Кавернозных нерва стимуляции и запись интракавернозные давления в крыса
Summary
Это исследование описывает упрощенный хирургическая процедура и технику для выполнения кавернозных нерва стимуляции с изоляцией нерв электрод комплекс с помощью силиконового клея и измерения интракавернозные давления.
Abstract
Стимулирование кавернозных нерв (CN) и измерение интракавернозные давления (ИКП) широко использовались для тестирования и оценки терапии для лечения эректильной дисфункции. Однако методы, используемые варьируются между лабораториями, и ловушки по-прежнему существуют. Целью данного исследования было для описания хирургическая техника, которая обеспечит надежное и воспроизводимые модели. Предоставляя ischiocavernosus мышцы ее точке вставки на седалищного бугра, полового члена голени можно cannulated с минимальными диссекции и повреждения структур, участвующих в эректильной функции. Повторной стимуляции CN, без необходимости для подъема и сушки, был достигнут с помощью 125 мкм биполярного серебряного электрода и биосовместимых кремния клея для изолировать комплекс электрод нерва. Этот метод предотвращает neuropraxia путем уменьшения растяжения и сушки нерва и обеспечивает полную изоляцию нерва, отрицая электрической утечки и предотвращения стимуляция альтернативных путей.
Introduction
В естественных условиях изучения эректильной функции у подопытных животных началась в 1863 году с новаторские экспериментальные работы Экхард1. Электростимуляция тазовых нервов было использовано для стимулировать рост МСП в собак. На протяжении 20-го века аналогичные экспериментальные протоколы были использованы в более крупных животных, таких как собаки, обезьяны, кошек и кроликов. Оценке эректильной функции в крыса была впервые разработана Куинлан et al. 19892. С тех пор метод был изменен и дополнен ряд других группы34. Сегодня крыса является наиболее широко используемых животных моделей для изучения патологии эректильной дисфункции и оценки возникающих вариантов лечения. Основные этапы процедуры включают, запись системного артериального давления с помощью строки в сонной артерии, катетеризации полового члена голени меру ПМС и стимулирование CN побудить увеличение ICP. Хотя некоторые исследователи уточнили модель, его воспроизводимости остается проблемой, и переменная результаты были получены в разных лабораториях. По-прежнему сохраняются некоторые недостатки.
Предыдущие статьи5,6,,78,9,10 описывают использование полного полового контакта с degloving пениса для катетеризации пещеристые тела. Это не оптимальный подход как манипуляции и подрывной рассечение вызывает повреждения структур, которые необходимы для эректильной функции. Рассечение CN была хорошо описана в10,11, но стимуляции нерва не является оптимальным из-за многочисленных факторов, которые могут повлиять на результаты экспериментов. Методика стимуляции CN включает в себя лифтинг нерв от окружающих тканей, потянув на электрод биполярный крюк, который располагается вокруг нерва, и сушки перед каждой стимуляцией нерва. Это может привести к различной степени повреждения нерва и электрического тока утечки, что приводит к снижению ответ или ложных увеличение МСП путем стимуляции альтернативные пути например, мышцы тазового дна, мочевого пузыря и желудочно-кишечного тракта тракт12. Все эти факторы ограничивают воспроизводимость.
В ходе нашего исследования мы наблюдали, как глубина, так и тип анестезии имеют глубокое влияние на МСП. Анестетики используемые являются Пентобарбитал натрия, кетамин/Ксилазина или кетамина/мидазолама инъекций или изофлюрановая/Кислородные ингаляции.
Здесь мы описываем упрощенная хирургический метод и представить данные в поддержку стандартизации экспериментальный протокол.
Protocol
Representative Results
Discussion
Основной целью данного исследования было описать упрощенная хирургическая техника катетеризации Крю полового члена для записи ПМС и изоляции CN для электростимуляции. Мы ввели изменения рассечение пещеристые тела, чтобы упростить операции и воспроизводимых записей увеличения числа ?…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Авторы имеют без подтверждений.
Materials
| Adson forceps | Fine Science Tool | 11006-12 | |
| Dumont #7 forceps | Fine Science Tool | 11271-30 | |
| Dumont #5 forceps | Fine Science Tool | 11273-20 | |
| ToughCut Mayo scissor | Fine Science Tool | 14110-15 | |
| Miniature Vannas Spring scissor | Fine Science Tool | 15006-09 | |
| Ultra Fine Hemostat | Fine Science Tool | 13020-12 | |
| Crile Hemostat | Fine Science Tool | 13004-14 | |
| Kwik-Sil Adhesive | World Precision Instruments | KWIK-SIL | |
| Teflon coated silver wire 0.125 mm | World Precision Instruments | AGT0510 | |
| Elastic wire retractors | Custom made | ||
| Scalpel blade | Fine Science Tool | 10023-00 | |
| PE-50 tubing | Warner Instruments | 64-0753 | |
| 23 G Needle | Kruuse | 121272 | |
| SD-9 Square Pulse Stimulator | Somatco | 1077/183 | |
| Blood pressure transducer and cable | World Precision Instruments | BLPR2 | |
| Raucotupf Cotton-tipped Applicators | Lohmann-Raucher | 11966 | |
| Pro-ophta Ocular Sticks | Lohmann-Raucher | 16515 | |
| NaCl 0,9 % 100 mL | Local pharmacy | ||
| Heparin | Local pharmacy | ||
| 25 mL Syringe | Odense University Hospital | ||
| Vet eye ointment – Viscotears | Local pharmacy | ||
| silver wires | Science Products GmbH, Heidelberg, Germany | ||
| Silicon Glue | Kwik-Sil, World Precision Instruments, Sarasota, FL, USA | ||
Riferimenti
- Eckhard, C. . Untersuchungen über die Erektion des Hundes In: Beiträge zur Anatomie und Physiologie. , 123-166 (1863).
- Quinlan, D. M., Nelson, R. J., Partin, A. W., Mostwin, J. L., Walsh, P. C. The rat as a model for the study of penile erection. J Urol. 141 (3), 656-661 (1989).
- Heaton, J. P., Varrin, S. J., Morales, A. The characterization of a bio-assay of erectile function in a rat model. J Urol. 145 (5), 1099-1102 (1991).
- Martinez-Pineiro, L., et al. Rat model for the study of penile erection: pharmacologic and electrical-stimulation parameters. Eur Urol. 25 (1), 62-70 (1994).
- Hayashi, N., et al. The effect of FK1706 on erectile function following bilateral cavernous nerve crush injury in a rat model. J Urol. 176 (2), 824-829 (2006).
- Burnett, A. L., Becker, R. E. Immunophilin ligands promote penile neurogenesis and erection recovery after cavernous nerve injury. J Urol. 171 (1), 495-500 (2004).
- Yamashita, S., et al. Nerve injury-related erectile dysfunction following nerve-sparing radical prostatectomy: a novel experimental dissection model. Int J Urol. 16 (11), 905-911 (2009).
- Burnett, A. L., et al. GGF2 is neuroprotective in a rat model of cavernous nerve injury-induced erectile dysfunction. J Sex Med. 12 (4), 897-905 (2015).
- Lin, H., et al. Nanoparticle Improved Stem Cell Therapy for Erectile Dysfunction in a Rat Model of Cavernous Nerve Injury. J Urol. 195 (3), 788-795 (2016).
- Kapoor, M. S., Khan, S. A., Gupta, S. K., Choudhary, R., Bodakhe, S. H. Animal models of erectile dysfunction. J Pharmacol Toxicol Methods. 76, 43-54 (2015).
- Mehta, N., Sikka, S., Rajasekaran, M. Rat as an animal model for male erectile function evaluation in sexual medicine research. J Sex Med. 5 (6), 1278-1283 (2008).
- Cellek, S., Bivalacqua, T. J., Burnett, A. L., Chitaley, K., Lin, C. S. Common pitfalls in some of the experimental studies in erectile function and dysfunction: a consensus article. J Sex Med. 9 (11), 2770-2784 (2012).
- Chung, E., De Young, L., Brock, G. B. Investigative models in erectile dysfunction: a state-of-the-art review of current animal models. J Sex Med. 8 (12), 3291-3305 (2011).
- Mullerad, M., Donohue, J. F., Li, P. S., Scardino, P. T., Mulhall, J. P. Functional sequelae of cavernous nerve injury in the rat: is there model dependency. J Sex Med. 3 (1), 77-83 (2006).
- Albersen, M., et al. Injections of adipose tissue-derived stem cells and stem cell lysate improve recovery of erectile function in a rat model of cavernous nerve injury. J Sex Med. 7 (10), 3331-3340 (2010).
