Хронический Сужение Травма крысы подглазничного нерва (ION-ТПП) для изучения невралгия тройничного нейропатической боли
Summary
This manuscript describes a rodent model to study trigeminal neuropathic pain. The methods described include surgical procedures to perform a chronic constriction injury of the rat’s infraorbital nerve and the post-surgical behavioral tests to measure the changes in spontaneous and evoked behavior that are indicative of persistent pain and allodynia.
Abstract
Животные модели являются важными инструментами для изучения патофизиологии и фармакологии нейропатической боли. Эта рукопись описывает хирургические процедуры и поведенческие учиться тройничного нейропатической боли у крыс. Чтобы удовлетворить специфику тройничного невропатической болевых синдромов, подглазничный нерва (ион) подвергают хронической травмы сужения (CCI) от слабо лигирования нерва. Внутри-орбитального подход представлен здесь, чтобы разоблачить и перевязывать иона в глазницы. После перевязки Ion, крысы проявляют изменения в поведении и спонтанной в ответ на фон Фрея волос стимуляции, которые свидетельствуют о постоянной боли и аллодинии механической. Две фазы могут быть определены в развитии поведенческих изменений. Во время первой недели после ионно-CCI (фаза 1), крысы проявляют повышенный и асимметричный холить деятельность лица, т.е. с умывания лица штрихи, прежде всего, направлены на нервной ранения Ion территории. Различие между номинальной грooming поведение, которое является частью более общего тела холить поведения, которая остается в значительной степени не зависит от ионно-ТПП, и лицо уход, что не является ни предшествует, ни с последующим тела ухода, который значительно возрастает после ионно-ТПП. В течение этого периода, реагирование на механическую стимуляцию территории иона уменьшается. Это hyporesponsiveness резко заменен крайней гиперчувствительности в результате чего даже очень слабые интенсивности стимула спровоцировать nocifensive поведение (фаза 2). Феноменологические сходство между этими поведенческими изменениями и сообщил, признаки лицевой боли (то есть, ответы на вредных стимуляции лица) предполагают наличие дизестезия / парестезии и механической аллодинии в лигированного Ion территории.
Introduction
Повреждение нервов соматосенсорной наиболее часто приводит к потере ощущения. Это не очень хорошо понимал, почему и как, в некоторых случаях, периферическая нервные расстройства приводит к хронической боли. В результате, болезненные невропатии оставаться сложной условие для лечения 1 и привести к существенному сокращению качества жизни пациентов 2-3. Животные модели являются важным инструментом для изучения эффективности существующих и вновь разрабатываемых лекарственных препаратов и определить патофизиологические механизмы, участвующие в развитии и поддержании нейропатической боли. Среди ключевых проблем для исследования трансляционной боли является выявление и измерение спонтанной боли у животных (т.е., физиологические, поведенческие и другие проявления, которые указывают на присутствие боли у животных, которые не сталкиваются с проблемой зондирования стимуляции, которые остро накладываются на базальной состояния субъекта ). Общая цель этой процедуры является хирургическим индуцироватьподглазничная повреждение нерва у крысы, что приводит к развитию и спонтанным и вызывал nocifensive поведение, которое может использоваться для изучения механизмов, участвующих в тройничного нейропатической боли и ее лечении.
Режиссер, изолированных лицо уход является единственной мерой спонтанного нейропатической боли у крыс. После хронической травмы сужения (ТПП) подглазничного нерва в (ионов), крысы проявляют изменения в поведении и спонтанной в ответ на тактильную стимуляцию, которые свидетельствуют о постоянной боли и аллодинии механической 4. После ионно-ТПП, крысы проявляют повышенный и асимметричный холить деятельность лица, т.е. с умывания лица штрихи, прежде всего, направлены на нервной ранения Ion территории. В отличие от вредных стимуляции лица (например, инъекции формалина) 5, не больно сенсорные расстройства (т.е., односторонний вибриссы отсечения, анестетик блокада подглазничного нерва, применение минерального масла на vibriSSAE) не или только очень кратко (т.е., первые минуты после начала) вызывают значительные изменения в лице холить поведение 6. Было решено, что это ненормальное уход после ионно-ТПП поведенческие проявления спонтанных, сильно отвращение ощущений на территории пострадавшего нерва. Такое поведение в ионно-ТПП крыс несет сильное сходство с спонтанную боль наблюдается у пациентов. Дальнейшие исследования выявили важную разницу между номинальной холить поведения, является частью ухаживания поведения более общей тела (то есть, "лицо уход во время теле стрижка"), которая остается в значительной степени не зависит от ионно-ТПП, и nocifensive лицо уход, что не является ни предшествует ни с последующим тела холить (т.е. "изолированные лица уход"), который значительно возрастает после ионно-ТПП 7-9. Фармакологически, лицо уход во время ухода тела является отличным контрольное измерение для неспецифических эффектов наркотиков ( <em> например, седативный эффект), который может ухудшить моторные функции. Движения передних конечностей в течение двух типов лица уход точно то же самое.
После ионно-промышленная палата, крысы проявляют также изменения в ответ на тактильную стимуляцию, которые свидетельствуют о механической аллодинии 4, 10. В течение первой недели (ов) после ионно-ТПП, крысы больше не реагируют на легкой или умеренной тактильные (т.е. фон Фрея ) раздражители. Это hyporesponsiveness затем резко заменен крайней гиперчувствительности в результате чего даже очень слабые интенсивности стимула спровоцировать nocifensive поведение. Наступление гиперчувствительности может варьироваться от крыс, но большинство крыс стали hyperresponsive после трех-четырех недель после операции.
Protocol
Representative Results
Discussion
Наиболее интересным аспектом модели ионно-ТПП является то, что она предоставляет уникальную меру спонтанного, не вызывал (нейропатической боли). Большинство исследований на животных нейропатической боли, используя позвоночника нервные модели, исключительно обратиться nocifensive поведен…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
The authors acknowledge the work that was done by the first author of the IoN-CCI model, Bart Vos†.
Materials
| Chromic catgut | Dynek | CG504 | |
| Nembutal (pentobarbital) | Pharmacy | ||
| Atropine | Pharmacy | ||
| Clippers for small animals – Favorita II | Aesculap | GT104 | |
| Stereotaxic instrument | Stoelting | 51600 | |
| Ophthalmic ointment (Liposic) | Pharmacy | ||
| Homeothermic monitor system | Harvard Apparatus | PY8 50-7221-F | |
| Cotton applicator | Pharmacy | ||
| Precision cotton swab | Qosina | 10225 | |
| Operation microscope | Kaps | SOM 62 | |
| Dumont #5 forceps | Fine Science Tools | 11251-10 | |
| Dumont forceps – Micro-blunted tips (#5/45) | Fine Science Tools | 11253-25 | |
| Scissors – blunt tips | Fine Science Tools | 14574-09 | |
| Polyester sutures – Mersilene (4-0) | Ethicon | R871H | |
| Digital video camera | Sony | HDR-CX330E | |
| Semmes-Weinstein Von Frey Aesthesiometer kit | Stoelting | 58011 |
Riferimenti
- Jensen, T. S., Gottrup, H., Sindrup, S. H., Bach, F. W. The clinical picture of neuropathic pain. Eur J Pharmacol. 429 (1-3), 1-11 (2001).
- Meyer Rosberg, K., et al. Neuropathic pain a multidimensional burden for patients. Eur J Pain. 5 (4), 379-389 (2001).
- Meyer Rosberg, K., et al. Comparison of the SF 36 and Nottingham Health Profile in patients with chronic neuropathic pain. Eur J Pain. 5 (4), 391-403 (2001).
- Vos, B. P., Strassman, A. M., Maciewicz, R. J. Behavioral evidence of trigeminal neuropathic pain following chronic constriction injury to the rats infraorbital nerve. J Neurosci. 14, 2708-2723 (1994).
- Clavelou, P., Pajot, J., Dallel, R., Raboisson, P. Application of the formalin test to the study of orofacial pain. Neurosci Lett. 103, 349-353 (1989).
- Vos, B. P., Hans, G., Adriaensen, H. Behavioral assessment of facial pain in rats face grooming patterns after painful and non-painful sensory disturbances in the territory of the rats infraorbital nerve. Pain. 76 (1-2), 173-178 (1998).
- Deseure, K. R., Adriaensen, H. F. Comparison between two types of behavioral variables of non evoked facial pain after chronic constriction injury to the rat infraorbital nerve. Comp Med. 52 (1), 44-49 (2002).
- Deseure, K., Adriaensen, H. Nonevoked facial pain in rats following infraorbital nerve injury a parametric analysis. Physiol Behav. 81 (4), 595-604 (2004).
- Deseure, K., Hans, G. Behavioral study of non evoked orofacial pain following different types of infraorbital nerve injury in rats. Physiol Behav. 138, 292-296 (2015).
- Deseure, K., Koek, W., Adriaensen, H., Colpaert, F. C. Continuous administration of the 5 hydroxytryptamine1A agonist (3-Chloro-4-fluoro-phenyl)-[4-fluoro-4-[[(5-methyl-pyridin-2-ylmethyl) -amino]-methyl]piperidin-1-yl]-methadone (F 13640) attenuates allodynia like behavior in a rat model of trigeminal neuropathic pain. J Pharmacol Exp Ther. 306 (2), 505-514 (2003).
- Zimmerman, M. Ethical Guidelines for investigations of experimental pain in conscious animals. Pain. 16, 109-110 (1983).
- Mogil, J. S., Crager, S. E. What should we be measuring in behavioral studies of chronic pain in animals. Pain. 112 (1-2), 12-15 (2004).
- Backonja, M. M., Stacey, B. Neuropathic pain symptoms relative to overall pain rating. J Pain. 5 (9), 491-497 (2004).
- Imamura, Y., Kawamoto, H., Nakanishi, O. Characterization of heat hyperalgesia in an experimental trigeminal neuropathy in rats. Exp Brain Res. 116, 97-103 (1997).
- Chichorro, J. G., Zampronio, A. R., Souza, G. E., Rae, G. A. Orofacial cold hyperalgesia due to infraorbital nerve constriction injury in rats reversal by endothelin receptor antagonists but not non steroidal anti inflammatory drugs. Pain. 123 (1-2), 64-74 (2006).
- Kramer, P. R., Bellinger, L. L. Meal Duration as a Measure of Orofacial Nociceptive Responses in Rodents. J Vis Exp. (83), e50745 (2014).
- Rossi, H. L., et al. Characterization of bilateral trigeminal constriction injury using an operant facial pain assay. Neuroscienze. 224, 294-306 (2012).
- Anderson, E. M., et al. Use of the Operant Orofacial Pain Assessment Device (OPAD) to Measure Changes in Nociceptive Behavior. J Vis Exp. (76), 50336 (2013).
