تسجيل للضغط إينتراكافيرنوس في الفئران وتحفيز العصب الكهفي
Summary
تصف هذه الدراسة إجراء العمليات الجراحية مبسطة وتقنية للقيام بتحفيز العصب الكهفي مع عزل العصب-مسرى معقدة باستخدام غراء السيليكون وقياس الضغط إينتراكافيرنوس.
Abstract
تحفيز العصب الكهفي (CN) وقياس ضغط إينتراكافيرنوس (برنامج المقارنات الدولية) وقد استخدمت على نطاق واسع لاختبار وتقييم العلاج لضعف الانتصاب. ومع ذلك، تختلف الأساليب المستخدمة بين المختبرات، والمخاطر لا تزال قائمة. وكان الهدف من هذه الدراسة لوصف تقنية جراحية توفر نموذج موثوق بها واستنساخه. وذلك بتعريض عضلة إيشيوكافيرنوسوس في نقطة الإدراج في الاحدوبه إيشيال، يمكن أن مقني ساق القضيب مع الحد الأدنى من تشريح والإصابة إلى الهياكل المعنية في وظيفة الانتصاب. وقد تحقق التحفيز المتكرر من CN، دون الحاجة إلى رفع والتجفيف، باستخدام 125 ميكرومتر القطبين قطب الفضة والتصاق السليكون متوافق حيويا لعزل مجمع العصب الكهربائي. هذا الأسلوب يمنع neuropraxia عن طريق الحد من التمدد وتجفيف العصب ويوفر العزل الكامل للعصب، ينفي تسرب الكهربائية ومنع الحث على مسارات بديلة.
Introduction
بدأت الدراسة في فيفو الانتصاب في الحيوانات التجريبية في عام 1863 بأعمال تجريبية رائدة إيكهارد1. واستخدمت اليكتروستيموليشن أعصاب الحوض للحث على زيادة برنامج المقارنات الدولية في الكلاب. خلال القرنال 20، وبروتوكولات تجريبية مماثلة استخدمت في أكبر من الحيوانات مثل الكلاب والقرود والقطط والأرانب. أولاً وضع كوينلان et al. في عام 19892تقييم وظيفة الانتصاب في الفئران. منذ ذلك الحين تم تعديل الأسلوب وتحديثها بواسطة عدة أخرى مجموعات34. اليوم، الفأر نموذج الحيوان الأكثر استخداماً لدراسة علم الأمراض الانتصاب وتقييم خيارات العلاج الناشئة. وتشمل الخطوات الرئيسية لهذا الإجراء، تسجيل ضغط الدم النظامية باستخدام خط في الشريان السباتي، كانوليشن ساق القضيب لتدبير برنامج المقارنات الدولية، وحفز CN للحث على زيادة في برنامج المقارنات الدولية. على الرغم من أن العديد من الباحثين قد صقل النموذج، في إمكانية تكرار نتائج لا يزال يمثل مشكلة، وقد أبلغت نتائج متغير عن مختبرات مختلفة. مطبات عدة لا تزال قائمة.
السابقة المواد5،،من67،،من89،10 وصف استخدام التعرض القضيب كامل مع ديجلوفينج القضيب للجسم الكهفي cannulation. هذا ليس نهج أمثل كالتلاعب وتشريح التخريبية يسبب الضرر للهياكل، التي تعتبر أساسية لوظيفة الانتصاب. وقد تم تشريح CN وصفاً جيدا10،11، ولكن تحفيز العصب ليس الحل الأمثل بسبب العوامل المتعددة التي يمكن أن تؤثر على النتائج التجريبية. ويتضمن أسلوب التحفيز CN رفع العصب من الأنسجة المحيطة بسحب على مسرى هوك ثنائي القطب، الذي يتم وضعه حول العصب، وتجفيف العصب قبل كل التحفيز. وهذا يمكن أن يؤدي إلى درجات مختلفة من تلف الأعصاب والكهربائية التسرب الحالي، أسفر عن تقلص ردا أو زيادة كاذبة في برنامج المقارنات الدولية من خلال تحفيز مسارات بديلة مثلاًوعضلات قاع الحوض والمثانة والجهاز الهضمي 12من المسالك. وكل هذه العوامل تحد من إمكانية تكرار نتائج.
أثناء دراستنا، لاحظنا أن كل من العمق ونوع من التخدير تأثيراً عميقا في برنامج المقارنات الدولية. المسكنات المستخدمة هي بينتوباربيتال الصوديوم أو حقن الكيتامين/إكسيلازيني أو الكيتامين/الميدازولام isoflurane/الأكسجين استنشاق.
هنا يصف لنا طريقة جراحية مبسطة وتقديم البيانات لدعم توحيد بروتوكول تجريبي.
Protocol
Representative Results
Discussion
وكان الهدف الرئيسي لهذه الدراسة لوصف تقنية جراحية مبسطة من ساق القضيب كانوليشن لتسجيل برنامج المقارنات الدولية والعزلة من CN اليكتروستيموليشن. ادخلنا تعديلات على التشريح للجسم الكهفي لتبسيط عملية جراحية وتوفير تسجيلات استنساخه من الزيادة في برنامج المقارنات الدولية مع تحفيز CN. مع شق جلد…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
المؤلفين قد لا شكر وتقدير.
Materials
| Adson forceps | Fine Science Tool | 11006-12 | |
| Dumont #7 forceps | Fine Science Tool | 11271-30 | |
| Dumont #5 forceps | Fine Science Tool | 11273-20 | |
| ToughCut Mayo scissor | Fine Science Tool | 14110-15 | |
| Miniature Vannas Spring scissor | Fine Science Tool | 15006-09 | |
| Ultra Fine Hemostat | Fine Science Tool | 13020-12 | |
| Crile Hemostat | Fine Science Tool | 13004-14 | |
| Kwik-Sil Adhesive | World Precision Instruments | KWIK-SIL | |
| Teflon coated silver wire 0.125 mm | World Precision Instruments | AGT0510 | |
| Elastic wire retractors | Custom made | ||
| Scalpel blade | Fine Science Tool | 10023-00 | |
| PE-50 tubing | Warner Instruments | 64-0753 | |
| 23 G Needle | Kruuse | 121272 | |
| SD-9 Square Pulse Stimulator | Somatco | 1077/183 | |
| Blood pressure transducer and cable | World Precision Instruments | BLPR2 | |
| Raucotupf Cotton-tipped Applicators | Lohmann-Raucher | 11966 | |
| Pro-ophta Ocular Sticks | Lohmann-Raucher | 16515 | |
| NaCl 0,9 % 100 mL | Local pharmacy | ||
| Heparin | Local pharmacy | ||
| 25 mL Syringe | Odense University Hospital | ||
| Vet eye ointment – Viscotears | Local pharmacy | ||
| silver wires | Science Products GmbH, Heidelberg, Germany | ||
| Silicon Glue | Kwik-Sil, World Precision Instruments, Sarasota, FL, USA | ||
Riferimenti
- Eckhard, C. . Untersuchungen über die Erektion des Hundes In: Beiträge zur Anatomie und Physiologie. , 123-166 (1863).
- Quinlan, D. M., Nelson, R. J., Partin, A. W., Mostwin, J. L., Walsh, P. C. The rat as a model for the study of penile erection. J Urol. 141 (3), 656-661 (1989).
- Heaton, J. P., Varrin, S. J., Morales, A. The characterization of a bio-assay of erectile function in a rat model. J Urol. 145 (5), 1099-1102 (1991).
- Martinez-Pineiro, L., et al. Rat model for the study of penile erection: pharmacologic and electrical-stimulation parameters. Eur Urol. 25 (1), 62-70 (1994).
- Hayashi, N., et al. The effect of FK1706 on erectile function following bilateral cavernous nerve crush injury in a rat model. J Urol. 176 (2), 824-829 (2006).
- Burnett, A. L., Becker, R. E. Immunophilin ligands promote penile neurogenesis and erection recovery after cavernous nerve injury. J Urol. 171 (1), 495-500 (2004).
- Yamashita, S., et al. Nerve injury-related erectile dysfunction following nerve-sparing radical prostatectomy: a novel experimental dissection model. Int J Urol. 16 (11), 905-911 (2009).
- Burnett, A. L., et al. GGF2 is neuroprotective in a rat model of cavernous nerve injury-induced erectile dysfunction. J Sex Med. 12 (4), 897-905 (2015).
- Lin, H., et al. Nanoparticle Improved Stem Cell Therapy for Erectile Dysfunction in a Rat Model of Cavernous Nerve Injury. J Urol. 195 (3), 788-795 (2016).
- Kapoor, M. S., Khan, S. A., Gupta, S. K., Choudhary, R., Bodakhe, S. H. Animal models of erectile dysfunction. J Pharmacol Toxicol Methods. 76, 43-54 (2015).
- Mehta, N., Sikka, S., Rajasekaran, M. Rat as an animal model for male erectile function evaluation in sexual medicine research. J Sex Med. 5 (6), 1278-1283 (2008).
- Cellek, S., Bivalacqua, T. J., Burnett, A. L., Chitaley, K., Lin, C. S. Common pitfalls in some of the experimental studies in erectile function and dysfunction: a consensus article. J Sex Med. 9 (11), 2770-2784 (2012).
- Chung, E., De Young, L., Brock, G. B. Investigative models in erectile dysfunction: a state-of-the-art review of current animal models. J Sex Med. 8 (12), 3291-3305 (2011).
- Mullerad, M., Donohue, J. F., Li, P. S., Scardino, P. T., Mulhall, J. P. Functional sequelae of cavernous nerve injury in the rat: is there model dependency. J Sex Med. 3 (1), 77-83 (2006).
- Albersen, M., et al. Injections of adipose tissue-derived stem cells and stem cell lysate improve recovery of erectile function in a rat model of cavernous nerve injury. J Sex Med. 7 (10), 3331-3340 (2010).
