Utilisant des ultrasons de haute résolution à l’apparition de tumeur de moniteur et de la croissance dans les modèles issus du génie génétique du cancer du pancréas
Summary
Cet article décrit l’utilisation de l’échographie haute résolution chez les souris génétiquement modifiées de cancer du pancréas. L’objectif principal est de fournir une instruction détaillée pour la détection et l’évaluation des tumeurs pancréatiques endogènes.
Abstract
Le LSL-Kras G12D / +; LSL-Trp53R172H / +; PDX-1-Cre modèle murin (KPC) représente un modèle transgénique établi et fréquemment utilisé pour évaluer de nouveaux traitements dans le cancer pancréatique. Apparition de la tumeur est variable dans le modèle de la KPC âgés de 8 semaines à plusieurs mois. Par conséquent, les outils d’imagerie non invasive sont tenus d’écran pour l’apparition de la tumeur et du moniteur pour la réponse au traitement. Pour résoudre ce problème, différentes approches ont émergé ces dernières années. Échographie haute résolution dispose d’atouts majeurs tels que le caractère non invasif, temps de session rapide et une image haute résolution sans exposition aux radiations. Cependant, l’échographie chez la souris n’est pas trivial et suffisamment de connaissances anatomiques et compétences pratiques nécessaires pour son exécution avec succès l’échographie haute résolution dans des modèles précliniques de cancer du pancréas. Avec l’article suivant, un guide pratique détaillé pour une échographie abdominale dans les modèles murins en mettant l’accent sur des modèles de cancer pancréatique endogène est présenté. Par ailleurs, on trouvera un résumé des erreurs courantes et comment les éviter.
Introduction
Modèles de souris génétiquement modifiées ont acquis une importance croissante dans la recherche sur le cancer en raison de leur capacité à récapituler étroitement la nature complexe de la carcinogenèse humaine1,2,3. Un des plus fréquemment utilisé des modèles pour étudier le développement du cancer pancréatique, la progression et la réponse thérapeutique est caractérisée par une mutation activatrice de l’oncogène Kras, combinée à une inactivation de la tumeur suppresseur p534. Cette LSL-KrasG12D / +; LSL-Trp53R172H / +; PDX-1-Cre modèle murin (KPC) imite la progression progressive des lésions pré-invasives intraépithéliales pancréatiques (Panine) au carcinome invasif. Phénotypiquement, presque toutes les souris développent ACPE dans les six premiers mois après la naissance. Toutefois, le modèle de CPK par rapport aux modèles transplantés, révèle un début de tumeur très variable de 8 semaines à plusieurs mois4. Une fois les tumeurs pancréatiques atteignent une certaine taille (5 à 9 mm de diamètre), la croissance tumorale accélère rapidement et souris devront être inscrits dans des essais précliniques5. La détection exacte de l’apparition de la tumeur et de la taille de la tumeur est donc une condition essentielle pour la logistique de l’étude préclinique et le suivi de la thérapie. En général, plusieurs approches comme l’imagerie par résonance magnétique (IRM)6, tomodensitométrie,7,8,9 ou échographie haute résolution de numérisation peut être utilisée pour effectuer le dépistage des tumeurs et 10de thérapie. Chaque technique a ses avantages et ses inconvénients. Bien que MRI- ou une tomodensitométrie (CT)-l’imagerie permet l’acquisition de données haute résolution ainsi que calcul de volume précis, temps d’examen prolongé sous sédation générale, et il faut un matériel très onéreux et ne permet pas fréquent numérisation sur une longue période de temps. En revanche, petit animal échographie est une méthode établie qui peut être employée pour dépister les pathologies abdominales en souris11. Avantages de cette méthode d’imagerie sont courtes numérisation fois, haute résolution, et la possibilité d’utiliser l’échographie doppler ou contraste amélioré par ultrasons (UFC) pour visualiser une perfusion des organes en parallèle. Toutefois, des connaissances anatomiques, l’imagination 3D et une formation pratique approfondie sont nécessaires pour l’interprétation de l’image correcte.
Dans l’article suivant, un protocole détaillé pour l’utilisation de l’échographie haute résolution dans le modèle de CPK est fourni. En outre, les images échographiques standard sont représentés et étiquetés avec des structures d’orgue pour faciliter l’orientation de l’enquêteur.
Protocol
Representative Results
Discussion
Avec ce protocole, une description détaillée pour quantifier les tumeurs du pancréas, à l’aide de l’échographie abdominale haute résolution dans des modèles murins transgéniques est fournie. Récemment, Sastra et coll. publié une description détaillée comment quantifier les tumeurs pancréatiques dans les modèles murins, mais aucune instruction visualisées sur la préparation et la manipulation comme condition sine qua non pour toutes les autres étapes ont été indiqué11</su…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Cette recherche a été financée par la Deutsche Krebshilfe (groupe Eder Max pour AN : 110972), une bourse de thèse de doctorat d’impliquant (pour PME/PMI) et une bourse de la Fondation Else-Kröner-Fresenius (à RGG) à l’University Medical Center Goettingen. Nous remercions Jutta Blumberg et Ulrike Wegner d’assistance technique d’experts. Nous remercions également tous les techniciens animales à l’animalerie de l’University Medical Center Goettingen pour garder la souris. Toutes les expériences ont été effectuées conformément à la réglementation allemande de bien-être animal.
Materials
| Visual Sonics Vevo2100 High Resolution Ultrasound System, including imaging stage and anesthesia line | FUJIFILM VisualSonics Inc, Canada | VS-11945 | |
| Vevo 2100 MicroScan Transducer MS-550-D (22-55MHz) | FUJIFILM VisualSonics Inc, Canada | VS-11874 | |
| Vevo Anesthesia System (anesthesia induction chamber with fresh and waste gas inlet) | FUJIFILM VisualSonics Inc, Canada | SA-12055 | |
| Vevo Imaging Station (working stage with nose cone for anesthesia supply) | FUJIFILM VisualSonics Inc, Canada | SA-11982 | |
| electronic pet clippers | Panasonic Marketing Europe, Germany | 5025232484324 | Panasonic ER-PA10-s |
| Labotect Hot plate | Labor tech Göttingen, Germany | 13854 | |
| eye cream (ophthalmic ointment) | Schülke&Mayr, Germany | 9080249 | |
| veterinary isoflurane | Abbvie, Germany | 4831867 | |
| depilatory cream | RB healthcare UK, United Kingdom | 8218535 | |
| 70% ethanol (v/v) in distilled water | TH. Geyer, Germany | 22941000 | |
| ultrasound gel | Asmuth, Germany | 13477 | |
| tissue wipes | Kimberly-Clark Germany, Germany | 7558 | |
| cotton tips | Meditrade, Germany | 75481116 | |
| glass bowl for ultrasound gel | ARC France, France | H1149 | |
| water bowl | W & P Trading Co., USA | B00K2P6PLQ | |
| gauze sponges | Fuhrmann, Germany | 960504 |
Riferimenti
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