Summary

Tratamento de Stent biodegradável magnésio de aneurisma sacular em um modelo do rato - introdução da técnica cirúrgica

Published: October 01, 2017
doi:

Summary

Reproduzido de modelos animais experimentais são necessários para o teste de materiais de embolização de romance, que foi criadas para tratar de oclusão endovascular de aneurisma intracraniana (IA). O presente estudo tem como objetivo desenvolver uma técnica cirúrgica segura e padronizada para stent assistida embolização de aneurisma sacular em um modelo animal de rato.

Abstract

O andamento constante no arsenal de técnicas disponíveis para tratamento endovascular de aneurisma intracraniano requer modelos animais experimentais acessíveis e reproduzidos para testar materiais de embolização romance como desviadores de stents e fluxo. O objetivo do presente projeto foi projetar um seguro, rápido, e técnica cirúrgica padronizada para stent assistida embolização de aneurisma sacular em um modelo animal de rato.

Aneurisma sacular foram criada a partir de um enxerto arterial da aorta descendente. Os aneurismas hipoglossal foram transplantados através de anastomose fim-a-lado para a aorta abdominal infra-renal de um syngenic machos Wistar rato pesagem > 500g. Após a anastomose de aneurisma, embolização de aneurisma foi realizada utilizando stents magnésio expansível por balão (2,5 x 6 mm). O sistema de stent foi retrógrado introduzido a partir da aorta abdominal inferior usando uma técnica de Seldinger modificada.

Após uma série de piloto de 6 animais, um total de 67 ratos foram operados de acordo com o estabelecido procedimentos habituais de funcionamento. Quer dizer, tempo de cirurgia, anastomose mau tempo e mau tempo do local da punção de artéria de sutura foram 167 ± 22 min, 26 ± 6 min e 11 ± 5 min, respectivamente. A taxa de mortalidade foi de 6% (n = 4). A taxa de morbidade foi de 7,5% (n = 5), e trombose de stent foi encontrada em 4 casos (n = 2 cedo, n = 2 final de trombose de stent).

Os resultados demonstram a viabilidade de oclusão de stent padronizada de aneurisma sacular lateral em ratos – com baixos índices de morbidade e mortalidade. Este procedimento de embolização do stent combina a oportunidade de estudar conceitos inovadores de stent ou desviador de fluxo com base em dispositivos, bem como os aspectos moleculares da cura.

Introduction

Hemorragia subaracnoidea devido a uma ruptura de aneurisma intracraniano está associada com uma alta taxa de mortalidade e pobre resultado neurológico em muitos sobreviventes. Atualmente existem duas abordagens gerais para ocluir IA: qualquer recorte microcirúrgica (que exige exposição operativa do aneurisma), ou oclusão endovascular. Como o tratamento de bobina menos invasivo endovascular do estreito gargalo i foi mostrado para ser associada com morbidade ligeiramente inferior (especialmente na circulação posterior1,2), opções de tratamento endovascular tornaram-se o modalidade preferida de muitos centros de neurocirurgia. Inúmeros dispositivos foram desenvolvidos a fim de estender as indicações de tratamento endovascular e superar a limitação principal de recorrência IA depois de bobinamento. Stents intracranianas são especialmente promissoras para superar essas limitações, como eles servem como um andaime para neo-endothelization e bobina de prevenção da hérnia, bem como proteger a artéria pai e melhorar intraluminal intraaneurysmal trombose causada por redução do afluxo de sangue. Há uma necessidade de estudar novos stents intracraniana em um modelo animal de baixo custo; a nível macroscópico e molecular.

O objetivo deste estudo foi criar um seguro, rápido e padronizada a técnica cirúrgica para a aplicação do stent em um modelo de aneurisma sacular já estabelecido em ratos3,4,5. No presente projeto, avaliamos o papel de um stent biodegradável de magnésio.

Protocol

Wistar macho ratos com um peso médio de 592 g (± 50 SD) e a média de idade de 20 semanas foram alojados em instalações animais em uma temperatura de 22-24 ° C e o ciclo claro/escuro de 12 horas, com livre acesso à água da torneira e uma dieta de pelota. Os animais receberam atendimento dos humanos em conformidade com as normas institucionais. Os experimentos foram aprovados pelo Comitê de Animal conta no Cantão de Berna, Suíça (ser 102/13). Seguimos rigorosamente as recomendações para a pesquisa Animal: rel…

Representative Results

A duração média da cirurgia foi 167 min (± 22), 26 min (± 6) de que eram necessários para criação de aneurisma e um mais 23 (± 7) min necessário para a aplicação do stent e reconstrução da arteriotomia (Figura 3). Macroscópicas em-stent trombose, morbidade e mortalidade foram os pontos de extremidade principais do estudo. Os períodos regulares de acompanhamento foram 7 dias (n = 28) …

Discussion

Modelos de stents e animal bioabsorvível
Nos últimos anos, a tendência geral em medicina esteve longe implantes permanentes (que permanecem no corpo do paciente para o resto da sua vida) para materiais bio-absorvíveis. Stents de magnésio, em particular, são já bastante estabelecidos em Cardiologia8,9. Infelizmente esses stents ainda não foram testados para outras aplicações, tais como doenças cerebrovasculares. Por esta razão, deci…

Divulgazioni

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Agradecemos a Eugen Hofmann e Philine Zumstein para sua assistência técnica excelente e por compartilhar seus conhecimentos em procedimentos de aplicação do stent. Agradecemos Majlinda Kalanderi para o desenho anatômico.

Materials

Medetomidine any generic
Ketamin any generic
Buprenorphine any generic
Phosphate buffered saline
Sodium dodecyl sulfate (0.1%)
3-0 resorbable suture Ethicon Inc., USA VCP428G
5-0 non absorbable suture Ethicon Inc., USA 8618G
6-0 non-absorbable suture B. Braun, Germany C0766070
9-0 non-absorbable suture B. Braun, Germany G1111140
10-0 non-absorbable suture Covidien, USA N2530 Monosof
Operation microscope Zeiss, Germany
Digital microscope camera Sony, Japan HXR-MC1P
Standard surgical instruments multiple see protocol 7.a
Microsurgical instruments multiple see protocol 7.b
Vascular clip applicator B. Braun, Germany FT495T
Temporary vascular clamps B. Braun, Germany
19G Puncture needle  Angiomed GmbH, Germany 15820010
Hydrophobic guide wire Cook Medical, USA G00650
4F sheat Cordis Corporation, USA 504-604A
Inflation syringe
Laboratory shaker Stuart SRT6
Magnesium Stent 2.5/6 AMS with Polymer coating Biotronik, Switzerland
Surgery drape 
Sterile cellulose swabs
Syringes 1 ml and 2 ml
Hollow needles 18G and 26G
Isotonic sodium chloride
Microtubes
Eye ointment Bausch + Lomb Inc, USA Lacrinorm any generic
Small animal shaver

Riferimenti

  1. Molyneux, A., et al. International Subarachnoid Aneurysm Trial (ISAT) of neurosurgical clipping versus endovascular coiling in 2143 patients with ruptured intracranial aneurysms: a randomised trial. Lancet. 360 (9342), 1267-1274 (2002).
  2. Molyneux, A. J., et al. International subarachnoid aneurysm trial (ISAT) of neurosurgical clipping versus endovascular coiling in 2143 patients with ruptured intracranial aneurysms: a randomised comparison of effects on survival, dependency, seizures, rebleeding, subgroups, and aneurysm occlusion. Lancet. 366 (9488), 809-817 (2005).
  3. Marbacher, S., et al. Intraluminal cell transplantation prevents growth and rupture in a model of rupture-prone saccular aneurysms. Stroke. 45 (12), 3684-3690 (2014).
  4. Marbacher, S., Marjamaa, J., Abdelhameed, E., Hernesniemi, J., Niemela, M., Frosen, J. The Helsinki rat microsurgical sidewall aneurysm model. J Vis Exp. (92), e51071 (2014).
  5. Marbacher, S., et al. Loss of mural cells leads to wall degeneration, aneurysm growth, and eventual rupture in a rat aneurysm model. Stroke. 45 (1), 248-254 (2014).
  6. Pritchett-Corning, K. R., Luo, Y., Mulder, G. B., White, W. J. Principles of rodent surgery for the new surgeon. J Vis Exp. (47), (2011).
  7. Bernal, J., et al. Guidelines for rodent survival surgery. J Invest Surg. 22 (6), 445-451 (2009).
  8. Flege, C., et al. Development and characterization of a coronary polylactic acid stent prototype generated by selective laser melting. J Mater Sci Mater Med. 24 (1), 241-255 (2013).
  9. Zartner, P., Cesnjevar, R., Singer, H., Weyand, M. First successful implantation of a biodegradable metal stent into the left pulmonary artery of a preterm baby. Catheter Cardiovasc Interv. 66 (4), 590-594 (2005).
  10. Hakamata, Y., et al. Green fluorescent protein-transgenic rat: a tool for organ transplantation research. Biochem Biophys Res Commun. 286 (4), 779-785 (2001).
  11. Bouzeghrane, F., Naggara, O., Kallmes, D. F., Berenstein, A., Raymond, J. International Consortium of Neuroendovascular C. In vivo experimental intracranial aneurysm models: a systematic review. AJNR Am J Neuroradiol. 31 (3), 418-423 (2010).
  12. Aquarius, R., Smits, D., Gounis, M. J., Leenders, W. P., De Vries, J. Flow diverter implantation in a rat model of sidewall aneurysm: a feasibility study. J Neurointerv Surg. , (2017).
  13. Indolfi, C., et al. A new rat model of small vessel stenting. Basic Res Cardiol. 95 (3), 179-185 (2000).
  14. Oyamada, S., et al. Trans-iliac rat aorta stenting: a novel high throughput preclinical stent model for restenosis and thrombosis. J Surg Res. 166 (1), e91-e95 (2011).
  15. Kwon, J. S., et al. Comparison of bare metal stent and paclitaxel-eluting stent using a novel rat aorta stent model. J Vet Sci. 12 (2), 143-149 (2011).
  16. Rouer, M., Meilhac, O., Delbosc, S., et al. A new murine model of endovascular aortic aneurysm repair. J Vis Exp. (77), e50740 (2013).
  17. Hardhammar, P. A., et al. Reduction in thrombotic events with heparin-coated Palmaz-Schatz stents in normal porcine coronary arteries. Circulation. 93 (3), 423-430 (1996).
  18. Guerrero, A., et al. Antioxidant effects of a single dose of acetylsalicylic acid and salicylic acid in rat brain slices subjected to oxygen-glucose deprivation in relation with its antiplatelet effect. Neurosci Lett. 358 (3), 153-156 (2004).
  19. Niitsu, Y., et al. Repeat oral dosing of prasugrel, a novel P2Y12 receptor inhibitor, results in cumulative and potent antiplatelet and antithrombotic activity in several animal species. Eur J Pharmacol. 579 (1-3), 276-282 (2008).
  20. Kastrati, A., et al. Intracoronary stenting and angiographic results: strut thickness effect on restenosis outcome (ISAR-STEREO) trial. Circulation. 103 (23), 2816-2821 (2001).
  21. Lowe, H. C., James, B., Khachigian, L. M. A novel model of in-stent restenosis: rat aortic stenting. Heart. 91 (3), 393-395 (2005).
  22. Finn, A. V., et al. A novel rat model of carotid artery stenting for the understanding of restenosis in metabolic diseases. J Vasc Res. 39 (5), 414-425 (2002).

Play Video

Citazione di questo articolo
Nevzati, E., Rey, J., Coluccia, D., D’Alonzo, D., Grüter, B., Remonda, L., Fandino, J., Marbacher, S. Biodegradable Magnesium Stent Treatment of Saccular Aneurysms in a Rat Model – Introduction of the Surgical Technique. J. Vis. Exp. (128), e56359, doi:10.3791/56359 (2017).

View Video