Telemetria intrauterina misurare mouse contrattile Pressione<em> In Vivo</em
Summary
This manuscript provides a protocol for implanting telemeters in the mouse for the purpose of measuring intrauterine pressures during pregnancy.
Abstract
È necessaria una complessa integrazione dei segnali molecolari ed elettriche per trasformare un utero quiescente in un organo contrattile alla fine della gravidanza. Nonostante la scoperta dei regolatori chiave della contrattilità uterina, questo processo non è ancora pienamente compreso. Topi transgenici forniscono un modello ideale in cui studiare il parto. In precedenza, l'unico metodo per studiare contrattilità uterina nel topo era ex vivo registrazioni tensione isometrica, che sono non ottimale per diverse ragioni. L'utero deve essere rimossa dal suo ambiente fisiologico, un corso di tempo limitato di indagine è possibile, e topi deve essere sacrificato. Il recente sviluppo di telemetria radiometrica ha permesso longitudinali, misure in tempo reale di in vivo pressione intrauterina nei topi. Qui, l'impianto di un telemetro intrauterina per misurare le variazioni di pressione in utero del mouse da metà della gravidanza fino al parto è descritto. Con differenze confronto a stampaUres tra wild type e topi transgenici, l'impatto fisiologico di un gene di interesse possono essere chiarite. Questa tecnica dovrebbe accelerare lo sviluppo di terapie usati per trattare disturbi miometriale durante la gravidanza, tra cui parto pretermine.
Introduction
Nascita pretermine è la principale causa di morbilità e mortalità nei paesi sviluppati perinatale; è responsabile del 50% di morbilità perinatale e il 75% di 1,2 mortalità perinatale. Parto pretermine è multiforme e può essere idiopatica. Anche se gran parte della ricerca è emerso sui percorsi molecolari ed elettrici trasformando miometrio da un tessuto quiescente in un contrattile una, la fisiopatologia esatto di parto pretermine rimane elusiva. Endocrine, infiammatorie, e regolazione genica sono stati collegati al parto pretermine 3,4. Tuttavia, le preoccupazioni etiche limitano la capacità di condurre una ricerca sui meccanismi di parto pretermine negli esseri umani.
Date queste limitazioni, molti ricercatori si sono rivolti a topi come sistema modello con cui studiare la fisiologia del parto. I topi hanno brevi gestazioni durata circa tre settimane e può essere facilmente manipolato geneticamente. Inoltre, più modelli genetici di topo hannostato sviluppato per determinare le vie di segnalazione che sono essenziali per il lavoro 5. Nonostante le differenze principali tra il mouse e il parto umano, i topi e gli esseri umani condividono molti degli stessi meccanismi che sono essenziali per il lavoro, tra cui l'infiammazione e infezione intrauterina 6. Così, i topi servire come uno strumento prezioso per l'esame dell'attività uterina. Ad oggi, il gold standard per misurare la contrattilità uterina nei topi è stato ex vivo registrazioni tensione isometrica; Tuttavia, questo è limitato ad un punto di tempo gestazionale per esperimento e richiede la rimozione dell'utero dal suo ambiente fisiologico. Un altro fattore importante è il numero di animali necessari per queste indagini. Infine, questa metodologia non consente studi longitudinali che esaminano l'induzione del travaglio pretermine e fisiopatologia.
I recenti progressi compiuti in dispositivi di telemetria radiometriche utilizzate per studiare la pressione arteriosa modifiche 7 nei topi e intpressione rauterine in ratti 8 pregò la questione se la stessa tecnologia potrebbe essere utilizzata per studiare variazioni della pressione intrauterina nei topi durante la gravidanza. Dopo la risoluzione dei problemi iniziali, un metodo è stato sviluppato con successo per misurare l'induzione del lavoro e la progressione in un mouse. Questo approccio in vivo può misurare la transizione dallo stato di bassa pressione dell'utero riposo allo stato di alta pressione indicativo di contrazioni del lavoro forti. Questo metodo è stato anche in grado di rilevare le differenze di pressione significative tra topi transgenici con il parto compromessa e topi wild type, dimostrando l'impatto fisiologico dell'espressione genica 9. Questo protocollo fornisce in tempo reale, di modo vivo per studiare pressione topo uterina durante la gravidanza.
Protocol
Representative Results
Discussion
Le indagini della contrattilità miometriale hanno invocato ex vivo misurazioni di tensione muscolare. Questa metodologia può essere utile per i test in fase precoce di farmaci uterotonico nuovo sviluppo che non possono essere somministrati agli animali vivi. Tuttavia, gli approcci in vivo sono necessari per comprendere longitudinalmente la progressione del lavoro. Le misurazioni in vivo servono diversi scopi. In primo luogo, essi consentono cattura di un quadro completo delle variazioni uter…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
This work was supported by funding from the March of Dimes FY12-133 (S.K.E.) and the National Institutes of Health R01HD037831 (S.K.E.). We would like to thank Dr. Deborah Frank for critical review of the manuscript.
Materials
| Name of Material/ Equipment | Company | Catalog Number | Comments/Description |
| Surgical Glue | 3M Vetbond | 1469SB | Tissue Adhesive–stored in Drierite |
| Absorbable 6-0 Sutures | Ethicon | J212H | Vicryl |
| Non-absorbable 6-0 Sutures | Ethicon | 8706H | Prolene |
| Water Jacket Blanket + Heating Pad | Gaymer | T/Pump PN 11184-000 Blanket-66N111CC | Specialized for rodents |
| Bead sterilizer | Keller | Z378577 | Steri 250 Sterilizer |
| Disecting Microscope | Nikon | SMZ754 | Fibre optic gooseneck external light source |
| Sterile Surgical Gloves–Latex | Cardinal Health Triflex | 2D7253 | |
| PhysioTel PA-C10 Pressure Transmitter | Data Sciences International | 270-0135-001 | TA11PA-C10 |
| Telemeter Reciever | Data Sciences International | 272-6001-001 | RPC-1 |
| Dataquest ART 4.3.2 Analysis Platinum | Data Sciences International | 271-0147-141 | Analysis software |
| Diet Recovery Gel | Clear H2O | 72-01-5022 | Purified Soft Diet for Rodents |
| Tergazyme | Sigma-Aldrich | Z273287 | Enzyme detergent |
Riferimenti
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