews. , (2009).
- Rodgers, C. T. Practical aspects of milk collection in the rat. Lab. Anim. 29 (4), 450-455 (1995).
- Depeters, E. J., Hovey, R. C. Methods for collecting milk from mice. J. Mammary Gland Biol. Neoplasia. 14 (4), 397-400 (2009).
- Knight, C. H., Maltz, E., Docherty, A. H. Milk yield and composition in mice: effects of litter size and lactation. 84 (1), 127-133 (1986).
- Hedrich, H. J., Bullock, G. R. The laboratory mouse. , 735-736 (2004).
- Nishimori, K., Young, L. J., Guo, Q., Wang, Z., Insel, T. R., Matzuk, M. M. Oxytocin is required for nursing but is not essential for parturition or reproductive behavior. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 93 (21), 11699-11704 (1996).
- Miller, B. F., Osborn, D. A., Lance, W. R., Howze, M. M., Warren, R. J., Miller, K. V. Butorphanol-azaperone-medetomidine for immobilization of captive white-tailed deer. 45 (2), 457-467 (2009).
