쥐 허혈성 피부 상처 모델의 데모
Summary
쥐가 크기 때문에, 가용성, 오히려 유순 한 행동에, 몇 년 동안 연구 모델로 이용되고있다. 이 프로토콜의 목적은 만성 상처의 병태 생리에 대한 통찰력을 제공하는 허혈성 상처 치유 피부 모델로서 쥐를 이용하는 것이다.
Abstract
인간의 만성 상처에 대한 성향 등으로 인해 부동에 당뇨병과 장애인 심혈관 기능 및 누그러 압력 노화, 질병 상태에 따라 증가한다. 동물 모델은 만성 상처의 복잡성의 이해를 발전하기위한 목적으로 이러한 조건을 모방하는 것을 시도 개발되었다. 본 명세서에 기재된 모델은 허혈성되고 만성 상처 표현형 (혈관 감소, 염증 및 지연 증가 상처 봉합)을 닮은 상처 발생 혈류 감소 연장을 허용 래트 피변 허혈 모델이다. 그것은 컨트롤 등의 플랩 측 방향의 중앙 배치의 2 허혈성 상처와이 비 허혈성 상처와 bipedicled 등의 플랩으로 구성되어 있습니다. 이 피변 허혈 모델 신규 추가 배리어 및 혈관 재 형성을 방지 및 상처 치유로 수축을 감소시키기 부목로서 기능 플랩 아래에 실리콘 시트의 배치이다. 에도 불구하고때문에 사람에 비해 자신의 매우 독특한 해부학 및 생리 학적 차이에 대한 연구를 상처 치유에 대한 쥐를 사용하는 논쟁 (즉, panniculus의 카르노 서스 근육, 짧은 수명의 존재, 모낭의 수가 증가하고, 감염된 상처를 치유 할 수있는 능력) 이 모델에 사용 된 수정은 이전에 개발 된 허혈성 피부 플랩 모델에 귀중한 대체합니다.
Introduction
효과적인 약물 개발 및 다른 상처 치유 치료제는 인간의 치료 1 동물 모델에서 연구 결과를 번역하는 알려진 문제점에도 불구하고, 생체 내 모델에서 적절한 필요합니다. 다음은 병리 기전 상처 치유의 추가적인 이해를 조사하는 허혈성 피부 상처 치유 쥐 모델의 사용을위한 프로토콜의 상세한 설명이다. 쥐의 종, 종종 넓은 가용성, 크기로 인해 고용하고 절개 및 절제 상처, 이미징 및 조직 2 컬렉션에 적합한 피부 영역을 제공하기에 충분히 큰 같이 유순 자연 상처 치유 연구에 사용됩니다. 그러나 쥐가 느슨한 피부 동물 언급되면서, 쥐와 인간의 피부 해부학 적 차이가 심하게 고려해야한다. 이 독특한 특성은 래트 피부의 폐쇄 w 크게 기여하기보다는 오히려 상피화, 상처 수축 허용ounds 2. 또한, 쥐의 피하 panniculus 카르노 서스 근육의 존재는, 수축 모두 콜라겐 형성에 의해 3,4- 치유에 기여한다. 이러한 매우 중요한 해부학 적 차이는 허혈 래트의 피부 상처 모델의 개발을 고려하고, 특정 변형 상처 수축을 감소시키고 panniculus 카르노 서스의 근육 (5)의 영향력을 감소시키기 위해 실행되었다.
당뇨병 성 족부 궤양, 다리 궤양, 및 욕창에서 치유가 지연되고 이러한 상처는 만성 간주됩니다. 상처는 상처 수리 (6)의 다음 단계로 진행되지 않도록 상처 과도한 염증을 특징으로한다. 만성 상처의 개발에 주요 요인 중 하나는 염증을 취소 무능력에 기여 지역화 된 조직의 허혈 (감소 혈액의 흐름) 5입니다. 이 모델은 2003-4 년에 (개발 및 유효성을 검사 한 동안시), 상처 침대, 정상적인 상처 치유 동안 키 단계와이 모델 5 개발을위한 동기 부여 혈관 신생 유도를 테스트하기에 충분한 조직을 제공 할 수있는 표준화 된 동물 모델은 없었다. 즉, 여기에 제시된 모델은 첸 등에 의해 변형 된 형태로 사용 원래 슈워츠 등. 7, 이후 설명하는 허혈성 상처 모델의 변형입니다 말했다. (8)
변성 허혈성 상처 모델에서 변경 오히려 상피화보다 수축에 의해 치유 이어질 래트 상술 한 해부학 적 특징을 우회 이루어져왔다 : (1) 두 전층 절제 상처는 bipedicled 등쪽 피부 플랩 내에 생성된다 panniculus 카르노 서스 근육은 단지 근육의 근막 위의 해부에 의해 침대 상처에서 제거됩니다. (2) 자체가 플랩 t의 중간에 위치하는 더 좁은 혈액 공급이 랜덤 인 것을 보장 차원 및 상처를 가지고그는 플랩 허혈성 있습니다. (3) 실리콘 시트는 하부 조직으로부터 플랩의 재관류 재 부착을 방지 플랩 아래에 삽입된다. 상처 수축 고정 또는 실리콘 시트 (5)에 의해 봉합 플랩 (제거되지 않은) 제한된다.
이 모델은 최근 세 쥐 11 대 젊은 허혈성 상처 치유에 9,10 치유 허혈성 상처에 고압 산소의 효과에 이르기까지 연구에 사용되었으며, 장기간 조직 허혈의 신뢰할 수있는 모델로 입증되었습니다. bipedicled 플랩의 크기는 돼지 (12)와 마우스를 포함하여 다른 종 (3.0-3.5 cm 폭 10.5 cm 길이)와 F344 쥐 (2cm 폭으로 11cm 길이) 스프 라그을 포함한 다른 쥐의 변종에 맞게 조정되었습니다 13, 14. 이 비디오는 허혈성 피부 상처 모델의 데모에서 F344 근친 쥐의 피로를 사용합니다.
아래에 제시된 모든 동물 절차에 대한 승인 획득했다사우스 플로리다의 동물 관리위원회 (IACUC)의 대학에서 에드와 동물 복지법 및 관리에 대한 가이드 및 실험 동물의 사용의 모든 요구 사항을 준수.
Protocol
Representative Results
Discussion
쥐의 상처 치유는 종종 인해 감염된 상처와 interanimal 변화 (5)의 높은 비율을 치유 할 수있는 능력에 논쟁의 대상이되어왔다. 개발 중 모델의 원래 목표 중 하나는이 편차를 감소하는 것이었다. 특정 위치와 상처의 수를 감소 플랩의 폭에 대한 수정이, 실리콘 시트 및 소개 (일관성 cranio-꼬리 위치와 플랩을 중심으로)이 목표를 달성했다. 수축에 의해 상처 치유는 또한 인간에서와 같이,…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
The authors would like to acknowledge funding support from the University of South Florida, Department of Surgery (Mack Wu, MD, PhD).
Materials
| Name of Reagent/ Equipment | Company | Catalog Number | Comments/Description |
| Sil-Tec medical grade sheeting | Technical Products Inc. | 500-3 | nonreinforced, 0.01 inches in thickness |
| Mini Iris scissors, 8cm, curved, SS | World Precision Instruments | #503671 | |
| Ethilon Nylon Sutures | Ethicon | 1964G | black, size 4.0, PC-3 16mm needles (3/8 circle) |
| Laser Doppler Imager | Moor Instruments | moorLDI2-IR | Standard blood flow imager: http://us.moor.co.uk/product/moorldi2-laser-doppler-imager/8 |
| ImageJ | NIH | free download | http://rsb.info.nih.gov/ij/ |
| Mastisol | Henry Schein | Cat # 7289210 | Fisher Scientific NC9774929 |
| Tegaderm | Medical Specialties | 3M1624W | Fisher Scientific NC9922128 |
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