الإصابات المزمنة انقباض في الجرذان وتحت الحجاج الأعصاب (ايون CCI) لدراسة ألم العصب مثلث التوائم الأعصاب الألم
Summary
This manuscript describes a rodent model to study trigeminal neuropathic pain. The methods described include surgical procedures to perform a chronic constriction injury of the rat’s infraorbital nerve and the post-surgical behavioral tests to measure the changes in spontaneous and evoked behavior that are indicative of persistent pain and allodynia.
Abstract
النماذج الحيوانية هي أدوات هامة لدراسة الفيزيولوجيا المرضية والصيدلة من آلام الأعصاب. توضح هذه المخطوطة العمليات الجراحية والسلوكية لدراسة آلام الأعصاب التوأمي الثلاثي في الفئران. لتلبية خصوصية مثلث التوائم متلازمات الألم الأعصاب، يتعرض العصب تحت الحجاج (أيون) لإصابة في انقباض المزمنة (CCI) من خلال ligating فضفاضة العصب. ويقدم نهجا داخل المداري هنا لفضح وligate أيون في تجويف المداري. بعد ايون الربط، الفئران يحمل تغييرات في السلوك العفوي، واستجابة لفون فراي التحفيز الشعر التي تدل على استمرار الألم وآلام جلدية الميكانيكية. يمكن تعريف مرحلتين في تطوير التغييرات السلوكية. خلال الأسبوع الأول بعد ايون CCI (المرحلة 1)، تظهر الفئران لزيادة وغير المتماثلة مواجهة النشاط الاستمالة، أي مع غسل الوجه ضربات موجهة في المقام الأول إلى إقليم ايون جرح العصب. ويتم التمييز بين الوجه غرامooming السلوك الذي هو جزء من أعم السلوك الجسم الاستمالة، التي لا تزال بمنأى عن الأيوني CCI، ووجه الاستمالة الذي لا يسبقه ولا يتبعه الاستمالة الجسم، والتي زادت بشكل ملحوظ بعد ايون CCI. خلال هذه الفترة، يتم تقليل الاستجابة لالتحفيز الميكانيكي للأراضي أيون. يتم استبدال هذا hyporesponsiveness فجأة من قبل فرط الاستجابة المدقع حيث شدة التحفيز حتى ضعيفة جدا تثير السلوك nocifensive (المرحلة 2). أوجه التشابه بين الظواهر هذه التغيرات السلوكية وذكرت علامات الألم الوجه (أي الاستجابة لتحفيز الضارة من الوجه) تشير إلى وجود ضعف الحس / تنمل وآلام جلدية الميكانيكية في إقليم أيون ligated.
Introduction
تلف الأعصاب الحسية الجسدية غالبا ما يؤدي إلى فقدان الإحساس. ليست مفهومة بشكل جيد للغاية لماذا وكيف، في بعض الحالات، تلف الأعصاب الطرفية يؤدي إلى الألم المزمن. ونتيجة لذلك، من اعتلال الأعصاب المؤلم لا تزال حالة صعبة لعلاج 1 ويؤدي إلى تخفيضات كبيرة في نوعية حياة المريض 2-3. النماذج الحيوانية هي أداة هامة لدراسة فعالية الأدوية الحالية وضعت حديثا، وتحديد الآليات الفيزيولوجية المرضية تشارك في تطوير وصيانة ألم الأعصاب. ومن بين التحديات الرئيسية للبحوث الألم متعدية يتم تحديد وقياس الألم عفوية في الحيوانات (أي الفسيولوجية ومظاهر سلوكية أو الأخرى التي تشير إلى وجود ألم في الحيوانات التي لم يتم الطعن مع التحقيق التحفيز التي يتم فرضه بشكل حاد على حالة القاعدية الموجودة في الموضوع ). الهدف العام من هذا الإجراء هو للحث جراحيا لإصابة العصب تحت الحجاج في الجرذ الذي يؤدي إلى تطوير كل من العفوية وأثار سلوك nocifensive التي يمكن أن تستخدم لدراسة الآليات التي تشارك في آلام الأعصاب مثلث التوائم وعلاجه.
وجهت والوجه معزولة الاستمالة هي مقياس فريد من ألم الاعتلال العصبي التلقائي في الفئران. بعد الاصابة المزمنة انقباض (CCI) من العصب تحت الحجاج (أيون)، الفئران يحمل تغييرات في السلوك العفوي وردا على التحفيز عن طريق اللمس التي تدل على استمرار الألم وآلام جلدية الميكانيكية 4. بعد ايون CCI، تظهر الفئران لزيادة وغير المتماثلة مواجهة النشاط الاستمالة، أي مع غسل الوجه ضربات موجهة في المقام الأول إلى إقليم ايون جرح العصب. في المقابل إلى تحفيز الضارة من الوجه (على سبيل المثال، حقن الفورمالين) 5، وغير مؤلمة الاضطرابات الحسية (أي من جانب واحد لقطة vibrissae، مخدر تحت الحجاج الحصار العصبية، وتطبيق الزيوت المعدنية على vibrissae) لم أو فقط لفترة قصيرة جدا (أي دقيقة الأولى بعد بداية) لحث على تغيير كبير في مواجهة الاستمالة السلوك 6. وخلص إلى أن هذه الاستمالة غير طبيعية بعد ايون CCI هو مظهر سلوكي من العفوية، والأحاسيس مكره بقوة في أراضي الأعصاب المصابة. هذا السلوك في الفئران ايون CCI يحمل شبها قويا للألم عفوية لوحظت في مرضى. وقد حددت الدراسات مزيد من فارق هام بين مواجهة السلوك الاستمالة التي هي جزء من سلوك الاستمالة الجسم أكثر عمومية (أي، "وجها الاستمالة خلال الجسم الاستمالة")، والتي لا تزال تتأثر إلى حد كبير ايون CCI، ووجه nocifensive الاستمالة التي ليست مسبوقة ولا يتبعه الجسم الاستمالة (أي، "وجها معزولة الاستمالة")، والتي زادت بشكل ملحوظ بعد ايون CCI 7-9. دواء، وجه الاستمالة خلال الاستمالة الجسم تشكل قياس تحكم ممتاز للآثار المخدرات غير محددة ( <em> على سبيل المثال، والتخدير) قد تضر ظيفة الحركة. تحركات الأمامية خلال هذين النوعين من وجه الاستمالة هي نفسها بالضبط.
بعد ايون CCI، الفئران أيضا يحمل تغييرات ردا على التحفيز عن طريق اللمس التي تدل على آلام جلدية الميكانيكية 4، 10. وخلال الأسبوع الأول (ق) بعد ايون CCI، الفئران لم تعد تستجيب لعن طريق اللمس الخفيف أو المعتدل (أي فون فراي ) المحفزات. ثم يتم استبدال هذه hyporesponsiveness فجأة من قبل فرط الاستجابة المدقع حيث حتى شدة التحفيز ضعيفة جدا تثير السلوك nocifensive. بداية من فرط الاستجابة قد تختلف بين الفئران، ولكن أصبحت معظم الفئران hyperresponsive بعد 3-4 أسابيع بعد الجراحة.
Protocol
Representative Results
Discussion
الجانب الأكثر إثارة للاهتمام من طراز ايون CCI هو أنه يوفر مقياسا فريد من عفوية غير استحضر (الأعصاب) ألم. معظم الدراسات على الحيوانات من ألم الأعصاب، وذلك باستخدام نماذج العصب الشوكي، تعالج حصرا السلوكيات nocifensive (على سبيل المثال، النطق والردود انسحاب)، مما يعكس فرط…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
The authors acknowledge the work that was done by the first author of the IoN-CCI model, Bart Vos†.
Materials
| Chromic catgut | Dynek | CG504 | |
| Nembutal (pentobarbital) | Pharmacy | ||
| Atropine | Pharmacy | ||
| Clippers for small animals – Favorita II | Aesculap | GT104 | |
| Stereotaxic instrument | Stoelting | 51600 | |
| Ophthalmic ointment (Liposic) | Pharmacy | ||
| Homeothermic monitor system | Harvard Apparatus | PY8 50-7221-F | |
| Cotton applicator | Pharmacy | ||
| Precision cotton swab | Qosina | 10225 | |
| Operation microscope | Kaps | SOM 62 | |
| Dumont #5 forceps | Fine Science Tools | 11251-10 | |
| Dumont forceps – Micro-blunted tips (#5/45) | Fine Science Tools | 11253-25 | |
| Scissors – blunt tips | Fine Science Tools | 14574-09 | |
| Polyester sutures – Mersilene (4-0) | Ethicon | R871H | |
| Digital video camera | Sony | HDR-CX330E | |
| Semmes-Weinstein Von Frey Aesthesiometer kit | Stoelting | 58011 |
Riferimenti
- Jensen, T. S., Gottrup, H., Sindrup, S. H., Bach, F. W. The clinical picture of neuropathic pain. Eur J Pharmacol. 429 (1-3), 1-11 (2001).
- Meyer Rosberg, K., et al. Neuropathic pain a multidimensional burden for patients. Eur J Pain. 5 (4), 379-389 (2001).
- Meyer Rosberg, K., et al. Comparison of the SF 36 and Nottingham Health Profile in patients with chronic neuropathic pain. Eur J Pain. 5 (4), 391-403 (2001).
- Vos, B. P., Strassman, A. M., Maciewicz, R. J. Behavioral evidence of trigeminal neuropathic pain following chronic constriction injury to the rats infraorbital nerve. J Neurosci. 14, 2708-2723 (1994).
- Clavelou, P., Pajot, J., Dallel, R., Raboisson, P. Application of the formalin test to the study of orofacial pain. Neurosci Lett. 103, 349-353 (1989).
- Vos, B. P., Hans, G., Adriaensen, H. Behavioral assessment of facial pain in rats face grooming patterns after painful and non-painful sensory disturbances in the territory of the rats infraorbital nerve. Pain. 76 (1-2), 173-178 (1998).
- Deseure, K. R., Adriaensen, H. F. Comparison between two types of behavioral variables of non evoked facial pain after chronic constriction injury to the rat infraorbital nerve. Comp Med. 52 (1), 44-49 (2002).
- Deseure, K., Adriaensen, H. Nonevoked facial pain in rats following infraorbital nerve injury a parametric analysis. Physiol Behav. 81 (4), 595-604 (2004).
- Deseure, K., Hans, G. Behavioral study of non evoked orofacial pain following different types of infraorbital nerve injury in rats. Physiol Behav. 138, 292-296 (2015).
- Deseure, K., Koek, W., Adriaensen, H., Colpaert, F. C. Continuous administration of the 5 hydroxytryptamine1A agonist (3-Chloro-4-fluoro-phenyl)-[4-fluoro-4-[[(5-methyl-pyridin-2-ylmethyl) -amino]-methyl]piperidin-1-yl]-methadone (F 13640) attenuates allodynia like behavior in a rat model of trigeminal neuropathic pain. J Pharmacol Exp Ther. 306 (2), 505-514 (2003).
- Zimmerman, M. Ethical Guidelines for investigations of experimental pain in conscious animals. Pain. 16, 109-110 (1983).
- Mogil, J. S., Crager, S. E. What should we be measuring in behavioral studies of chronic pain in animals. Pain. 112 (1-2), 12-15 (2004).
- Backonja, M. M., Stacey, B. Neuropathic pain symptoms relative to overall pain rating. J Pain. 5 (9), 491-497 (2004).
- Imamura, Y., Kawamoto, H., Nakanishi, O. Characterization of heat hyperalgesia in an experimental trigeminal neuropathy in rats. Exp Brain Res. 116, 97-103 (1997).
- Chichorro, J. G., Zampronio, A. R., Souza, G. E., Rae, G. A. Orofacial cold hyperalgesia due to infraorbital nerve constriction injury in rats reversal by endothelin receptor antagonists but not non steroidal anti inflammatory drugs. Pain. 123 (1-2), 64-74 (2006).
- Kramer, P. R., Bellinger, L. L. Meal Duration as a Measure of Orofacial Nociceptive Responses in Rodents. J Vis Exp. (83), e50745 (2014).
- Rossi, H. L., et al. Characterization of bilateral trigeminal constriction injury using an operant facial pain assay. Neuroscienze. 224, 294-306 (2012).
- Anderson, E. M., et al. Use of the Operant Orofacial Pain Assessment Device (OPAD) to Measure Changes in Nociceptive Behavior. J Vis Exp. (76), 50336 (2013).
