Summary

Bouw van een betaalbare en makkelijk te bouwen zebravis Facility

Published: November 22, 2014
doi:

Summary

A Zebrafish facility suitable for breeding and in vivo research is built in an easy and affordable manner. Maintenance is minimal. This facility is ideal for student involvement and independent research.

Abstract

In vivo biomedisch onderzoek is cruciaal om te vertalen in vitro bevindingen naar klinische vooruitgang. Kleine academische instellingen met beperkte middelen vinden het vrijwel onmogelijk om te bouwen en typische knaagdieren faciliteiten voor onderzoek te blijven. Zebravis onderzoek is aangetoond een waardevol alternatief voor in vivo onderzoek farmacologie, fysiologie, ontwikkeling en genetische studies. Dit artikel toont aan dat een functionele zebravis faciliteit kan worden gebouwd in een eenvoudige en betaalbare manier. We tonen aan dat een dergelijke voorziening kan worden gebouwd rond een werkdag met minimale hulpmiddelen en expertise. De kosten van de 27 1.8 L aquarium zebravis faciliteit gebouwd in deze studie was ongeveer $ 1500. We schatten dat het onderhoud van een eerste werkende 150 vis kolonie gedurende 3 maanden is $ 1.000. Dit project betrokken studenten, die werden ingevoerd om aquaculturing van zebravissen voor onderzoek voorstelt.

Introduction

In vivo modellen zijn essentieel in het uitvoeren van uitgebreide biomedisch onderzoek, omdat zij toestaan ​​dat in vitro onderzoek worden vertaald op het systeem en organismaal niveau. Bijvoorbeeld heeft onderzoek met kleine zoogdieren, namelijk knaagdieren, zijn noodzakelijk gebleken bij de ontwikkeling van geneesmiddelen en de verbetering van de beschikbare geneesmiddelen. Het is echter mogelijk de complexiteit (financieel en logistiek) maken het vrijwel onmogelijk om te bouwen en te onderhouden knaagdieren faciliteiten voor experimenten stelt bij kleine onderzoek academische instellingen. Toch kunnen in vivo onderzoek worden uitgevoerd op andere diersoorten die minder uitgebreid logistiek vereisen. Zebravis (Danio rerio) zijn met succes gebruikt als een in vivo model genetica, ontwikkeling, pathofysiologie en farmacologie 1,2,10,11,12 bestuderen. De voor zebravis experimenteren huis faciliteiten zijn relatief eenvoudig en aanzienlijk goedkoper in vergelijking met rOdent faciliteiten. Kim et al. 3 onlangs beschreven een 80 tank zebravis behuizing dat kan worden gebouwd voor ongeveer $ 1500, welke beide delen en arbeidskosten omvat. Dit staat in schril contrast met de bijna $ 8500 die nodig zou zijn om een ​​kant en klare, 80 tanksysteem kopen bij een aantal commerciële leveranciers. Echter, de beschrijving door Kim et al. kan ingewikkeld en moeilijk te volgen voor beginners vis onderzoek. Wij geloven dat een zebravis faciliteit in vereenvoudigde manier kan worden geconstrueerd voor een investering van $ 1.500.

De oprichting van een in vivo faciliteit in kleine academische instellingen biedt hun faculteiten een extra instrument om krachtiger en grondig onderzoek te leveren. In vitro gegevens ondersteund door in vivo resultaten produceren in het algemeen uitgebreider biomedisch onderzoek dan gegevens die zijn verkregen met behulp van alleen in vitro benaderingen. Daarom is deuitvoering van een in vivo onderzoek faciliteit zal een aanzienlijke verbetering van de instelling succes in haar algemene onderzoek inspanningen (blootstelling student aan onderzoek, publicaties, communicatie, de uitoefening van externe financiering, enz.).

De bouw van een zebravis faciliteit zoals die in deze studie beschreven is ideaal voor onderzoek academische instellingen met beperkte faciliteiten (of instellingen zonder in vivo onderzoeksfaciliteiten) tijdens vernauwen financiële tijden.

Protocol

LET OP: Deze protocollen volgen de richtlijnen van IACUC van Presbyterian College. 1. Acquire Materialen Vermeld in tabel 1. 2. Zet de 5 Shelf Chrome Volgens instructies van de fabrikant. Dit wordt gebruikt om de faciliteit huis. 3. Construct het waterreservoir en de filtratie-systeem (de figuren 1A en 2). Met behulp van Figuur 1A als een gids, lay-out van de 18 liter emmer, pomp, filters en UV-lamp tot de uite…

Representative Results

De bouw van de pomp en flters System Zodra de tandheugel is gemonteerd en ingesteld als eerste stap de pomp en filter te bouwen. De filters zijn aangesloten op de pompinstallatie en bevinden zich boven het onderste niveau van de eerste plank, waarmee eenvoudig filter onderhoud en vervanging. Evenzo wordt de UV-lamp verbonden met PVC pijp aan het filter en plaats gehouden met plastic draad banden zorgen voor een gemakkelijke vervanging van de UV-lamp als nodig is (figuur 4A). Onmiddellijk…

Discussion

Het belangrijkste doel van dit artikel is om aan te tonen dat de bouw van een functionele zebravis faciliteit is niet ingewikkeld en kan worden gebouwd door beginnende vis onderzoekers met minimale constructie van kennis. Bovendien is dit artikel laat zien dat het materiaal voor dit functionele zebravis faciliteit gemakkelijk en betaalbaar kan worden verkregen van de plaatselijke huisdier aanbod winkels of bouwmarkten. Zodra alle materialen en gereedschappen zijn verworven met de bouw van het systeem en de vis tanks duu…

Divulgazioni

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

De auteurs willen graag naar het Bureau voor Onderzoek van de Presbyterian College School of Pharmacy bedanken voor de financiële ondersteuning van dit project via de Kleine Apotheek Awards for Research & Collaboration (SPARC) Award. De auteurs danken de heer John Smink, Manager van de Aquatic Animal Research Laboratory, Clemson University, Clemson, SC voor zijn technische bijstand manuscript revisie.

Materials

Item Brand Quantity
74-in H x 48-in W x 18-in D 5-shelf Steel Freestanding Shelving Unit Style Selections 1
18-Gallon General Bucket/Tote Centrex Plastics: LLC Rugged Tote 1
6-Outlet Power Strip With 15-Ft. Cord Master Electrician 1
9-Watt UV Water Garden Clarifier FiIter and UV lamp Smartpond  1
Whole House Water Replacement Filter Whirlpool 6
Opaque Whole-House Pre-Filtration Housing Whirlpool 2
Thread Seal Tape William H Harvey 1
8-fl oz LO-VOC PVC Cement Oatey  1
8-fl oz LO-VOC Primer Oatey  1
1/4-in x 100-ft Vinyl Drip Irrigation Distribution Tubing Mister Landscaper  1
1/4-in Barbed Drip Irrigation On/Off Valve Mister Landscaper 33
9-Port NPT Irrigation Manifold with Filter  Mister Landscaper 6
Drop-In Filter with House  Whirlpool 6
2-in Dia 90-Degree PVC Elbow LASCO 3
2-in Dia 90-Degree Tee LASCO 3
3/4-in Dia 90-Degree Slip Elbow LASCO 15
3/4-in Dia PVC Adapter LASCO 7
3/4-in Dia PVC Tee LASCO 12
2-in Dia PVC Cap LASCO 3
1-in Dia x 3/4-in Dia PVC Adapter LASCO 2
3/4-in PVC Socket In-Line Ball Valve American Valve 5
1/2-in Dia x 3/4-in Dia PVC Adapter Lasco 8
3/4-in Dia PVC Cap Lasco 1
2-In x 5-Ft Pvc Pipe Charlotte Pipe 4
¾-In x 10-Ft Pvc pipe Charlotte Pipe 3
11/16×1-7/80 PVC ring SXT 10
½” PVC male adapter SXT 1
¾” PVC coupling  SXT 1
½” PVC female adapter  SXT 1
link
1.8 L Dual Beta Keeper Top Fin 27
¾” PVC male adapter (w/ #18 O-ring) SXT 28
90-degree ¾” threaded PVC elbow SXT 27
Fine Mesh N/A 1 yard
Bulkhead Connector N/A 1
Hacksaw N/A 1
Drill N/A 1
Hole saw N/A 1
Adjustable Wrench N/A 1
Pliers  N/A 1
Tape Measure N/A 1
Safety Glasses N/A 1
Work Gloves N/A 1

Riferimenti

  1. Detrich, H., Westerfield, M., Zon, L. . The Zebrafish: Cellular and Developmental Biology, Part A.. , (2010).
  2. Grim, J. M., et al. Hemogen (hemgn), a transcription factor that regulates erythropoiesis and skeletogenesis in zebrafish. , (2013).
  3. Kim, S., Carlson, R., Zafreen, L., Rajpurohit, S. K., Jagadeeswaran, P. Modular, easy-to-assemble, low-cost facility. Zebrafish. 6 (3), 269-274 (2009).
  4. Linbo, T. L. Zebrafish (Danio rerio) husbandry and colony maintenance at the Northwest Fisheries Science Center. U.S. Dept. Commer., NOAA Tech. Memo. 62, (2009).
  5. Avdesh, A., et al. Regular care and maintenance of a zebrafish (Danio rerio) laboratory: an introduction. J Vis Exp. 69, 4196 (2012).
  6. McNabb, A., Scott, K., Ochsenstein, E., Seufert, K., Carl, M. Don’t be afraid to set up your fish facility. Zebrafish. 9 (3), 120-125 (2012).
  7. Garcia, R. L., Sanders, G. E. Efficacy of cleaning and disinfection procedures in a zebrafish rerio) facility. J Am Assoc Lab Anim Sci. 50 (6), 895-900 (2011).
  8. Rivas-Boyero, A. A., et al. Pharmacological characterization of a nociceptin receptor from zebrafish (Danio rerio). J Mol Endocrinol. 46 (2), 111-123 (2011).
  9. Sanchez-Simon, F. M., Zhang, X. X., Loh, H. H., Law, P. Y., Rodriguez, R. E. Morphine regulates dopaminergic neuron differentiation via miR-133b. Mol Pharmacol. 78 (5), 935-942 (2010).
  10. Velasco, E. M., Law, P. Y., Rodríguez, R. E. Mu opioid from the zebrafish exhibits functional characteristics as those of mammalian mu opioid receptor. Zebrafish. 6 (3), 259-268 (2009).
check_url/it/51989?article_type=t

Play Video

Citazione di questo articolo
Paige, C., Hill, B., Canterbury, J., Sweitzer, S., Romero-Sandoval, E. A. Construction of an Affordable and Easy-to-Build Zebrafish Facility. J. Vis. Exp. (93), e51989, doi:10.3791/51989 (2014).

View Video