大人のための味の好みアッセイ<em>ショウジョウバエ</em
Summary
Taste is an important sensory process which facilitates attraction to beneficial substances and avoidance of toxic substances. This protocol describes a simple ingestion assay for determining Drosophila gustatory preference for a given chemical compound.
Abstract
Olfactory and gustatory perception of the environment is vital for animal survival. The most obvious application of these chemosenses is to be able to distinguish good food sources from potentially dangerous food sources. Gustation requires physical contact with a chemical compound which is able to signal through taste receptors that are expressed on the surface of neurons. In insects, these gustatory neurons can be located across the animal’s body allowing taste to play an important role in many different behaviors. Insects typically prefer compounds containing sugars, while compounds that are considered bitter tasting are avoided. Given the basic biological importance of taste, there is intense interest in understanding the molecular mechanisms underlying this sensory modality. We describe an adult Drosophila taste assay which reflects the preference of the animals for a given tastant compound. This assay may be applied to animals of any genetic background to examine the taste preference for a desired soluble compound.
Introduction
動物は不利な条件とは別に有利な条件を区別するためにchemosensationを使用しています。この認識は、最良の食料源を決定する有毒物質を避けるか、最高の交配相手1を決定するようなもののために重要であることができます。嗅覚と味覚の五感：Chemosensationは、多くの場合、2つの感覚のコンポーネントに分割されています。これらの感覚の主な際立った特徴は、嗅覚（臭い）が味覚（味）は、不揮発性基板との物理的接触を必要としながら、周囲のガス状の化学環境をサンプリングするために使用されていることです。どちらの感覚モダリティは、適切な魅力や反発動作2を生成するために、脳内で処理し、デコードされた神経学的応答を刺激します。これらの感覚は、動物の生存のためにきわめて重要です。
キイロショウジョウバエのショウジョウバエは理解での使用のために人気が成長を続けているモデル生物であります昆虫は香りと味を感じるかる。ショウジョウバエは、分子の細胞、および行動経路の解剖のために利用可能な遺伝子ツールの富のために他のモデルシステムを超える多大な利点を提供します。過去15年間の仕事は、特定の細胞のアイデンティティ、神経細胞の受容体を特徴付けるし、香りと味の両方に関与するシグナル伝達機構に特に尽力してきました。さて、 ショウジョウバエ遺伝学の力はさらにこれらのプロセスは、単一のニューロンと単一回路レベル3-6で符号化されているかを解明するために使用されています。したがって、感覚経路に変更の容易得点読み出しを提供するアッセイは、これらのフィールドの継続的な前進に不可欠です。
多大を符号化し、脳内でどのように処理されるか嗅覚信号については知られているが、はるかに少ないが味覚経路における同様のメカニズムについて理解されています。ここで味preferenを確認するために使用できるプロトコルを記述します苦味化合物とは対照的に、 ショウジョウバエ 。 ショウジョウバエのCEは、哺乳類のように、一般的に甘味化合物を好みます。これらの食物源の任意の組み合わせは、遺伝子改変は、味の選択にどのように影響するか、既知決定するために、この実験の設計に利用することができます。さらに、薬理学的介入戦略は、同様に動物の味覚嗜好に対するそれらの効果について評価することができます。このアッセイの使いやすさと柔軟性はショウジョウバエの味覚知覚の性質を理解するために有用なパラダイムになります。
Protocol
Representative Results
Discussion
私たちは、 ショウジョウバエの味の好みを決定するための簡単で効果的なプロトコルを記述しています。このアッセイのバージョンは、日常の味覚化合物の異なる品質（苦味、甘味、酸味、塩味、うま味）を知覚する味覚受容体（GRS）の拠出を決定するための実験で使用されています。 ショウジョウバエのゲノムは、選択的スプライシング8,9により68識別された味覚受?…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
We would like to thank members of the Tessier lab for critical reading of this manuscript and helpful suggestions during the preparation of this protocol.
Materials
| Blue Food Coloring (Water, Propylene Glycol, FD&C Blue 1 and Red 40, Propylparaben) | McCormick | N/A | |
| Cryo/Freezer Boxes w/o Dividers | Fisher | 03-395-455 | |
| Dumont #5 Forceps | Fine Science Tools | 11251-20 | |
| Glacial Acetic Acid | Fisher | BP2401-500 | |
| Leica S6 E Stereozoom 0.63x-4.0x microscope | W. Nuhsbaum, Inc. | 10446294 | |
| Petri Dish (100 x 15 mm) | BD Falcon | 351029 | Reuseable if thoroughly washed and dried |
| Quick-Snap Microtubes | Alkali Scientific Inc. | C3017 | |
| Red Food Coloring (Water, Propylene Glycol, FD&C Reds 40 and 3, Propylparaben) | McCormick | N/A | |
| Sucrose | IBI Scientific | IB37160 |
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